《am-am-fs-ac-02005 香兰豆萃取液中的香兰素和乙基香兰素》由会员分享，可在线阅读，更多相关《am-am-fs-ac-02005 香兰豆萃取液中的香兰素和乙基香兰素（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、天马行空官方博客：http:/ ；QQ:1318241189；QQ 群：175569632AMAMFSAc02005 香兰豆 萃取液 香兰素 乙基香兰素 纸色谱法AM-AM-FS-Ac-02005香兰豆萃取液中的香兰素和乙基香兰素1.仪器和试剂1.1 仪器(a)层析纸。(b)层析缸。(c)点液管 (10L)。(d)长波紫外光源。1.2 试剂(a)流动相溶剂环已烷-乙酸乙醋-甲醇 (100+30+20)。(b)固定相溶剂10% 二甲基酰胺（DMF）的乙醚溶液。(c)碳酸钠溶液溶解无水碳酸钠 4g 于水中，稀释至 1L。2.试验过程2.1 标准曲线的制备制备香兰素和乙基香兰素在 35% 的乙醇溶液
2、，使其每 100mL 中分别含 0.10, 0.15，0.20，0.30 和 0.40g。用硬质铅笔在距层析纸底边 2.5cm 和 37cm 处划两条线，两线应为平行线。在 2.5cm 线处，用 10L 每种溶液点样。样品点从低的左侧 5cm 处开始，各点距离为 2.5cm。香兰素和乙基香兰素分别使用各自的层析纸。所有的点样都应使用同一微量点样管，每次用前要充分冲洗。样品点应在空气中干燥而不用加热干燥，小心靠纸边处持纸以避免出现高的空白值。同时，在有一长槽的层析缸底部放入 100mL 水。用流动相溶液灌满长槽，层析缸加盖密封，放置 15min。将层析纸从顶部浸入固定相溶液，使固定相溶液从顶部渗
3、到 3.7cm 的线处，余下的纸底部的 3.7cm 没有固定相溶液。切勿使固定相溶液达到样点将层析纸浸入盛有固定相溶液的浅盘很容易做到这一点。层析纸在空气中干燥数分钟后，启开层析缸的密封盖，将层析纸放入缸中，将底边浸入流动相溶液。再将层析缸盖密，即使溶剂前沿到达了顶部，但也让它展开 2 h。将层析纸取出，在空气中干燥之。不要让展开后的层析纸暴露在空气中超过 1h。如需推迟观测，可将层析纸放在瓶内，保存在冰箱内。将层析纸放入 2 L 广口瓶的上部，盖住瓶盖，瓶底有一盛氨水的小烧杯，使层析纸在氨雾中暴露数分钟。在长波紫外光源下检验层析纸，用软铅笔将暗兰色区域划线，乙基香兰素，此香兰素有更高的 Rf
4、值。用剪刀将划出的纸区剪下，并将每个纸片剪成较小碎片，放入 50mL 锥形瓶中。再从层析纸侧剪下 2 个空白点，每点的面积约等于展开点的面积。所取的空白点应远离点样区和它们展开而上升后样点的周围纸区。移取 10ml 碳酸钠溶液，置于锥形瓶中，旋转，放置 1015min，经常旋转。用离心法或用滤纸快速过滤，弃去滤液的最初部分。在 348 nm 波长处测定吸光度 A，用碳酸钠溶液作参比溶液。测定两个空白溶液 A 的平均值，绘制标准曲线前，应将标准溶液的 A 值减去空白溶液 A 的平均值。2.2 测定如样品含大于 0.4g 香兰素/100mL，用 35% 乙醇将其稀释至低于此浓度。用制备标准曲线所用的同一微量点样管在 2.5cm 线上点样 10L。按上述方法进行操作，通过与标准曲线比较，测定香兰素和乙基香兰素的含量。3.来源AOAC 官方方法 966.13 (17 版)
