宫颈标本处理的病理学技能

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1、湖南省妇幼保健院 病理科,宫 颈 标 本 处 理的病理学技能,病理技术操作流程,脱 水,包 埋,切 片,HE 染 色,封 片,阅 片,取 材,取材,核对病人的姓名，科室，住院号等。核对标本性质，取出的部位，标本数目， 临床诊断是否做标记：如带线、切缘、锥顶等,活检标本的取材,活检组织及时固定固定液总量标本5倍以上取材时应描述活检组织大小、颜色、质地固定好的组织应放滤纸包好放入包埋盒,注意：,较小较碎的组织应用纱布或滤纸包裹，滴入伊红放入包埋盒内直径小于0.1cm的标本，可描述“针尖大小”，直径大于0.1cm的标本应记录实际大小，切忌用“米粒大小”或“绿豆大小”等字样描述。厚度大于0.5cm 的

2、标本，切开描述切面，切开包埋。大体可辨认的息肉样组织，则描述之：如-色息肉状-质地组织-块，大小-,组织学检查的组织厚度不得超过3mm 并且长短不能超过使用的包埋盒的大小。大多数实体标本应该切成 边长10-15mm 厚2-3mm,大小：,大体描述,1._色_（质地）组织1 块，大小为*cm2._色_（质地）组织2 块，大小分别为*cm 及*cm3._色_（质地）组织3 块（或3 块以上），最大者大小为*cm,最小者大小为*cm,阴道镜活检标本的取材方法,用品：装标本用的冻存管/标本瓶，内置固定液。0.5cm的微 孔滤膜小块。牙签、镊子、记号笔和登记本。,方法：用戴有一次性乳胶手套的左手食指紧贴

3、活检钳，右手 持牙签，将活检钳内钳取的标本，拨到食指上摊平，用已备好的滤膜贴附上面,拇指轻压,迅速置于已装好固定液的标本瓶中，固定液的总量必须大于标本块的5倍以上。目的：便于包埋过程中的定位, 防止埋面不当造成组织的平 切。,阴道镜活检标本的取材方法,宫颈锥切标本取材,描述锥形体的大小（直径和深度）和形状，应该测量基底宽度及高度，描述颜色、外观、体积（应测量忌用比拟）、质地（软，中等、硬等）上皮：颜色，光滑，糜烂，修复，撕裂，肿块（大小，形状，部位），囊肿（内容物，大小）以前活检的部位,宫颈锥切标本,取材1. 新鲜状态下用缝线标记12 点位置2. 将一把锋利的刀尖插入宫颈管在12 点位置纵向剪

4、开 标本（如没有定位，可在任一部位剪开）3. 粘膜面朝上钉于软木板上固定过夜,取材:4. 用墨汁小心涂抹手术切缘5. 间隔23mm 做顺时针方向纵性切面，切取的每一面均应包含鳞柱交界处上皮，必要时可修剪掉部分间质。 每一个蜡块在3个不同的平面上切片，以观察切缘情况。,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本的取材,宫颈锥切标本的取材,宫颈癌根治标本,子宫切除标本（经腹）1. 测量标本大小并称重2. 辨认子宫的前后壁 腹膜反折 附件,剖开方式 从前壁宫颈外口处中央向上纵行剪开宫壁至子宫底，然后呈“一”字型切向双侧宫角. 用锋利的刀从宫颈两侧一直打向双侧宫角将子宫分为前后两部分.,子

5、宫切除标本（经腹）3. 如有体积大的肿瘤，平行切开4. 钉于软木板上固定过夜,宫颈癌根治标本,子宫切除标本描述,子宫切除术的类型，包含的器官浆膜面的颜色，纤维性粘连，肿瘤宫颈外口直径，鳞柱状交界处粘膜性状宫颈管长度，粘膜性状，切面囊肿宫体内膜：外观、厚度、出血、息肉、囊肿、肿瘤子宫肌壁：厚度、出血点或斑、肿瘤（部位、数量、大小、 出血、坏死、钙化）输卵管：根部其形状、粗度，作横切面卵巢：大小，质地、颜色，切面,子宫切除标本取材,1. 宫颈从宫颈外口以上大约2.5cm 处离断宫颈，以锥切标本方式取材并分别标记部位。宫颈深部浸润性癌：至少取3 块，其中至少有1 块为肿瘤浸润最深处，1 块包含宫颈全

6、层应取阴道壁切缘和左，右侧宫旁组织,2. 宫颈管如有肿瘤则按肿瘤取材原则取材3. 宫体如没有明显的肿瘤：接近宫底处至少取2 块，尽可能包括宫体全层，任何大体异常处另取如有明显的肿瘤：肿瘤至少取3 块,其中至少有1 块为肿瘤浸润最深处1 块包含宫体全层，非肿瘤性子宫内膜取2 块，宫体和宫颈交界处取1 块,子宫切除标本取材,4. 肌瘤 3 个以下每个肌瘤至少取1 块，体积大者可多至3 块，3 个以上仔细观察每个肌瘤的不同切面，切面性状相同或相似者共取34 块即可，任何大体上的异常的区域均分布取材。.宫体肌壁 有出血或灰红色斑点状区域多取6.卵巢和输卵管7.各站淋巴结,子宫切除标本取材,卵巢切除标本

7、描述,_侧卵巢切除标本一件，大小为*cm,表面_色，光滑/凹凸不平，有/无乳头状突起。垂直于卵巢长轴做平行切面，见切面呈_色，可见黄、白体结构。局部见囊腔，大小为*cm,单/多房，内壁光滑/有突起，囊壁厚*cm,内容物淡黄色清亮液体。,单纯或预防性切除标本取12 块囊肿剔除标本至少取3 块，尽量囊壁最厚处，薄壁囊肿最好打卷取材，良性畸胎瘤应取到头节复杂的囊性标本尽量多取乳头处及囊壁较厚处实性肿瘤部分按照实性肿瘤取材,卵巢切除标本取材,输卵管处理步骤,切开前固定标本，如果附着在子宫上，则应在原位固定测量输卵管长度和最大直径 如果输卵管大小相对正常，则每隔5mm 连续切开并检查，注意不要完全切断如

8、果输卵管明显增大，则将输卵管完全纵向剖开，如需要再做平行切面,输卵管描述,输卵管长度和最大直径浆膜：纤维素，出血，纤维性粘连至卵巢或其他器官壁：厚度异常？破裂？如有,则描述位置伞端的外观：开放？闭合？内翻？管腔：明显？扩张？内容物；如果异常增多测量直径粘膜：萎缩？增厚？,分别在峡、壶腹及伞部各取1 块,输卵管取材,标本为全切/阴式切除的全子宫，部分阴道壁及左/右/双侧附件。阴道壁长*cm，周径为*cm。子宫大小为*cm,浆膜面_色，光滑/不光滑/粗糙/凸凹不平见多个隆起。子宫颈外口呈_色，粘膜光滑/粗糙/糜烂/中重度糜烂/见一内生性/外生性肿物（肿物大小为*cm,切面呈_色，侵及肌层/外膜层，

9、向上累及/未累及子宫内膜）。,宫颈管长*cm，粘膜呈_色，可见一/多个息肉/小囊肿，大小为*cm,囊内容_,子宫内膜呈_色，光滑/粗糙/见一/多个息肉状突起/见一隆起型肿物（肿物大小为*cm，切面呈灰白/灰红色，侵及肌层/外膜层，向下累及/未累及宫颈）。,子宫内膜厚*cm,子宫体肌壁厚*cm,于内膜下/肌壁间/浆膜下可见一个/多个_色结节状肿物，大者大小为*cm,小者大小为*cm,切面_色，编织状明显/不明显，质地_，与周围肌壁组织分界清楚/不清楚，其余肌壁组织切面可见/未见散在暗红色区域。左侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm,右侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm。

10、,总技术流程（1）固定：（2）脱水：（3）透明：（4）浸蜡：（5）包埋：（6）切片：（7）烤片：（8）HE染色,常规制片技术,固 定,常用10%中性甲醛固定液配方： 市售甲醛（40%） 100ml D.W. 900ml 磷酸二氢钠 4g 磷酸氢二钠 6.5g 固定时间4h以上，大标本应在24h以上,固定是组织制片的基础及关键步骤 固定是否彻底，影响着整个制片的过程 是整个标本处理过程的一个主要环节,固 定,固定目的： 1.保持组织形态学特征清晰和稳定2.阻止组织、细胞自溶与腐败3.凝固或沉淀组织细胞内物质 4.保存组织细胞抗原性5.使组织保持一定的硬度和弹性,固 定,一种好的固定液特性：,1.

11、渗透力相对较强，能迅速渗入组织内部2.组织收缩、膨胀或变硬相对很小3.能够硬化、固化组织，增加组织硬度4.使得组织对染料产生较强的亲和力，并产生较佳的折光率,影响固定因素：,固定液类型及酸碱度 固定液浓度 固定时间与组织体积固定的温度,固定液浓度,固定液浓度过低达不到固定效果，浓度过高穿透力降低，易引起组织中央固定不良。,福尔马林的浓度大于10%的会增加组织变硬和收缩的程度。,甲醛 酒精 冰醋酸 丙酮,固定时间与组织体积,一般4-24小时 组织取材厚度原则在4mm以内 对于免疫组化而言：固定不足，组织抗原弥散，结构不佳，固定过度，抗原破坏。组织固定后如不能及时进入脱水，可置70%酒精中进行适度

12、保存。,固定温度,温度降低，减慢了固定液渗透速度；温度升高，分子弥散增加，分子活动加快，渗透速度加快。大多数组织适宜的固定温度为25C，全自动脱水机温度一般控制在35C左右 。一般不建议加热固定,脱水原则： 1.将组织内水分脱干净但又不使组织过度脱水 2.酒精脱水应由低浓度至高浓度进行 脱水剂特性及要求： 1.能与水、透明剂在任何比例下混合 2.对组织的穿透性能良好 3.脱水速度快 4.对组织有一定硬化作用,脱水,酒精： 最常用脱水剂，具有亲水性，能溶于水和其他有机 溶剂，脱水力强，能硬化组织。 能很好与透明剂混溶 易使组织收缩、变脆，导致透明剂难进入组织 从低浓度开始逐级增加浓度,脱水,低浓

13、度酒精在组织中穿透力很强，比高浓度更易渗透到组织内部组织在低浓度酒精中脱水充分，高浓度只是脱去从低浓度到高浓度之间的水分 高浓度酒精渗透力不强，延长时间意义不大，反而 会使得组织收缩、变脆,脱水,75%酒精(1h)85%酒精(1h)95%酒精(1h30)95% 酒精 (1h)100%酒精 (1h30)100% 酒精(1h),脱水,二甲苯（1h）二甲苯（1h） 脱水 蜡（1h30）58-60蜡（1h30）58-60 蜡（1h） 58-60 蜡温过高可降低浸蜡时间，浸蜡用的石蜡要定期更新，保持纯度,透明,透明剂在脱水剂和石蜡之间起着桥梁作用 它能与两种溶液相溶 在此过程中，因组织块中的水分被透明剂

14、取代，其 折射指数接近于组织蛋白的折光指数，组织块变得 透亮。,透明,二甲苯： 最常用的透明剂 无色透明、有毒性，不溶于水、易挥发 透明力强容易使得组织收缩、变形、变脆 长期接触会呼吸道黏膜有刺激作用,透明,置换组织中的透明剂，石蜡渗入组织 组织浸蜡、包埋，实质上一个目的两个步骤 石蜡是最常用的浸润剂和包埋剂 一般用于浸蜡的石蜡熔点为56-58C 浸蜡温度应高于石蜡熔点2-4C,浸蜡,采用石蜡包埋法镊子夹取组织薄片，立埋（切记不能平埋）于包埋模中（埋鳞状上皮的那面）。把包埋修好的蜡块按号顺序排列。放入4冰箱中保存待切片,包埋,注意调节组织平面，使之保持垂直，并与刀刃平行。切片机的切片厚度标尺，一般34nm 活检组织需连续切片，每张切片上4-8张组织片。,切片,石蜡切片烤后从温箱中拿出应迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蜡。时间宁长勿短，否则脱蜡不尽无法着色。,HE染色,各级酒精洗去切片中的二甲苯，使切片逐级酒精入水。,HE染色,苏木精染色时间：依染液的新旧与着色能力强弱有关，染色时间应随时观察切片着色程度伊红染色时间：染色程度应以苏木精对核的着色程度为参照标准，以求达到对比鲜明。,HE染色,脱水、透明,HE染色,中性树胶浓度适宜。过浓气泡不易扩散，不易排出。过稀易溢出玻片，胶内二甲苯挥发后产生气泡不便观察。,