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1、 课题 2 微生物的培养和应用一、培养基 （1 ）培养基成分必须添加：碳源、氮源、水、无机盐；根据需要添加：特殊营养物质(又称生长因子，包括：氨基酸、维生素、碱基等 )1.下列属于微生物不可缺少的微量有机物有( )牛肉膏 蛋白胨 氨基酸 维生素 碱基 A. B. C. D.2 可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是（ ）A.含碳有机物、氨、光 B.含碳无机物、氮、氮C.含碳有机物、氨、氨 D.含碳无机物、氨、氨3.下列叙述错误的是（ ）.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 .培养霉菌时需将培养基的 PH 调至碱性.培养细菌时需将 PH 调至中性或微碱性 .培养厌氧微生物时则需要提供
2、无氧的条件4.关于微生物的营养，说法正确的是（ ）A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅能提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量5下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（ ）ACO 2 和 NH3 分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自 NH3 的氧化BCO 2 和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C糖类和 N2 是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但 CO2 一定不是酵母菌的碳源(2)培养基的分类A.根据物理性质分为：固体培养基和液体培养基B.根据用途分：选择培
3、养基：只允许目的微生物生长鉴定培养基：使目的微生物形成特殊的特征通用培养基：所有微生物都能生长C.根据成分分为：天然培养基和合成培养基6.要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）A.固体培养基 B.液体培养基C.加入青霉素的培养基 D.加入高浓度食盐的培养基7.从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有（ ）尿素 有机氮化物 无机盐 有机碳化物 水 无机碳化物 A. B. C. D. 8.甲、乙、丙是三种微生物，下表 I、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在 I 中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说
4、法正确的是（ ）粉状硫10gK2HPO44gFeS040.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH20100mlMgS049.25gCaCl20.5gI + + + + - + + + + + + - + + + + + + + + + + + +A、甲、乙、丙都是异养微生物 B、甲、乙都足自养微生物、丙是异养微生物 C、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物 D、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物9.伊红美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是（ ）A.大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落B.大肠杆菌能使培养基改变颜色C.大肠杆菌菌的代谢产物与伊红美蓝结合，使菌落呈黑色，并
5、有金属光泽 D.大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活10.在培养基中加入伊红和美蓝可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，这种培养基称为( )A.选择培养基 B.鉴定培养基 C.液体培养基 D.固体培养基二、无菌技术(1)消毒、灭菌的概念(2)消毒方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂、紫外线灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌选用原则：能灭菌的不用消毒。高温下有液态成分的用高压蒸汽(如：培养基、蒸馏水) ，固体的用干热灭菌(如：培养皿 )。使用前，耐烧的用灼烧灭菌。11细菌培养基通常在 121压力锅中灭菌。如果只有在 100的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪
6、一种生物仍会存活？（ ）A大肠杆菌 B一种青霉菌 C枯草芽孢杆菌 D鼠伤寒沙门氏菌12.接种时的灭菌不正确的是( )A.对接种环的灭菌 B.对双手的灭菌 C.对培养基的灭菌 D.对试管口的灭菌13细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅14.获得纯净培养物的关键是（ ）.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵3、 实验操作（1 ） 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
7、计算、称量、熔化、灭菌、倒平板15.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（ ）.操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯.待培养基冷却至 50左右时进行倒平板.待平板冷却凝固约 510min 后将平板倒过来放置16.有关倒平板的操作不正确的是 ( ) A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置17关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是（ ）A.称量 B.灭菌 C.溶化 D.倒平板（2 ）纯化大肠杆菌：常用的方法是平板划线法和稀释涂布
8、平板法菌落的概念：一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体18.微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ）A.细菌的大小、形状、颜色 B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛 D.培养基的不同19下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ）A将接种环放在火焰上灼烧B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连20.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ）.先将菌液进行一系列的梯度稀释.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面.适宜条件下培养 D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落21.涂布平板操作
9、需要用到（ ）A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯22以下操作用到接种环的是（ ）A平板划线操作 B系列稀释操作 C涂布平板操作 D倒平板操作4下列关于微生物的培养和运用的叙述，错误的是 （）A通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种D微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同四、培养23.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入 37恒温箱的目的是（ ）A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基上是否生有杂菌C.没必要放
10、入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用24下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是 （）A微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法D分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基二、填空题1、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 和 。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。（3）
11、为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定在 37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。（4）培养 20 小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越 。（5）如果提高培养基中 NaCl 的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为 。答案 （1）氮源（碳源不作要求） 碳源 无机盐 水（2）高压蒸汽灭菌 （3）恒温培养箱 无菌水（4）多 高 （5）盐（或 NaCl） 选择培养基2、如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：（1）依物理性质划分，该培养基属于 培养基；依用途划分，则属于 培养基。（2）根据培养基的原料，所培养微生物的同化作用的类型是 ，培养的微生物可能是 。（3）该培养基中的碳源是 。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是 和 ，倒平板时，一般需冷却至 左右，在 附近操作。答案 （1）液体 选择 （2）异养型 酵母菌或霉菌（3） （CH 2O） 调整 pH 灭菌 50 酒精灯火焰成分 含量NaNO3 3 gK2HPO4 1 gKCl 0.5 gMgSO47H2O0.5 gFeSO4 0.01 g（CH 2O） 30 gH2O 1 000 mL青霉素 0.1 万单位
