职 业技术VOCATIONALTECHNOLOGY23教改探讨2009·07 总第 107 期职业技术寄生虫卵玻片标本寄 生虫学原是一门重要的医学基础课，属形态学科 寄生虫的教学玻片标本可分为临时封片和永久封片两类，前者不宜长期保存，仅供临时观察之用；而后者可以长期保存使用，因此在寄生虫学实验教学中多采用这类标本 [1]人体寄生虫虫卵玻片标本的观察学习是教学的重点 、难点，因此，根据相关文献及教学实践，作者通过对几种不同的虫卵制作方法的实践对比，选出了一种操作简便，效果好，使用寿命长的寄生虫卵标本制作方法，更好的服务于教学 现介绍如下：1 材料与方法1.1 蜡圈 、蜡纸单层盖玻片模式根据章洁等 [2]的改良蜡圈 、蜡纸单层盖玻片模式材料方法操作如下：常规方法已固定的各种寄生虫卵悬液；直径为 11 mm 玻璃离心管 1 支；直径为 6、14 mm，长10 cm 空心金属打孔器各一支；切片石蜡适量 (取熔点为60℃~62℃1/3、56℃~58℃2/3)混合，加热溶解后冷却；刻钢板蜡纸 / 复写纸；载玻片 (25.4×76.2 mm)、盖玻片(18×18 mm)；中性树胶 用打孔器将蜡纸 / 复写纸制成内 、外径分别为 6、14mm 纸圈备用；将离心管口在酒精灯火焰上适当加热后，蘸取已热溶的石蜡扣于载片中央使成一蜡圈，待其凝固；将已凝固蜡圈载玻片在酒精灯火焰上适当加热至蜡溶解；用镊子夹取蜡纸 / 复写纸圈一个，平放入已溶解的蜡圈中，待冷却整平；滴加已固定好的虫卵悬液 1~2 滴，加盖盖玻片，用滤纸吸去盖片四周溢出的溶液；用中性树胶封盖片四周，制成标本 。
1.2 凡士林 、中性树胶综合封片法根据佘俊萍等 [3] 的凡士林 、中性树胶综合封片法操作步骤是：备制清晰光洁的盖玻片使用玻璃刀，尺子均力将 18×18mm 大小盖玻片划分为 4 个均等小方块，划前用肥皂 、95%酒精依次清洗双手 、玻璃刀 、尺子和镊子等相关用具 操作过程中保持盖玻片形态规则，清晰 将盖玻片分散培养器中，用 95%的酒精加盖浸泡 l 天 盖玻片取出后用纱布擦亮，放入玻片盒内保存备用 滴1~2 滴在 5%福尔马林中的离心虫卵悬液，滴在载玻片一侧 1/3 处，用镊子取 l/4 盖玻片轻盖其上，并用吸水低吸去四周溢出的悬液 、擦干 用毛笔蘸取已加热溶化的石蜡立即涂封盖玻片四周，封闭应严，蜡区分布均匀，厚薄一致，约 0.5~0.6mm，可防止盖片时造成倾斜，待冷却 滴中性树胶约 0.2ml 在 1/4 盖玻片中央，均匀用力将大盖片轻压其上，制成标本 1.3 中性树胶 、发丝双盖片封片法中性树胶 、发丝双盖片封片法材料与凡士林 、中性树胶综合封片法类似 操作方法上不同之处在于滴悬液前用中性树胶粘两根长约 5mm 发丝于载玻片相应位置，发丝与载玻片短边平行，间距约 4mm，滴悬液于两根发丝之间，用镊子取 l/4 盖玻片轻盖其上 。
直接滴中性树胶 2 滴在大盖片上，快速翻转盖于 1/4 盖玻片中央，均匀用力将大盖片轻压其上即可 2 讨论蜡圈 、蜡纸单层盖玻片模式的优点是制成的标本其蜡圈规格一致，蜡圈不易产生变形 应用蜡纸 / 复写纸圈为垫，可使圈内形成一层薄厚适宜的空间以容纳虫卵 但缺点也很明显，操作繁琐，需要密封转盘 、封片机 、打孔器等器械 制作时间长，效率低，不适合实验室批量制作 而且根据作者制作的实践经验，圆形石蜡圈封片不易封平，往往是一侧高另一侧低，如果学生操作不当，物镜碰到盖玻片上，受力不均，非常容易压碎盖玻片 凡士林 、中性树胶综合封片法虽然克服了蜡圈法操作繁琐 、不易封平 、易压碎的缺点，但用石蜡封方形小盖片比较困难，直角部分不好密封，不易操作，成品率低 而且小盖片与虫卵悬液间空隙较小，一旦受到挤压容易和载玻片贴在一起，不利于观察 中性树胶 、发丝双盖片封片法的优点十分明显 首先，用两根发丝代替石蜡作为容纳悬液空间的支撑，解决了平整的问题，不易压碎 其次，不用石蜡封片，不用酒精灯，操作简便，成品率高 再次，发丝之间空间小，节省悬液，而且虫卵悬液位置因有发丝做标记非常明显，便于观察 由于虫卵始终浸泡在悬液里，形态典型，可翻转，观察全面，经学生使用反应良好 。
根据我们实际使用来看，标本可保存 5 年以上 制作中应注意的是：不论封小盖片还是大盖片都要避免气泡的产生，气泡影响观察，长时间容易使卵悬液变干标本作废 放小盖片时可一侧倾斜浸于悬液边缘发丝上，和液面相接，利用液面张力缓慢把另一侧放下 如果边缘有小气泡可用吸水纸牵引吸掉 参考文献 :[1]马平，等 .旋毛虫囊包幼虫封片标本制作与体会[J]. 山西医科大学学报 (基础医学教育版 ),2006,8(4):411- 413.[2]章洁，等 .寄生虫卵玻片标本制作方法的改进 [J].实用预防医学 ,2004,11(6):12- 74.[3]佘俊萍，等 .寄生虫卵标本制作改进及使用效果[J] .沪州医学院学报 ,2003,26(4):335- 336.（作者单位：新乡医学院形态学实验室）（编辑 刘丽娜）河 南 赵峰 武俊芳 范文艳 史明珠摘 要：目的：选出一种操作简便 、效果好 、使用寿命长的寄生虫卵玻片标本制作方法服务于教学 方法：通过几种不同制作方法的实际操作进行对比 结论：中性树胶 、发丝双盖片封片法可以很好的达到教学要求 关键词 : 寄生虫卵；标本制作；发丝双盖片法；比较体会制作方法的比较及体会。