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1、1CD44v6 和 CerbB-2 在大肠癌中的表达及其与预后的关系【关键词】 大肠癌;CD44v6;CerbB-2;免疫组织化学摘 要 目的: 探讨 CD44v6 和 CerbB-2 在大肠癌中的联合表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组织化学 SP 法，检测大肠癌及大肠腺瘤标本 CD44v6 和 CerbB-2 蛋白表达。结果:CD44v6 和CerbB-2 在大肠癌与大肠腺瘤中的阳性率均有显著性差异（P0.05） 。在大肠癌中阳性率分别为 63.5%和 47.6%，均高于大肠腺瘤中的阳性率（分别为 11.1%和 11.1%） 。结论:CD44v6 和CerbB-2 在大肠癌中均有较高的阳
2、性率，两者的表达与大肠癌淋巴结和肝转移相关，CD44v6 和 CerbB-2 有望成为预测大肠癌转移的临床生物学指标，也可作为判断大肠癌预后的生物学指标。关键词 大肠癌;CD44v6;CerbB-2;免疫组织化学肿瘤的浸润与转移，是导致患者死亡的关键。大肠癌的发病率近年呈明显上升趋势。应用免疫组织化学技术，对大肠癌各个阶段不同基因表达产物进行动态观察，在肿瘤的基础与临床研究中有重要意义。我们在研究中用免疫组织化学方法检测大肠癌组织中CD44v6 和 CerbB-2 基因的表达情况，并观察其表达特征及其与大2肠癌患者预后的关系。1 资料与方法 1.1 研究对象收集我院手术切除大肠癌患者的原发灶标
3、本 63 例，其中男性34 例，女性 29 例，年龄 27 岁73 岁，平均 52.6 岁;结肠癌 37 例，直肠癌 26 例;高分化腺癌 12 例，中分化腺癌 37 例，低分化腺癌 6例，粘液腺癌 8 例。大肠癌伴淋巴结转移者 27 例，无淋巴结转移者 36 例; 伴肝转移者 11 例，无肝转移者 52 例。设正常对照组大肠腺瘤 18 例，为同期外科手术或内镜活检组织，诊断均经病理证实，其中男 11 例，女 7 例，年龄 24 岁28 岁。1.2 主要试剂和方法从武汉博士德公司购进丹麦 Dako 公司生产 CD44v6 和 CerbB-2 单克隆抗体、SABC 试剂盒、APES 和 DAB
4、显色试剂盒。PBS 缓冲液 pH=7.30.1，自行新鲜配制。采用免疫组织化学 SP 法 空白对照中用 PBS 代替第一抗体，其他步骤相同。3阳性对照为武汉博士德生物有限公司提供的阳性对照片。1.3 结果判断标准CD44v6 和 CerbB-2 染色阳性细胞为胞膜染有片状或颗粒状棕黄色。1.4 统计学方法采用 2 检验和四格表确切概率法，以 P0.05 为显著性检验水准。2 结果2.1. CD44v6 和 CerbB-2 在大肠癌及大肠腺瘤中的表达情况 （见表 1）表 1 CD44v6 和 CerbB-2 在大肠癌及大肠腺瘤中的阳性率 两种基因在大肠癌、大肠腺瘤中的阳性率均有显著性差异（P0.
5、05） 。在肿瘤伴淋巴结转移组织中，CD44v6 和 CerbB-2 阳性表达率分别为 77.8%和 63.0%，均高于无淋巴结转移组（52.6%和 36%）;在肿瘤伴肝转移组中，CD44v6 和4CerbB-2 阳性表达率分别为 90.9%和 81.8%，均高于无肝转移组（57.7%和 40.4%） 。 3 讨论目前研究认为: 癌基因激活、抑癌基因失活及编码产物的过度表达，导致肿瘤细胞的恶性转化和增殖失调。由于大肠癌的发生发展具有一系列形态学上可识别的阶段性变化，从而为研究基因变异在癌演化过程中的作用提供了良好样本。CerbB-2 癌基因位于细胞膜上，具有络氨酸激酶活性（TPK） 1 。若基
6、因活化或结构改变，导致过量表达，通过模拟生长因子发挥作用，参与受体信号的处理，增强有丝分裂，促进癌瘤发生。研究认为，CerbB-2 的过度表达与乳腺癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤等肿瘤的病理类型及肿瘤转移有关 2 。本研究表明，CerbB-2阳性表达与大肠癌病理类型和临床分期不相关，而与大肠癌淋巴结转移和肝转移相关。近年来 CD44 基因的变异性表达与大肠癌细胞的生长、浸润、转移和预后的关系引起普遍关注。Ishiz 在研究结肠癌细胞株的转移中发现，CD44 表达的蛋白分子与透明质酸具有亲和力，参与结肠癌细胞与基底层粘连蛋白和 IV 型胶原的粘连 3 。有研究发现5参与转移有关的变异型外显子普遍存在于
7、结肠癌中，而含有 V6 等序列的不同 CD44 表达片断大部分限于肿瘤发展后期，V6 在转移性结肠癌中较无转移结肠癌表达更多、密度更大 4 。本组研究表明 CD44v6 阳性表达与大肠癌病理类型、临床分期无关，但与淋巴结和肝转移相关。CD44v6 和 CerbB-2 高表达可能在大肠癌转移过程中起某种协同作用。总之，CD44v6 和 CerbB-2 在大肠癌中均有较高的阳性表达率，CD44v6 和 CerbB-2 有望成为预测大肠癌转移的临床生物学指标。两者的表达与大肠癌淋巴结和肝转移相关，表示预后差，可作为判断大肠癌预后的生物学指标。参考文献 1 许东哲，林贞花，沈雄虎，等.CD44s 和
8、CD44v6 在大肠癌中表达的临床意义.临床肿瘤学杂志，2002，7 （3）:161164. 2 Berns EM，Foekens JA，Van Stanveren IL，et al.Oncogene am-plification and prognosis in breast cancer:relationship with systemic treatment.Gene，1995，159:1118.6 3 Ishiz S，Ford R，Thomas P，et al.CD44participates in the adhe-sion of human colorectal carcinoma cells to laminin and type IV colla-gen.Surg Oncol，1993，2（4）:255 264. 4 晋 雯.P53、CerbB-2Pcna 蛋白表达与大肠癌生物学行为 的关系.肿瘤， 2002， 22（5 ）:405406.
