M3浸提剂法

第一部分 M3 土壤养分测定方法M3 土壤有效磷、钾、钙、镁、铁、锰、铜、锌的测定实验方法：M3 浸提剂；火焰原子分光光度计法测定实验要求：认真操作；详细记录；计算正确实验时间：2009 年 11 月~2010 年 4 月1、基本原理：M3 浸提剂中的 0.2mol/L HOAc-0.25mol/L NH4NO3形成了 pH 2.5 的强缓冲体系，并可浸提出交换性-K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn 等阳离子；0.015mol/L NH 4F-0.013mol/L HNO3可调控 P 从 Ca、Al、Fe 无机磷源中的解吸；0.001mol/L EDTA 可浸出螯合态 Cu、Zn、Mn、Fe 等，因此 M3 浸提剂可提取土壤中有效的磷、钾、钙、镁、铁、锰、铜、锌等养分2 、试剂配制：NH4F-EDTA 贮备液：称取 NH4F（分析纯）138.9g 溶于约 600ml 去离子水中，摇动，再加入EDTA（分析纯）73.1g，溶解后用去离子水定容至 1000ml，充分混匀后贮存于塑料瓶中（在冰箱内可长期使用） ，可供 5000 个样次使用，如工作量不大可按比例减小贮备液数量M3 浸提剂：用 1000ml 或 2000ml 容量瓶准确量取 2000ml 去离子水，加入 5000ml 塑料桶中，称取 NH4NO3（分析纯）100.0g，使之溶解，加入 20.00ml NH4F-EDTA 贮备液，再加入冰醋酸（即 17.4mol/L，分析纯）57.5ml 和浓 HNO3（即 15.8mol/L，分析纯）4.10ml，用1000ml 容量瓶加水定容至 5000ml，充分混合均匀。

此液 pH 应为 2.50.1，贮存于塑料瓶中备用 [1]钼锑抗试剂：称取酒石酸氧锑钾（K(SbO)C 4H4O6，分析纯）0.5g 溶于 100ml 去离子水中，配制成 0.5%的溶液另称取钼酸铵（(NH 4)6Mo7O24·4H2O，分析纯）10.0g 溶于 450ml 水中，慢慢地加入 153ml 浓 H2SO4（分析纯） ，边加边搅动再将 100ml 0.5%酒石酸氧锑钾溶液加入钼酸铵溶液中，最后加水至 1000ml，充分摇匀，贮存于棕色瓶中，此为钼锑贮备液临用前（当天） ，称取抗坏血酸（即维生素 C，分析纯）1.5g，溶于 100ml 钼锑贮备液中，混匀，此为钼锑抗试剂，有效期 24 小时，如保存于冰箱中则有效期较长上试剂中H2SO4的浓度为 5.5mol/L（1/2H 2SO4） ，钼酸铵为 1%，酒石酸氧锑钾为 0.05%，抗坏血酸为1.5%2.4 5 mg/L P 标准溶液：称取 l05C 烘干 2 小时的磷酸二氢钾（KH 2PO4，分析纯）0.2195g，置于 400m1 去离子水中，加入浓 H2SO4 5m1（防长霉菌，可使溶液长期保存） ，转入 1000ml 容量瓶中，用水定容。

此溶液为 50mg/L P 标准溶液准确吸取此贮备溶液25.00m1，稀释至 250ml，即为 5mg/L P 标准溶液（此稀溶液不宜久存） K 标准贮备液[c(K)=100mg/L]：准确称取氯化钾（KCl，105-110C 干燥 2 小时，分析纯）0.1907g，溶于去离子水中，定容至 1000ml，摇匀后待用Ca 标准贮备液[c(Ca)=100mg/L]：准确称取碳酸钙（CaCO3，110C 干燥 4 小时，分析纯）0.2497g，溶于 1.0 mol/L HCl 溶液中，煮沸赶去 CO2，用去离子水洗入 1000mL 容量瓶中，定容Mg 标准贮备液[c(Mg)=100mg/L]：准确称取 0.1000g 金属镁（光谱纯）溶于少量 6 mol/L HCl溶液中，用去离子水洗入 1000mL 容量瓶中，定容M3 有效微量元素标液的配置Fe 标准溶液：准确称取 0.1000g 铁丝（光谱纯）或硫酸亚铁铵（Fe(NH 4)2(SO4)2·6H2O）0.7023g，溶于 20ml 0.6mol/L HCl 溶液种，必要时加热使之溶解，转入 1000ml 容量瓶中，用去离子水定容此为 100mg/L Fe 贮备标准液。

Mn 标准溶液：将 MnSO4·7H2O 于 150C 下烘干，移入高温电炉中于 400C 灼烧 6 小时后成为无水 MnSO4准确称取无水 MnSO4 0.2479g，溶于水中，加入 1ml 浓硫酸，用去离子水定容至1000ml，即得 100mg/L Mn 贮备标准液Cu 标准溶液：准确称取 CuSO4·5H2O（分析纯，未风化的）0.3928g，溶于1.0mol/L（1/2H 2SO4）溶液中，并用 1.0mol/L（1/2H 2SO4）溶液定容至 1000ml，即得 100mg/L Cu 贮备标准液Zn 标准溶液：取少许金属锌粒（分析纯）于表面皿上，用 10%HCl 将其表面的氧化物溶去，再用去离子水将 HCl 洗净，最后用无水乙醇（分析纯）洗 2-3 次，放在干燥器（氯化钙作干燥剂）中干燥 24 小时准确称取 0.1000g 金属锌，放在 1000ml 容量瓶中，加 50ml 去离子水和 1ml 浓 H2SO4溶解，加水定容，即得 100mg/L Zn 贮备标准液或准确称取 ZnSO4·7H2O（分析纯，未风化的）0.4398g，溶于去离子水中，加几滴 HCl 酸化，定容至 1000ml，即得100mg/L Zn 贮备标准液。

3 浸提步骤用量样器量取 5.00mL 风干土壤（过 2mm 尼龙筛）,同时称量并记录其质量,于 100-200ml 塑料瓶[注 2]中，加入 50ml Mehlich 3 浸提剂，盖严后于往复振荡机（振荡强度为180 转/分钟）上振荡 5 分钟然后干过滤，收集 滤 液 [3]于 50ml 塑 料 瓶 中 整 个 浸 提 过 程 应在 恒 温 条 件 下 进 行 ， 温 度 控 制 在 251C[4]4 浸出液中有效养分的定量：4.1 M3 有效磷的测定准确吸取 2.00-10.00ml 土壤浸出液（依肥力水平而异）于 50ml 容量瓶中，加水至约30ml，加入 5.00ml 钼锑抗试剂显色，定容摇匀 [5]显色 30 分钟后，在 880nm 处比色如冬季气温较低时，注意保持显色时温度在 15C 以上，最好在恒温室内显色，以加快显色速度测定的同时做空白校正 [6]工作曲线：准确吸取 5mg/L P 标准溶液 0、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ml，分别放入50ml 容量瓶中，加水至约 30ml，加入 5.00ml 钼锑抗试剂显色，定容摇匀显色 30 分钟后，在 880nm 处比色。

结果计算土壤有效 P，mg/L = c(P)  显色液体积  分取倍数 V0式中： c(P)---待测液中 P 浓度（mg/L） ；显色液体积---50ml；分取倍数---浸出液体积 / 吸取滤液体积；V0---土样体积，L4.2 M3 速效钾的测定M3 浸出液 [7]中钾可直接用火焰光度计测定工作曲线 准确吸取 100mg/L K 标准贮备液0、1.00、2.50、5.00、10.00、15.00、20.00ml，分别放入 50ml 容量瓶中，用 Mehlich 3浸提剂定容，摇匀，即得 0、2.00、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00mg/L K 标准系列溶液结果计算土壤有效 K，mg/L = c(K)  V /V0式中： c(K)---待测液中 K 浓度（mg/L） ；V---浸提剂体积，ml；V0---土样体积，L4.3 M3 有效钙、镁的测定M3 浸出液适当稀释后 [8]可直接用原子吸收分光计（AAS） [9]测定工作曲线: Ca 标液浓度范围：0-24mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：422.67nmMg 标液浓度范围：0-6mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：285.21nm。

结果计算土壤有效 Ca 或 Mg，mg/L = c(Ca 或 Mg)  f  V /V0式中： c(Ca 或 Mg)---待测液中 Ca 或 Mg 的浓度（mg/L） ；f---稀释倍数；V---浸提剂体积，ml；V0---土样体积，L4.4 M3 有效微量元素含量的测定M3 浸出液适当稀释 [11]后可直接用原子吸收分光计（AAS）测定工作曲线: Fe：0-10mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：248.3nmMn：0-5mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：279.5nmCu：0-4mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：324.8nmZn：0-1mg/L，用 M3 浸提剂定容；测定波长：213.8nm结果计算土壤有效微量元素(铁或锰、铜、锌)，mg/L = c(元素)f V/V0式中： c(元素)---待测液中某一元素的浓度（mg/L） ；f---稀释倍数；V---浸提剂体积，ml；V0---土样体积，L5 注释5.1 为了避免 F-以 CaF2形态沉淀和磷的再吸附，应将 Mehlich 3 浸提液的 pH 控制在 2.9以下配制 Mehlich 3 浸提剂时应尽量准确，这样可不必每次都测定 pH 值。

因为溶液中的F-容易对玻璃电极或复合电极造成损坏5.2 玻璃器皿不会造成污染，但橡皮塞尤其是新塞子会严重引起 Zn 的污染，建议最好使用塑料瓶盛试液如果同时测定大量与微量元素，玻、塑器皿最好事先用 0.2%AlCl3·6H2O或 8-10%HCl 溶液中浸泡过夜，洗净后备用，以防微量元素的污染5.3 M3 法的土壤浸出液常带颜色，有粉红色、淡黄色或橙黄色，深浅不一，因土而异粉红色可能与 Mn 含量高或浸提出的某些有机物质有关，黄色可能与 Fe 含量高或有机物质有关溶液颜色可加入活性 C 脱色，但会对 Zn 造成污染，故以不加活性 C 为宜5.4 注意浸提温度的控制冬季气温较低时，可采取一些保温措施5.4 比色液中 NH4+和 EDTA 终浓度高时对 P 比色均有干扰，NH 4+多时生成兰色沉淀，EDTA 多时不显色或生成白色沉淀（EDTA 酸） 试验表明，在一般钼锑抗比色法的条件下 NH4+不得大于 0.01mol/L, EDTA 不得大于 1mmol/L（0.001mol/L） 5.6 研究发现，若在工作曲线中分别加入一定量的 M3 浸提剂，显色后很快会在较高 P 浓度的各点出现沉淀，从而影响测定结果的准确性。

故选用空白校正的方法消除试剂的误差，即：根据未知样品吸取浸出液的体积数，相应地做空白测定，再从未知样品的结果中扣除掉空白值5.7 若浸出液中钾的浓度超过测定范围，应用 M3 浸提剂稀释后再测定5.8 使用 AAS 法测定有效 Ca、Mg 时，浸出液需要用 M3 浸提剂适当稀释 1-20 倍后方可测定，可根据具体情况确定稀释倍数5.9 如果条件具备，可直接用电感耦合等离子发射光谱仪（ICP-AES）进行测定，而不需要稀释；而且在同一浸出液中可同时测定 P、K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、B 等多种元素5.10 应特别注意浸提过程的标准化同时应进行空白测定5.11 使用 AAS 法测定有效微量元素 Fe、Mn、Cu、Zn 时，浸出液需要用 M3 浸提剂适当稀释后方可测定一般测 Fe 时，可能稀释 1-10 倍；测 Mn 时，可能稀释 2-10 倍；测 Cu、Zn 时一般不需要稀释可根据具体情况确定稀释倍数土壤全氮的测定1 适用范围 本方法适用于各类土壤全氮含量的测定2 测定原理样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮） 包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原。