酶测定方法

上传人:油条 文档编号:2355440 上传时间:2017-07-23 格式:DOC 页数:1 大小:25.01KB
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1、脂肪酶活性测定方法1、粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶 0.010 g、0.020 g 和 0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为 0.01%、0.02% 和 0.03%的粗酶液。2、实验设计本实验以 10 mL 色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。3、酸价的测定酸价是指中和 1 mol 游离脂肪酸所需 NaOH 的毫克数, 它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价, 参照文献 3, 4 中所使用的方法, 向所得的水解液滴加 1 mL 95%的乙醇溶液, 摇匀, 终止反应, 并加入 2 滴

2、酚酞指示剂,迅速用 0.05 mol/L 的 NaOH 溶液滴定至溶液呈微红色, 在 30 s 内不消失为终点, 记录消耗的 NaOH 溶液毫升数(V ) 。用同样的方法测定空白值, 每个试验重复两次, 以平均值作为测定结果。酸价按下式计算:X = C (V - V0 ) 40 /M式中: X 油脂酸价(mgNaOH /g 油)CNaOH 标准溶液的浓度(mol/L)M 试样的质量( g)40NaOH 的 mmol 质量(mg/mmol)4 粗脂肪酶活力的测定在最佳水解条件下, 分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价 X1、X2 , 根据公式 U1 /U= X1 / X2 求得粗脂肪酶的活力, 其中 U1 为粗脂肪酶活力, U 为标准脂肪酶活力。5 标准脂肪酶液的配制根据实验最佳条件, 配制标准脂肪酶液。一篇相关文献 粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf答:实验设计,本实验以 10 mL 色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。用色拉油作底物不太妥,一般是用橄榄油,化学纯的。

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