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1、 单细胞全基因组扩增试剂盒 产品说明书 快速、可靠、 高 覆盖率 的 单细胞 全基因组扩增 货号 : YK001A/B 版本 : 1302.1 YK001A/B 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 2 目录 规格成分 . 3 储存方法 . 3 预期用途 . 4 安全信息 . 4 自备材料 . 4 产品简介 . 5 产品特点 . 5 基本原理 . 5 下游应用 . 6 研究领域 . 6 样本要求 . 7 实验准备 . 7 操作流程 . 9 具体步骤 . 10 扩增产物 . 12 参考文献 . 13 问题解决 方案 . 14 技术支持 . 15 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 3
2、规格 成分 本 单细胞全基因组扩增试剂盒 由 DNA 提取和全基因组扩增试剂组 合而成，可用于 10 次 (Cat: YK001A)或 50 次全基因组扩增反应 (Cat: YK001B)。 组分说明： 细胞裂解液（不包含酶） 标记： Cell Lysis Buffer 细胞裂解酶 标记： Cell Lysis Enzyme 预扩增 buffer（不含酶） 标记： Pre-Amp Buffer 预扩增酶 标记： Pre-Amp Enzyme Mix 扩增 buffer（不含酶） 标记： Amplification Buffer 扩增酶 标记： Amp Enzyme Mix 储存方法 试剂盒内的
3、所有组分可在 -20储存 十二 个月，产品保质期标记于 包装盒的标签上。用时请将细胞裂解酶、预扩增酶和扩增酶置于冰浴中，其他组分可在用前置于冰上解冻，建议您将试剂盒内的组份按 成分 YK001A （ 10 次包装） YK001B （ 50 次包装） 细胞裂解液（不包含酶） 100 L 300 L 细胞裂解酶 10 L 30 L 预扩增 buffer（不含酶） 300 L 750L x 2 预扩增酶 10 L 50 L 扩增 buffer（不含酶） 300 L 750L x 2 扩增酶 8 L 40 L 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 4 需求进行分装，避免反复冻融。 预期用途 单细胞
4、全基因组扩增试剂盒 只用于研究 目的 ； 单细胞全基因组扩增试剂盒 不得向第三方转让，不得再销售或改装销售，不得用于商业服务； 未经江苏亿康基因科技有限公司授权， 本产品 不得用于商业产品的制造。 安全 信息 利用本试剂盒进行实 验操作时，请穿着实验服，戴好一次性手套和防护眼镜，务必做好防护措施。如需更多信息，请查阅材料安全数据表。 自备 材料 PCR 仪 PCR 管 移液器 移液器吸头 制冰机 微型离心机 -20C 冰箱 漩涡混和仪 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 5 紫外分光光度计 无核酸酶水 1X PBS buffer 产品 简介 单细胞全基因组扩增试剂盒 能够在 4 小时内，
5、从单细胞或者等量DNA 中有效扩增出 2-4g 的全基因组 DNA。本试剂盒也可用 于 其他DNA 模板量有限的情况，例如，少于百个细胞或低于 ng 级的 DNA。对于大多数的哺乳动物细 胞，例如，单个胚胎分裂球、极体、单细胞、精子，本试剂盒均可获得 95%以上的基因扩增成功率，并可实现 AT-GC富集区的 成功 扩增。本试剂盒可 从 微量 样本中进行高度重复的扩增 ， qPCR 的 Ct 值经多个单细胞重复 反应 后均可得到 大于 0.9 的相关系数。本试剂盒能够 扩增 90%以上 的基因 座 ，产物可用于多 个 分析平台，例如实时定量 PCR 和高通量测序。 产品特点 哺乳动物单细胞 经
6、扩增后可获得 2-4g 的 DNA 产物； 单管操作、 3 步完成、仅需 4 小时、中间产物无需纯化； 可从流式分选 出 的细胞或 0.5pg 级 DNA 中扩增出全基因组 DNA，且成功率达 95%以上； 可在 AT-GC 富集区得到 准确、高 重复 度 的 连续扩增 结果 ； 仅存在 10%的基因座丢失 及 等位基因 丢失 。 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 6 基本原理 单细胞全基因组扩增试剂盒 可 实现 高度均一的全基因组扩增， 其核心技术为 多次退火环状循环扩增（ MALBAC）技术 1，该技术利用独特的具有 链 置换活性的 DNA 聚合酶进行 准 线性的全基因组预扩增，通
7、过 PCR 进行指数 式 扩增，为下游分析提供充分的实验材料。 下游应用 经本试剂 盒扩增后的 DNA 产物 可用于多种下游分析平台： 基因突变检测 SNP 基因分型 CNV 全景图和 非整倍体检测 全基因组和外显子测序 实时定量 PCR 分子克隆 微阵列 比较基因组杂交 研究领域 单细胞全基因组扩增试剂盒 的适用范围十分 广泛， 多种原始材料和 微量样品 均可 通过该试剂盒进行全基因组扩增 ，包括基因组 DNA、新鲜或干燥的血液、新鲜或冷冻的组织、司法痕量物证等 材料 ： 人 和 动物 ： 生物标志物研究（ CNVs、 SNVs） 体外受精胚胎 植入前 基因测序 单细胞全基因组扩增试剂盒 v
8、1302.1 7 转基因动物基因分型 胚胎和 干细胞研究 单精子分型 肿瘤 ： 体细胞遗传变异分析 肿瘤 进化和发展 肿瘤干细胞 循环 肿瘤细胞 细菌 : 宏基因组学研究 微生物基因分型 样本要求 样本数量 本 试剂盒 是 针对单细胞的全基因组扩增设计 的 ，同时适用于起始模板量为单染色体或范围在 0.5pg 级至 1 ng 级的基因组 DNA。 样品收集方式 通过流式分选，缓冲液稀释和显微操作等方式获得的单细胞均可利用本试剂盒进行 全基因组 扩增。虽然活细胞扩增的结果较为理想，但本试剂盒对于经过多聚甲醛固定或激光微切割的样品，同样适用。 样本预处理 为减少细胞准备过程中 DNA 的污染，建议
9、您 在实验前 对细胞进行清洗，清洗液为不含 Mg2+和 Ca2+的 1 PBS 溶液 ， 保证带入 后 该实验中的 PBS 溶液的体积不得超过 1 L. 单细胞全基因组扩增试剂盒 v1302.1 8 实验准备 1.预扩增样品准备区的隔离 为避免样品受外界因素干扰或 DNA 扩增产物的污染，在扩增前，预扩增样品的准备过程需在单独隔离的实验室或专门工作区完成，并预备专用的实验材料和仪器，例如，移液器、移液管、 PCR 管、 1.5mL的离心管、离心管架、离心机、漩涡混和仪和实验服等； 请将 DNA 扩增产物与预扩增试剂分开储存；所有的下游分析处理，如 DNA 纯化、测序前的准备 工作， 请在另一实验室中进行。 2.移液器吸头 由于单细胞全基因组扩增 的整个 过程 都 在同一 PCR 管中进行，因此，在操作过程中，请避免移液器吸头接触液体，以免因操作不当，将单细胞或 DNA 裹挟出反应体系；添加规定体积的液体时，请沿管壁小心添加，请勿吹打 PCR 管中 液体 ； PCR 前，请进行短暂离心，以保证反应体系中的液体混合均匀。 3.对照组 DNA 样品 (5 L) 建议您利用 30pg 的基因组 DNA 作为阳性对照 利用无核酸酶水将
