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1、 最 终 报 告 书 TAH-805 矿物质活性 水 韩国化学实验研究院 试验概要 试验题目： 矿物 质 活性水对 鳉鱼 的急性鱼毒性试验。 试验番号： TAH-805 试验物质：矿物 质 活性水。 试验目的：通过矿物 质 活性水对鳉鱼的急性鱼毒性试验，用于试验物质的安全基础资料。 试验方法：本次试验根据 “OECD guidelines for the testing of chemicals 203, “Fish, acute Toxicity test”(1992. 7. 17)实施。 试验依托人 ： 名称： （株）韩国 AGROBIO 生物 地址：仁川市 延寿区 东春洞 913-11
2、南洞计量证明业所 三楼 代表：安泰英 联系： Tel. 032-834-6288, Fax. 032-834-6277 试验机构 ： 名称： 韩国化学实验研究院 地址： （韩国） 京畿道金浦市月串面 古莫里 7-6 院长：赵基星 联系： Tel. 031-999-3221, Fax. 031-999-3005 试验日程 ： 试验开始日： 2009. 03. 17 预备试验期间： 2009. 03. 17 2009. 03. 27 本次试验试验生物驯化期间： 2009. 03. 16 2009. 03. 23 本次试验试验物质投入日： 2009. 03. 23 本次试验进行日期： 2009. 0
3、3. 24(24 小时 ) 2009. 03. 25(48 小时 ) 2009. 03. 26(72 小时 ) 2009. 03. 27(96 小时 ) 试验结束日： 2009. 03. 27 目 录 1 概要（ Summary） 1 2. 材料及方法（ Material Methods） 2 2.1 试验物质及稀释剂 2 2. 2 调制试验物质 2 2. 3 试验物质的分析 .2 2. 4 试验对象 2 2. 5 饲育环境 2 2. 6 试验方法 3 2.7 观察项目 3 3. 结果（ Results） 4 3.1 一般症状及致死数 4 3.2 水质变化 4 4结论（ Conclusion）
4、 . 4 5参考文献（ References） 4 6. Table(Group summary) 5 Table1. Cumulative mortality of Oryzias latipes 5 Table2. Abnormal response 5 Table3. Changes of PH 6 Table4. Changes of water temerature 6 Table5. Changes of DO 6 Table6. Body weight and total length of Oryzias latipes at the end of the lest 7 1.
5、概要（ Summary） 矿物 质 活性水对鳉鱼 (Oryzias latipes)的 持续 96 小时的 急性鱼毒性试验 ，观察每浓度对 10 条鱼的致死数及一般中毒症状，测量体重和全长的结果如下： a. 本次试验根据“ OECD guidelines for the testing of chemicals 203, “Fish, acute toxicity test”(1992. 7. 17)实施。 b. 试验浓度（ nominal concentration）以 100.0mg/L 为单位进行极限测验（ limit test） ， 未对试验浓度进行单独的分析。 c. 试验结果如下：
6、_ Observation LC50 95 confidence limits NOEC Time (mg/L) (mg/L) (mg/L) _ 48 hours 100.0 - 100.0 _ 96 hours 100.0 - 100.0 _ 1 No observation effect concentration d. 试验期间未引起致死的最大浓度是 100.0mg/L。 e. 在对照 区 、处理区未观测到一般中毒症状及异常现象。 f. 全长平均为 2.84 0.10 cm。平均体重为 0.22 0.01g。 g. pH 值平均为 7.49(最小 7.28最大 7.94), DO 为平均
7、 6.83mg/L(最小5.67mg/L最大 8.26mg/L)。 h. 试验期间的平均水温为 22.5 0.5 (最小 21.8 最大 23.4 )。 以上试验结果得出，本次试验物质的 96 小时 -LC50 值确认为 100.0mg/L以上。 Page 1 of 7 2. 材料及方法（ Material Methods） 2.1 试验物质及稀释剂 1） 试验物质 ： 名称：矿物质活性水 接收日： 2009. 02. 23 接受量： 1000mL 外观及性状：浅黄色的液态 保管条件：常温 发件人： （株）韩国 AGROBIO 生物 2）稀释剂：试验用水 2. 2 调制试验物质 试验物质使用稀
8、释剂试验用水溶解调制 2. 3 试验物质的分析 根据与委托人的协议，未进行对试验物质的单独分析 2. 4 试验对象 1）试验鱼种 鳉鱼（ Oryzias latipes） 2）供给源 名称：韩国化学实验研究院 安全性评价本部 环境毒性实验室 3） 试验鱼的全长及体重 试验结束后分别在对比区和处理区各取 10 条鱼测量试验鱼的全长和体重，以平均和标准偏差标记结果。（ Table 6） - 试验鱼的全长： 2.84 0.10 cm。 - 试验鱼的体重： 0.22 0.01 g 4) 试验对象的选择理由 本次试验使用的 鳉鱼 (Oryzias latipes)是明示在 OECD TG 203 的用于
9、急性鱼毒性试验的正式鱼种，国内外 积累 的基础资料 颇丰 ，容易对照，故选。 5）驯化及绝食 试验开始 7 天前移动 49 条试验鱼到 50L 的水槽中开始驯化，是在试验的同一环境下进行的。驯化期间没有发生致死鱼， 健康状态良好，于是用于试验。试验 24 小时前开始实施绝食。 2. 5 饲育环境 1）环境 鳉鱼的饲育环境是 100L 容量的长方形玻璃水槽，在水温 2125，光条件 16 小时，暗条件 8 小时的环境下饲育。每天提供的饲料为上午一次 Tetramin flake(Tetra Co 德国 )， 下午一次 Blood Worm (Hikari sales USA Inc.美国 ) P
10、age 2 of 7 2) 饲育环境的监控 试验期间，鳉鱼的饲育室温度和饲育水槽水温用自动仪器每 半小时测定一次。饲育室的环境测定结果没有发现影响试验的变化。 3）饲育用水 用于饲育的水是把地下水 经 过前处理过滤 器 (1.0 )及细菌处理过滤器（ 0.2 ） 后，在储水槽曝气 24 小时以上后使用。水质是基于韩国化学研究院半年一次检测的饮用水分析标准分析，检测结果没有发现影响试验的因素。 2. 6 试验方法 1）调制试验药剂 准确量出 5.000g试验物质放进 100mL volumetric flask, 加入试验用水充分搅拌调制成试验物质溶液（ stock solution, 5000
11、0mg/L）。 准确取试验物质溶液（ stock solution） 10.000mL，放进 12.5L 试验水槽， 加 试验用水 加到全量 5L，完全悬浊为止充分搅拌后用做试验溶液（ test solution） 。 2）试验浓度 本次试验以前的 96 小时的预备试验结果，观测不到最高浓度100.0mg/L 的试验浓度里的致死鱼，实施了 100.0mg/L 浓度的极限测验（ limit test） 3）设对照区 用试验用水的地下水设了阴性 对照区。 4）暴露条 件 加入 5L 试验溶液到 12.5L 容量的圆筒型玻璃水槽（ 28cm H. 24cm ），试验鱼数各为 10 条不重复使用。暴露
12、环境与饲育条件相同，维持在 水温 2125，光条件 16 小时，暗条件 8 小时。试验 24 小时前开始中断饲料供给到试验结束。 2.7 观察项目 1）观察一般症状及致死数 对所有水槽进行试验前后（ 2 小时）， 24 小时， 48 小时， 72 小时， 96小时的一般中毒现象、异常现象和致死现象的观测。判定致死鱼的标准是用玻璃棒触动试验鱼时不动及没有鱼鳃呼吸为准。 2）试验用 水的水质检查 试验期间，试验物质处理后开始每 24 小时检测所有水槽 pH, DO 及水温。 pH 和水温使用 Sartorius PP-15 pH meter, DO 使用 Orion research Incorp
13、orated 810A+ DO meter. Page 3 of 7 3) LC50 的产出及 NOEC 试验物质投入后经过 48 小时及 96 小时没有致死个体，没有产出一半致死浓度（ LC50）及信赖极限。 无影响浓度（ NOEC）用没发生中毒症状及致死鱼的最高浓度标示。 3. 结果（ Results） 3.1 一般症状及致死数 根据预备试验结果用 100.0mg/L 试验浓度进行的本次试验，经过 96 小时没有观察到致死鱼。（ Table 1） 试验期间，在对照区和处理区没有观察到一般中毒症状及异常现象。（ Table 2） 3.2 水质变化 试验期间 pH 值平均为 7.49(最小 7.28最大 7.94), DO 为平均6.83mg/L(最小 5.67mg/L最大 8.26mg/L)。水温为 22.5 0.5 (最小21.
