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1、人身皂苷的提取及苷元的分离鉴定2008 级药学 2 班任丽娜 1【摘要】：人参为五加科植物(Panax ginseng C.A.Mey. )，人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微心源性休克 1等的治疗。目的是通过实验掌握人参皂苷的提取分离方，人参皂苷元与多个分子糖结合成苷，具有较强的亲水性，易溶于水和低级醇类，本实验通过乙醇渗漉法对人参皂苷进行提前，分离用硅胶柱层析法，最后得到齐墩果酸、人参二醇、人参三醇，为进一步对人参的研究做准备。关键词：人参皂苷、提取分离、渗漉法、硅胶柱层析法【英语翻译】：Ginseng Araliaceae (Panax ginsen
2、g CAMey.), ginseng has the nourishing strength, solid off Fumai, Spleen Yifei, soothe the nerves of the function, like removal for physically weak, cold extremities micro cardiogenic shock pulse 1 and other treatment. Purpose is to test the extraction and separation of ginsenosides master side, gins
3、eng saponins with more than one molecule of sugar together to form glycosides, with a strong hydrophilic, soluble in water and lower alcohols, the experimental method by using ethanol percolation ginsenoside In advance, separated by silica gel column chromatography, and finally by oleanolic acid, PD
4、S, Panaxatriol for further research on the ginseng preparation. Keywords：Ginsenosides, extraction, percolation method, silica gel column chromatography2【目录】摘要-1目录-2绪论-3实验内容-4实验方法-4实验讨论-6实验结论-6参考文献-73【绪论】：人 参 皂 苷 （ Ginsenoside） 是 一 种 固 醇 类 化 合 物 ， 三 萜 皂 苷 。 人参主要化学成分为多种人参皂苷、挥发油、糖类、氨基酸、有机酸及酯、维生素以及多种微量元
5、素等 2。人 参 皂 苷 （ ginsenoside， GS)是 人 参 的 主 要 有 效 成 分 ， 现 已明 确 结 果 的 GS 单 体 约 有 40 余 种 。 从五加科植物人参根、茎、叶中提取的主要活性成分。具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、抗衰老等作用。人参皂苷可分为 3 种类型： （1）人参二醇型（ A 型） 代表化合物有人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd （2）人参三醇型（ B 型） 代表化合物有人参皂苷 Re、Rf、Rg1、Rg2 （3）齐墩果酸型（ C 型） 代表化合物有人参皂苷 Ro4A 型 B 型 C 型A 型、B 型皂苷的皂苷元属于四环三萜
6、，C 型皂苷的皂苷元则是五环三萜的衍生物。人参皂苷 A 型、B 型皂苷元属达玛烷型，是达玛烷二醇的衍生物，其中 C-20 的构型为 S。A 型皂苷元为 20（S ）- 原人参二醇；B 型皂苷元为20（S）-原人参三醇。这两种皂苷元的性质均不太稳定，当皂苷用酸水解时，C-20 构型容易由 S 型转为 R 型。继之侧链受热发生环合，环合后生成人参二醇及人参三醇。20（S ）- 原人参二醇分子中有 3 个羟基，其中 C3 -OH，C29-OH可能与糖结合成苷，由于 C-20 羟基是叔羟基，结合的糖与 50%乙酸共热即被水解，而 C3 -OH 与糖形成的苷键必须在较强的酸性条件下才能水解。Rh2： 具
7、 有 抑 制 癌 细 胞 向 其 它 器 官 转 移 ， 增 强 机 体 免 疫 力 ， 快 速 恢复 体 质 的 作 用 。 对 癌 细 胞 具 有 明 显 的 抗 转 移 作 用 ， 可 配 合 手 术 服 用 增 强 手 术后 伤 口 的 愈 合 及 体 力 的 恢 复 . Rg： 具 有 兴 奋 中 枢 神 经 ， 抗 疲 劳 、 改 善 记 忆 与 学 习 能 力 、 促 进DNA、 RNA 合 成 的 作 用 。 Rg1： 可 快 速 缓 解 疲 劳 、 改 善 学 习 记 忆 、 延 缓 衰 老 ， 具 有 兴 奋 中 枢 神 经作 用 、 抑 制 血 小 板 凝 集 作 用 。
8、 Rg2： 具 有 抗 休 克 作 用 ， 快 速 改 善 心 肌 缺 血 和 缺 氧 ， 治 疗 和 预 防 冠 心 病 。Rg3： 可 作 用 于 细 胞 生 殖 周 期 的 G2 期 ， 抑 制 癌 细 胞 有 丝 分 裂 前 期 蛋 白 质和 ATP 的 合 成 ， 使 癌 细 胞 的 增 殖 生 长 速 度 减 慢 ， 并 且 具 有 抑 制 癌 细 胞 浸 润 、抗 肿 瘤 细 胞 转 移 、 促 进 肿 瘤 细 胞 凋 亡 、 抑 制 肿 瘤 细 胞 生 长 等 作 用 。 Rb1： 西 洋 参 (花 旗 参 )的 含 量 最 多 ， 具 影 响 动 物 睾 丸 的 潜 力 ，
9、亦 会 影 响小 鼠 的 胚 胎 发 育 ， 具 有 增 强 胆 碱 系 统 的 功 能 ， 增 加 乙 酰 胆 碱 的 合 成 和 释 放 以及 改 善 记 忆 力 作 用 . 5Rb2： DNA, RNA 的 合 成 促 进 作 用 、 脑 中 枢 调 节 具 有 抑 制 中 枢 神 经 ， 降 低细 胞 内 钙 ， 抗 氧 化 ， 清 除 体 内 自 由 基 和 改 善 心 肌 缺 血 再 灌 注 损 伤 等 作 用 . Rc： 人 参 皂 甙 -Rc 是 一 种 人 参 中 的 固 醇 类 分 子 。 具 有 抑 制 癌 细 胞 的 功 能 。可 增 加 精 虫 的 活 动 力 . R
10、b3： 可 增 强 心 肌 功 能 ， 保 护 人 体 自 身 免 疫 系 统 。 可 以 用 于 治 疗 各 种 不同 原 因 引 起 的 心 肌 收 缩 性 衰 竭 . Rh： 具 有 抑 制 中 枢 神 经 、 催 眠 作 用 ， 镇 痛 、 安 神 、 解 热 、 促 进 血 清 蛋 白质 合 成 作 用 . Rh1： 具 有 促 进 肝 细 胞 增 殖 何 促 进 DNA 合 成 的 作 用 ， 可 用 于 治 疗 和 预 防肝 炎 、 肝 硬 化 . Ro： 具 有 消 炎 、 解 毒 、 抗 血 栓 作 用 ， 抑 制 酸 系 血 小 板 凝 结 以 及 抗 肝 炎 作用 活 化
11、 巨 噬 细 胞 作 用 . 其 中 尤 其 是 人 参 皂 苷 RH2 的 抗 肿 瘤 作 用 在 其 中 是 最强 的 ,提 高 免 疫 力 ,缓 解 疲 劳 的 作 用 最 好人参的提取方法有水提取法，有机溶剂提取法，渗露法，蒸馏法，二氧化碳超临界提取法，超声浸渍发等，本实验用乙醇渗漉法进行提取，分离的方法是硅胶柱层析法。【实验内容】：主 要 仪 器 ： 渗 漉 器 、 硅 胶 柱 、 水 浴 锅 、 硅胶-CMC 薄层板主要材料：干燥人参茎叶、70%乙醇、苯乙酸乙酯（8 ：2）【实验方法】：人参皂苷的提取： 乙醇渗漉法：先 将 人 参 茎 叶 粉 碎 成 粗 末 ， 加 入 30 倍
12、量 的 70%乙 醇 浸润 24 小 时 ， 使 药 材 粗 粉 充 分 膨 胀 ， 分 次 均 匀 地 装 入 底 部 垫 有 脱 脂 棉 的 渗漉 器 中 ， 每 次 装 好 后 用 木 棒 压 紧 。 装 完 中 药 材 ， 上 面 盖 上 纱 布 ， 并 压 上 一 层洗 净 的 小 石 子 ； 以 免 加 入 溶 剂 后 使 药 粉 浮 起 。 然 后 打 开 渗 滤 器 下 口 的 开 关 ，再 慢 慢 地 从 渗 漉 器 上 部 加 进 溶 剂 ， 当 液 体 自 下 口 流 出 时 关 闭 上 开 关 ， 从 而 使流 出 的 沼 体 倒 入 渗 漉 器 内 ， 继 续 加 入
13、 溶 剂 至 高 出 药 粉 面 数 厘 米 为 止 ， 然 后 加盖 ， 放 置 24-48 小 时 后 打 开 下 口 开 关 ， 使 渗 漉 液 缓 缓 流 出 。 按 规 定 量 收 集 漉液 ， 回 收 溶 剂 即 得 浸 膏 （ 人 参 总 皂 苷 ） 。人 参 皂 苷 元 的 水 解 和 苷 元 的 分 离 ：硅 胶 柱 层 析 法 ：1.称 量 。 200-300 目 硅 胶 ， 称 30-70 倍 于 上 样 量 ； 如 果 极 难 分 ， 也 可 以 用100 倍 量 的 硅 胶 H。 干 硅 胶 的 视 密 度 在 0.4 左 右 ， 所 以 要 称 40g 硅 胶 ，
14、用 烧杯 量 100ml 也 可 以 。 2.搅 成 匀 浆 。 加 入 干 硅 胶 体 积 一 倍 的 溶 剂 用 玻 璃 棒 充 分 搅 拌 。 如 果 洗 脱 剂是 石 油 醚 /乙 酸 乙 酯 /丙 酮 体 系 ， 就 用 石 油 醚 拌 ； 如 果 洗 脱 剂 是 氯 仿 /醇 体 系 ，就 用 氯 仿 拌 。 如 果 不 能 搅 成 匀 浆 ， 说 明 溶 剂 中 含 水 量 太 大 ， 尤 其 是 乙 酸 乙 酯/丙 酮 ， 如 果 不 与 水 配 伍 走 分 配 色 谱 的 话 ， 必 须 预 先 用 无 水 硫 酸 钠 久 置 干 燥 。氯 仿 用 无 水 氯 化 钙 干 燥 ， 以 除 去 1%的 醇 。 如 果 样 品 对 酸 敏 感 ， 不 能 用 氯 仿体 系 过 柱 。 63.装 柱 。 将
