《CD4+CD25+调节性T细胞与自身免疫性肝病研究进展》由会员分享，可在线阅读，更多相关《CD4+CD25+调节性T细胞与自身免疫性肝病研究进展（16页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1CD4+CD25+调节性 T 细胞与自身免疫性肝病研究进展【关键词】 CD4+CD25+调节性 T 细胞; 自身免疫性肝病; 免疫耐受调节性 T 细胞（regulatory T cell, Tregs）是体内具有免疫抑制功能的异质性细胞群, 对维持免疫系统稳态起重要作用。特别是 CD4+CD25+调节性 T 细胞在维持外周免疫耐受中起重要作用 , 其数量减少或功能缺失可导致自身免疫病的发生。肝脏在生理和某些病理情况下处于免疫耐受状态, 一旦天然免疫耐受状态被打破, 发生针对肝组织抗原的免疫应答及异常自身反应, 造成靶组织损伤和炎症, 便会发生自身免疫性肝病。近些年, 人们对 CD4+CD25
2、+调节性 T 细胞维持免疫耐受的机制及在自身免疫性肝病中的作用进行了初步研究, 现就有关领域的研究进展作一综述。1 CD4+CD25+调节性 T 细胞概述调节性 T 细胞是指既可天然产生又可以经诱导而产生的具有免疫抑制功能的细胞群, 包括 Th3、Tr1 和 CD4+CD25+Tregs。天然调节性 T 细胞即 CD4+CD25+Tregs, 占人和小鼠外周血 CD4+T 细胞5%10%1, 其表达的表面分子包括 CD4、CD25（IL2R 链） 、2叉头样转录因子 Foxp3（foxhead box protein 3） 、细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原 4（CTLA4 ） 、糖皮质激素诱导
3、的肿瘤坏死因子受体（glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor, GITR） 、转化生长因子 （transforming growth factor, TGF） 、PD1（programmed death1） 、趋化因子受体 CCR4、Toll 样受体（tolllike receptor, TLR） 、 淋巴细胞抗原复合体 6(Ly6)、Neuropilin1 及归巢受体 CD103 等, 这些表面分子对CD4+CD25+Tregs 的发育及功能活化起着重要作用2 。CD4+CD25+Tregs 通过细胞接触依赖方式和（或）分泌可溶
4、性细胞因子, 如 IL6、IL10 和 TGF对效应细胞发挥免疫抑制功能3, 在免疫病理、移植物耐受、防止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面发挥重要作用。1.1 CD4+CD25+Tregs 功能的调节1.1.1 Foxp3 对 CD4+CD25+Tregs 的调节Foxp3 为叉头样转录因子家族成员, Brunkow 等4 首次发现其与调节性 T 细胞的发育和功能密切相关。人类 Foxp3 基因位于 Xp11.23, 由 11 个外显子和 10 个内含子组成, cDNA 全长 1896 bp, 编码的 Foxp3 蛋白 Scurfin 由 431 个氨基酸组成, 叉头状DNA 结合域靠近 C
5、 末端。Foxp3 可通过下调 IL2、TNF、GMCSF3等细胞因子, 同时上调 IL10 发挥免疫抑制作用。通常认为 Foxp3 mRNA 及其编码蛋白只特异性表达于 CD4+CD25+Tregs, 但Morgan 等 5发现, 用植物凝集素（ PHA）或抗 CD3 和抗CD28 联合刺激人 CD25- PBMCs 2440 h 后, 其 Foxp3 mRNA表达呈阳性。可见, Foxp3 是否仅特异性表达于CD4+CD25+Tregs 尚存争议。Foxp3 基因缺陷或突变小鼠表现为淋巴细胞增殖病和各种自身免疫病, 而人类 Foxp3 基因突变可引起全面的免疫失调6, 表现为内分泌疾病、肠
6、病、X 染色体性联综合症（IPEX） 。若阻断正常小鼠来源的 CD4+CD25+Tregs Foxp3 表达, 则 CD25、 CD45RB、CTLA4 及 GITR 等表面分子表达水平下调, 抑制功能明显降低; 而在高表达 Foxp3 的转基因小鼠体内, CD4+CD25+Tregs细胞数量明显增加。如果将正常小鼠的 CD4+CD25+Tregs 转输给Foxp3 基因缺陷小鼠 , 可防止自身免疫病的发生。以逆转录病毒为载体, 向 CD4+CD25-T 细胞转导 Foxp3 基因, 可使其获得CD4+CD25+Tregs 细胞表型和功能7 。 Kim 等8通过逆转录病毒向人白血病 CD4+J
7、urkat-T 细胞中转导 Foxp3 基因诱导其产生了 Treg 表型与功能。由此可见 , Foxp3 不仅决定了CD4+CD25+Tregs 的表型与功能, 而且可以赋予靶细胞以 Tregs样活性, 其作用可能是独立的。41.1.2 Toll 样受体对 CD4+CD25+Tregs 的调节Toll 样受体（Tolllike receptors, TLRs）属于在固有免疫和适应性免疫中发挥重要作用的模式识别受体（pattern recognition receptors, PRR）家族成员, 能够识别病原相关的分子模式（pathogenassociated molecular pattern
8、, PAMP）, 如细菌、病毒、真菌和原虫等。通常认为 TLR 介导的对入侵病原体特定结构的识别在启动固有免疫的同时, 通过树突状细胞和其他抗原提呈细胞启动适应性免疫。TLR 几乎表达于所有免疫细胞表面9, 如幼鼠 CD4+CD25+Tregs 选择性表达 TLR4、TLR5、TLR7 和TLR8, 然而 TLR1、TLR2、TLR3 和 TLR6 更广泛表达于 CD4+T 细胞而并不仅限于 CD4+CD25+Tregs。近年研究表明10, TLR信号转导参与了由自身抗原、 同种异体抗原和异种抗原导致的炎症和免疫反应。最近发现, TLRs 的内源性配体, 如 hsp60 或其肽段 p277 作
9、用于 CD4+CD25+Tregs, 可通过 TLR2 信号转导上调CD4+CD25+Tregs 来下调适应性免疫应答11; TLR5 的配体鞭毛蛋白可增强 CD4+CD25+Tregs Foxp3 的表达12; TLR8 直接触发 CD4+CD25+Tregs 引起其免疫抑制功能消除13; TLR9的配体 CpG 寡聚核苷酸联合抗 CD3 单抗可诱导鼠 CD4+CD25-和CD4+CD25+Tregs 的增殖14 。由此可见, TLR 信号转导可直接5或间接调节 Tregs 在免疫应答中的免疫抑制功能, 但具体机制尚不清楚, 一种解释是继不同 TLRs 受刺激后 Foxp3 表达的上调或下调
10、可能与 Treg 细胞功能改变有关 , 而 TLR 信号转导怎样影响 Foxp3表达仍需进一步研究。1.1.3 细胞因子对 CD4+CD25+Tregs 的调节细胞因子对 CD4+CD25+Tregs 的生成及功能发挥起重要作用。IL2 、TGF 、IL10 等免疫调节分子可控制 CD4+CD25+Tregs的生成。其他的免疫细胞, 特别是抗原提呈细胞（APCs）对CD4+CD25+Tregs 的生成也起关键作用, 而细胞因子可调节 APCs和 CD4+CD25+Tregs 之间的相互作用。CD4+CD25+Tregs 组成性表达 IL2R链 CD25, 但不能生成 IL2, 用抗 IL2抗体
11、中和并耗尽小鼠体内的 IL2会导致小鼠发生自身免疫病, 同时伴有外周血CD4+CD25+Tregs 数目减少15 , 表明 IL2对于维持CD4+CD25+Tregs 的稳定起重要作用。同样, IL2受体缺陷小鼠也可发生系统性自身免疫病, 这种系统性自身免疫病类似于新生期胸腺切除而致 CD4+CD25+Tregs 缺陷的小鼠, 推测可能是CD4+CD25+Tregs 上的 CD25 分子能够与效应细胞竞争性结合IL2, 使效应细胞缺少生长信号刺激而无法增殖所致。TGF最初被认为是调控 T 细胞增殖和发挥效应功能的负性6调节因子, 后来发现它也可以促进 CD8+T 细胞的增殖并使 CD4+和 C
12、D8+T 细胞分泌更多的 TNF, 具有抗凋亡功能。研究表明16, TGF可以诱导人类 CD4+CD25-T 细胞表达 Foxp3, 在促进 CD4+CD25+Tregs 的增殖同时使 Foxp3 表达增加, 但仅对初始CD4+CD25+Tregs 的诱导而言是必需的, 对于活化后的CD4+CD25+Tregs 并非必需。Horwitz 等17 发现, 部分中和IL2 会消除 TGF诱导的 CD4+CD25+Tregs 的抑制功能, 表明TGF单独作用不能对 CD4+CD25+Tregs 起调节作用, IL2 和TGF联合作用可增强 CD4+CD25+Tregs 的抑制效应。近年Skapenk
13、o 等18 报道了与 IL4R 结合的细胞因子, 如 IL4 和IL13 可促进天然 CD4+CD25+Tregs 的生成。在体外, IL4 和 IL13可将人类 CD4+CD25-初始 T 细胞转化为 CD4+CD25+Tregs, 但依赖于抗原特异性刺激和 B7 协同共刺激。2 CD4+CD25+Tregs 与自身免疫性肝病自身免疫性肝炎（AIH ） 、原发性胆汁性肝硬化（ PBC）和原发性硬化性胆管炎（PSC）是三种主要的侵犯肝脏的自身免疫病。AIH主要造成肝细胞损伤, PBC 主要破坏小胆管, PSC 主要表现为中大胆管损伤, 他们均以出现自身抗体为特征。自身免疫性肝病发病机制尚不清楚
14、, 主要认为是环境因素作用于有遗传易感性的个体, 导致天然免疫耐受被打破, 发生对自身抗原的免疫应答, 通过自身抗原敏感7性细胞毒 T 细胞介导的细胞毒和/或自身抗体依赖的细胞毒反应（ADCC）造成相应的靶组织损伤、靶细胞凋亡和坏死。人们已经注意到参与维持内环境稳定的细胞群, 如 NK 细胞、Th3、Tr1 、 CD8+CD28-、T 细胞, 特别是 CD4+CD25+Tregs可能与该病的发生发展有关。自身免疫性肝病在我国尚无明确的发病率报告, 据北京佑安医院的统计 , 6000 例肝功能异常患者中, AIH患者 84 例19; 在检测的 3000 例各种肝病患者中, PBC 为 52例占
15、1.7% 20 。随着对该病认识的不断深入及临床检出率的增加, 已引起国内学者的重视。2.1 CD4+CD25+Tregs 与 AIHAIH 是一种慢性炎症性肝脏疾病 , 多累及青年女性, 男女比为14, 以血清中转氨酶水平增高, 外周循环中出现自身抗体, 高 IgG球蛋白血症和浆细胞浸润肝组织为特征, 对免疫抑制治疗有效, 组织学可见门静脉周围炎症和肝界面炎症。根据自身抗体特点将 AIH 分为三种, 1 型 AIH 以抗核抗体（ANA ）和/或平滑肌抗体（SMA ）为特点; 2 型 AIH 的典型抗体直接针对的是肝肾微粒体 1 型（LKM1）和/ 或肝细胞质 1 型（ LC1）; 抗可溶性肝
16、抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗体的出现被认为是 3 型 AIH 的特点, 但具有争议的是有抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体的病人并不存在明显的临床特征。Wiegard 等21发现, 在正常条件下, CD4+CD25+Tregs 可以抑制肝细胞激活的 CD4+T 细胞, 而在微生物存在条件下, 肝细胞可8以抵抗 CD4+CD25+Tregs 的抑制作用, 使免疫耐受转为免疫应答。除 CD4+T 细胞外, AIH 患者亦存在抗原特异性 CD8+T 细胞, 而CD4+CD25+Tregs 在抑制自身反应性 T 细胞的增殖和效应功能发挥的同时, 还可下调 CD8+T 细胞产生 IFN、IL4, 由此可见, CD4+CD25+Tregs 在 AIH 发病中起重要作用。Longhi 等22对 AIH 患者外周血 CD4+CD25+Tr
