《FS-2荧光分光光度计波长扫描模式使用指南》由会员分享，可在线阅读，更多相关《FS-2荧光分光光度计波长扫描模式使用指南（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 测试模式波长扫描波长扫描模式是用来测试发射，激发和同步波谱波长扫描的测试流程：1， 在 FluoroMaster Plus 文件夹里点击 “Wave Scan”来打开波长扫描软件2， 检查发射光栅运行完毕3， 在工具栏里点击新建“ ”，将出现下面的窗口，输入文件名并点击保存4， 创建新的实验对话框将显示如下。输入一个标题,客户和用户 ID,然后单击OK。信息窗口:输入简短的信息关于这个实验或样品。Title:输入标题的实验。Customer:客户的输入信息User ID:应该设置用户 ID 来执行测量。5， 将会显示下面的窗口6， 设置测量条件 点击打开后加载之前使用的测试条件方案 保存当前
2、测量设置,可以另存为 使用当前测量设置作为默认的设置,保存所有参数为默认方法7， 点击 开始在测试期间如果荧光强度超过 65000 会出现警告：这种情况下，在工具栏，有一个 图标，点击后可以阻止高荧光强度对 PMT 的伤害8， 测试完成后将会显示下面的信息，并且点击“OK”9， 光谱结果和数据都将会显示10， 点击 可以打印出数据测试设置在波扫描模式下,发射, 兴奋,和同步光谱测量数据是可用的。1发射光谱的测量测量发射光谱,在扫描模式下选择“Emission”A Generala) Data Mode（数据模式）按以下设置数据模式：- Fluorescence:测量荧光频谱，当样品接触到激发光
3、束的时候光谱被测量出来- Luminescence:测量发光光谱如生物发光,化学发光。样品没有接触激发光束时发光光谱被测量。- Phosphorescence:磷光光谱测量。当磷光模式被选中时,接触时间(s)选项卡和磷光延迟(ms) 选项就被创建了。- Light Exposure Time(s)计算样品接触到激发光的时间- Phosphorescence Delay(ms) : 在激发快门关闭之后测试开始之前来延迟时间。在点击Start键,样品接触激发光的设置在发射开始波长和激发快门关闭。然后,在延迟的测量为设置时间, 磷光强度测量。然后,测量磷光下一个波长以相同的顺序。b) Auto Ze
4、ro在起始波长处设置荧光强度为“0”c) Corrected Spectra修正谱函数是用来补偿光谱的失真,可能是由于不同的反射, 吸光系数、灵敏度 等系统的每个组件作为PMT、光栅、镜子、透镜等。d) Start Delay (s)设置延迟时间测试样品(单位:秒)。e) Repeat Number设置重复数字测量。f) Repeat Interval Time (m)设置重复测量之间的间隔时间当重复号码设置超过2(单位:分钟)。g) PMT Voltage (Volt)输入PMT电压从100到1000伏特。更高的PMT电压设置可以提高强度, 但它可能减少PMT寿命。如果强度超过65000项,
5、PMT可能损坏或 PMT寿命可能减少。选择合适的PMT电压。h) Scan Speed (nm/min)选择扫描速度:1、10、60、300、600、1200、2400、6000 纳米 /分钟,自动或用户定义的模式。随着扫描速度下降,信噪比率上升,但这需要更多的时间来测量。平均数量和发射间隔(nm)决心自动根据设置扫描速度。如果扫描速度设置“自动”,发射间隔设置1海里。如果扫描种子设置“用户定义”,发射间隔和平均数量根据需要设置。i) Integration Time (ms)进入PMT积分时间:0.02到1250ms。积分时间设置的越长强度越高,但它会降低PMT寿命。如果强度超过65000项
6、,PMT可能损坏或PMT 寿命可能减少。输入适当的PMT积分时间。*扫描速度和积分时间组合 如果在“扫描速度”中选择“自动”,扫描时间间隔设置为 1纳米。如果在“扫描速度”中选择“用户定义”,积分时间、平均数字 ,扫描时间间隔可以根据需要设置。小积分时间可能导致数据丢失，为了得到波长扫描模式和3 d扫描模式的精确数据,集成超过20 ms是必要的。扫描速度取决于电脑和光谱的通信速率可以稍微有所不同。j) Response Time (s)确定数据处理速度得到测量光谱。在以下值中选择响应时间:0.02,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0秒。k) Average Number在单
7、一波长处设置平均时间。只有扫描速度设置为“用户自定义”,平均数字可以被设置为所需的。平均数量的增加,信噪比率会变得很高, 但扫描速度变得缓慢。l) EX Slit (nm)选择狭缝宽度对励磁单色仪:0.5、1 、2.5、5、10、20纳米。随着狭缝宽度减小,谱带宽度也减小,强度降低。每个狭缝宽度意味着FWHM (全宽半最大)的激发或发射光谱。m) EM Slit (nm)同EX Slitn) EX Filter (nm)选择过滤器激发单色仪。例过滤器是用来去除二阶辐射效应从激发光谱。短的波长截止滤波器可以选择以下之一:空气(无过滤器),320 nm、435 nm和530 nm(其他过滤器是可选
8、的)。o) EM Filter (nm)同EX Filterp) Apply在进入实验参数,点击申请制作系统被应用到输入参数和准备好开始测量。B. Wave Setup a) EM Zero Order检测励磁信号在整个发射波长范围。b) EM Wave (nm)进入发射波长的激发测量。可用波长范围是190到900纳米。设置长波长比激发波长范围来衡量。c) EX Start (nm)设置开始波长测量激发光谱。范围是190到900纳米。d) EM End (nm)设置结束波长测量发射光谱。范围是190到900纳米。e) EM Interval (nm)设置测量时间间隔的荧光发射光谱(nm)。作为
9、扫描速度设置“用户定义”只 有,EM间隔(nm)可以根据需要设置。f) Set monitoring wave 设置监控波长。在选定的波长的荧光强度显示在结果窗口。监控波长可以通 过添加或删除插入或删除命令。C. Display Setup设置显示选项在光谱窗口和结果窗口,点击 Display Setup。 a) Grid View b) Legend View c) Decimal Pointa 在光谱窗口显示网格；b 在光谱窗口显示图例；c 在结果窗口设置小数点 (1 - 10)。d) Y Axis Auto Scale e) View Label f) X Axis Display Interval (nm)d使用光谱强度在Y轴上的自动标尺。e显示标签标记的光谱窗口。f设置x轴显示间隔值从0.1到10纳米。
