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1、1Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌的表达及其与浸润转移的关系作者：李秀娟 王淑强 赵志刚 赵立辉 李鹏【摘要 】 目的：细胞粘附功能下降是恶性肿瘤发展的关键因素，为探讨 Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌发病机制中的作用，我们研究了 Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌的表达情况，并分析其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学 SP 法对 46 例涎腺粘液表皮样癌进行 Ecadherin 的检测。结果：Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌中的表达强弱与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关(P0.05)。结论：Ecadherin 表达与涎腺粘液表皮样癌的浸润转移有关，可作为一种新
2、的肿瘤标志物，其表达对判断预后有一定的价值。 【关键词】 E 钙粘着糖蛋白；涎腺癌；癌/粘液表皮样；免疫组织化学【ABSTRACT】 Objective：To examine the expression of Ecadherin in mucoepidetr moid carcinoma and analyze the relationship of tumor characteristics.For altered cell adhesion,it has a critical role in the development of epithelial 2cancers.Methods：T
3、he expression of Ecadherin proteins was detected by immunohistochemistry SP method in 46 cases with mucoepidermoid carcinoma in salivary gland.Results：The expression of Ecadherin correlated well with the degree of differentiation and mucoepidermoid carcinoma in salivary gland(P0.05).Conclusion： Ecad
4、herin is associated with invasion and metastasis in mucoepidermoid carcinoma,which suggests Ecadherin is a new marking of carcinoma.Measurement of Ecadherin expression is valuable in evaluating the prognosis of mucoepidermoid carcinoma.【KEY WORDS】 Ecadherin；Salivary Gland Cancer；Carcinoma/Mucoepider
5、moid;Immunohistochemistry癌细胞分离被认为是导致恶性肿瘤浸润及转移复杂过程中的第一步。在细胞间粘附因子中，有几个重要的分子已被证实，其中包括钙依赖分子“E 钙粘着糖蛋白（ Ecadherin） ”1，它被认为在细胞粘附过程中起决定作用。根据粘附蛋白的结构和功能，它被分成几个亚型，它不仅促进细胞间的相互粘附，而且还能维持正常上皮细胞的形态特征2，它在人类多种恶性肿瘤细胞中表达减弱甚至消3失。钙粘蛋白的存在与恶性肿瘤的分化程度及淋巴结转移有关，本实验就是通过免疫组化方法来研究 Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌中的表达与涎腺粘液表皮样癌的分化程度及淋巴结转移的关系。1
6、材料与方法1.1 材料 收集 19902002 年来我院首次手术治疗的涎腺粘液表皮样癌 46 例，手术切除标本 46 例，其中男性 25 例，女性 21例；发病高峰为 4060 岁，中位年龄 49 岁；有淋巴结转移的 9 例，无淋巴结转移的 37 例。对手术切除的 46 例标本进行取材，经 10%中性甲醛溶液固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋切片厚度 4m，HE染色，重新光镜下观察确诊。1.2 试剂 采用武汉博士德生物工程工司提供的鼠抗人Ecadherin 单克隆抗体。SP 试剂盒，DAB 显示剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3 方法 采用 SP 免疫组织化学方法，染色过程严格按试剂盒规范
7、程序进行，切片常规脱蜡至水，经 0.3%过氧化氢 10min，枸橼酸盐缓冲液加热抗原修复 20min，正常羊血清封闭 10min。吸去多余血清后滴加第一抗体（鼠抗人 Ecadherin 单克隆抗体）4孵育过夜，清洗后滴加第二抗体，3730min，清洗后滴加第三抗体43730min，DAB 显色，用已知免疫组化染色阳性切片做阳性对照，以 PBS 代替第一抗体做阴性对照。1.4 判断标准 光镜下观察 Ecadherin 阳性物质分布于涎腺粘液表皮样癌细胞膜上，呈棕黄色颗粒状，每张切片取 10 个高倍镜视野并计细胞数。阳性细胞数75%为（+） 。1.5 统计学处理 应用 SPSS11.0 统计软件进
8、行统计分析，组间比较采用 检验，当 P0.05 时认为差异具有显著性。2 结果Ecadherin 表达与涎腺粘液表皮样癌病理指标之间的关系（见表 1） 。Ecadherin 在涎腺粘液表皮样癌中表达强弱与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关（P0.05） 。表 1 Ecadherin 表达与涎腺粘液表皮样癌病理指标之间的关系 注：组间比较 P0.05)，无显著性差异。本组 46 例涎腺粘液表皮样癌组织中，有淋巴结转移组 9 例，无淋巴结转移 37 例，无转移组 Ecadherin 高表达，无转移组Ecadherin 表达显著高于有淋巴结转移组(P0.05)，有显著性差异，与文献报导一致9，10。提
9、示 Ecadherin 表达与涎腺粘液7表皮样癌淋巴结转移有关。故检测涎腺粘液表皮样癌组织中的 Ecadherin 表达对判断肿瘤的恶性程度，预测淋巴结转移趋势，指导临床治疗方案，以及改善患者预后均有重要意义。【参考文献】1 Shirayoshi Y，Okada TS，Takeichi M，et al.The calciumdependent cellcelladhesion system regulates inner cell mass formation and cell surface polarization in early mouse develepment J.Cell，199
10、3 ，35 ：6316382 Mcneill H，Ozawa M，Kemler R，et al.Novel function of the cell adhesion molecule uvomorulin as inducer of cell polarityJ.Cell，1990，62(3)：3053153 Berx G，Staes K，Van Hengel J，et al.Cloning and characteritation of human invasion suppressor gene Ecadherin(CDHI)J.Genomics，1999，26 ：281289 Graf
11、f JR，Herman JG，Lapidus RG，et al.Ecadherin expression is silenced by DNA hypermethylation in human 8breast and prostate carcinomaJ.Cancer Res，1995，15：51955204 Boahene DK，Olsen KD，Lewis JE，et al.Mucoepidermoid carcinoma of the parotid gland: The Mayo clinic experienceJ.Arch Otlolaryngol Head Neck Surg，2004，130(7)：849856 Vessey CJ，Wilding J，Folarin LV，et al.Altered expression and function of Ecadherin in cercical intraepithelial neoplasia and invasive squamous cell carcinomaJ.Pathol，1995，176：151163 樊克武，赵建平. 胃癌上皮型钙黏蛋白表达与其浸润转移的关系J.南京医科大学学报 ，1
