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1、1两种大便隐血试验测定方法的比较【关键词】 隐血；联苯胺；单克隆抗体摘要 粪便隐血试验是诊断消化道出血性疾病的一个重要指标，对早期发现和诊断消化道出血性疾病有重要意义。本文对化学方法中的联苯胺法和免疫学方法中的单克隆抗体法进行了比较，由于联苯胺法受饮食、一些化学药品、铁剂等干扰，易形成假阳性或假阴性结果。用单克隆胶体金显色技术，以试纸条一步法检测大便隐血，有较高的敏感性和特异性。关键词 隐血；联苯胺；单克隆抗体1材料和方法1.1 试剂 万华普曼生物工程有限公司生产的万华牌“消康保”粪便隐血胶体金试剂盒（简称 WH 试纸条） 。联苯胺：10%联苯胺、3%双氧水。1.2 标本来源 2本院 120
2、例住院患者随机粪便，男 64 例，女 56 例。收集鸡、兔、羊、牛、猪、蛇、鱼、鸭、鹅等动物血和肌肉，冰箱保存。1.3 方法 单克隆抗体粪便隐血一步检验法操作方法见试剂说明书；联苯胺隐血试验操作方法按全国临床检验操作规程第二版进行操作。2结果2.1 灵敏性试验 取正常人粪便 2 g 加入刻度离心管中，加蒸馏水至 5 ml 刻度混匀，再加入纯化的人血红蛋白的质控品（浓度为 80 g/L）10 l，其 Hb 含量为 160 g/ml，然后再吸出含 Hb 的粪便混合液用蒸馏水稀释成含 Hb16.0 g/ml、4.0 g/ml、1.0 g/ml、0.8 g/ml、0.4 g/ml、 0.2 g/ml、
3、0.15 g/ml、0.10 g/ml 的系列混合液，用两种方法进行测定，结果见表 1。表 1两种方法检测不同浓度的人血红蛋白液结果比较 Hb 含量（略）3WH 试纸条最低 Hb 检测出浓度为 0.2 g/ml，联苯法最低检测出浓度为 0.80 g/ml。这说明 WH 试纸法比单克隆抗体法灵敏度高，对人体早期的消化道微量出血更为敏感。2.2 敏感性试验用单克隆抗体法及联苯胺法同时分别检测 120 例大便隐血标本，结果如表 2。对联苯胺法阳性，单抗法阴性的 24 例患者，素食3 d 后，留大便，重新用联苯胺法测试大便隐血，仅有 1 例阳性，而单抗法检测均为阴性结果。2.3 特异性和准确性试验 在
4、单克隆抗体法阴性标本中，分别加各种动物血红蛋白和肌红蛋白时，单克隆抗体法始终还是阴性，而在联苯胺法阴性标本中，加各种动物血红蛋白和肌红蛋白，联苯胺法则均为阳性。表 2两种方法检测大便隐血结果检测（略）2.4 干扰试验 用含维生素 C 浓度分别为 5.0 mg/ml、10.0 mg/ml、20.0 mg/ml、40.0 mg/ml、80.0 mg/ml 加入约含 Hb3.5 g/ml 的粪4便中，用两种方法比较见表 3，结果单抗法仍为阳性，而联苯胺法测得结果为阴性，再用铁剂及含过氧化物酶的蔬菜汁加入含 Hb3.5 g/ml 粪便中做同样的隐血试验，结果是单克隆抗体法所做的结果始终不变，而联苯胺法
5、测得的结果为阴性。这说明单克隆抗体法不受其他化学药品、铁剂、过氧化物酶等的干扰，而联苯胺则受之影响较大，易形成假阴性结果。表 3维生素 C 对二种隐血试验方法的干扰比较维生素 C(略)3讨论粪便隐血试验对消化道出血性疾病有非常重要的诊断与鉴别诊断的价值，要求大便隐血试验必须具有高度的灵敏度及特异性，以上实验充分证明用联苯胺法测大便隐血试验，灵敏度差，易受饮食影响，假阳性率较高，抗干扰性能差，也易形成假阴性结果，加之联苯胺试剂为一种强致癌物，对人体危害极大。而单克隆抗体法能够真实地反映到消化道出血与否，特异性高，灵敏度高，不受其他药物及铁剂、动物血等干扰，只特异性地结合人血红蛋白抗原，对人体亦无害，且不受饮食限制，简便、快速，是目前早期诊断消化道出血性疾病的一个首选的好方法。参考文献：51叶应妩，王毓三全国临床检验操作规程M .第 2版. 南京：东南大学出版社，1997 ：1.
