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1、穿刺液涂片镜检与细菌培养的比较作者：陈静 阮俊钢 作者单位：839000 新疆哈密红山农场医院检验科 839000 新疆哈密红星医院检验科 【摘要】 目的 了解深部穿刺液标本直接涂片镜检与细菌培养 2 种方法对细菌检出率的比较，探讨细菌学检查的影响因素，为临床正确分析细菌学检查结果提供参考。方法 对临床送检的 143 例深部穿刺液标本进行直接涂片镜检和细菌培养。结果 104 例涂片阳性标本中有 31 例（29.8%）细菌培养阴性； 39 例涂片镜检阴性的标本中 13 例（33.3% ）细菌培养阳性。31 例未经抗生素治疗的脓肿穿刺液标本涂片与细菌培养结果均阳性，而且结果一致。结论 经验用药后再
2、采集细菌培养标本是影响细菌培养阳性率的主要原因。标本直接涂片镜检对细菌培养检查有重要的补充作用。 【关键词】 涂片检查；细菌培养；标本临床上对怀疑有细菌感染的标本往往只注重细菌培养，而忽略标本直接涂片镜检的重要性1 。事实上，由于经验用药的广泛存在，一些细菌培养结果很难解释。深部穿刺液标本受污染机会小，很适合用涂片镜检方法进行初步检查。1 材料和方法1.1 标本采集方法及来源 以无菌操作方法用一次性无菌注射器采集。脓肿脓液 110例，胸腔、腹腔积液 25 例及其它（如关节液、淋巴液及脑脊液）8 例。采集完毕后，排尽空气，将针头刺入灭菌胶塞内立即送检。1.2 细菌培养 排出针管内最初 35 滴穿
3、刺液，弃去。分别于预温的血平板，巧克力平板及预还原的厌氧培养平板上各加一滴（约 3050ul ） ，分区划线接种后，送入相应培养环境中。对个别稀薄的穿刺液，如直接涂片镜检阴性则离心后取沉淀物再次接种相应平板并记录为浓缩后结果。血平板置 35，空气条件下培养。巧克力平板置 CO 2 烛缸法培养 1824h 观察结果。如无菌生长则再放回相应培养条件下继续培养 48h，仍然无菌生长则按有氧培养无菌生长报告。厌氧培养平板放厌氧袋中（厌氧袋为法国梅里埃公司提供） ，如经过 72h 培养仍然无菌生长按厌氧培养无菌生长报告。在以上培养时间内如果有菌生长则进行细菌鉴定和药敏试验，由于细菌鉴定，药敏与本研究关系
4、较小，只记录菌落涂片结果。1.3 标本涂片镜检 穿刺液量较多时于培养后涂片，穿刺液量较小时，则将培养接种前准备弃去的几滴作涂片用，共涂片 3 张。一张做革兰氏染色，一张做抗酸染色，另一张备用。对于稀薄而且穿刺液量多的标本如直接涂片镜检阴性，则进行离心沉淀，并于接种完毕后再次涂片，经相应染色后镜检。在革兰氏染色后镜下能明确找到细菌的涂片阳性，未找到细菌或无法辨识的按涂片镜检阴性计入。2 结果 143 例深部穿刺液培养，同一标本培养出两种细菌按一个阳性记入，阳性率为60.1%（86/143） 。涂片镜检同一标本检出两种细菌按一个阳性记入，阳性率为72.2%（104/143） 。104 例涂片镜检阳
5、性者中培养阴性有 31 例（29.8%） ；39 例涂片镜检阴性中培养阳性 13 例（33.3%） 。涂片与培养结果见表 1。 表 1 143 例深部穿刺液标本直接涂片镜检与细菌培养结果的比较直接涂片（略）31 例抗菌药物治疗前采集的脓肿穿刺液直接涂片镜检与细菌培养均阳性，符合率为100%，且未出现涂片与培养不一致的现象，即涂片找到 G+球菌，培养后也只有 G+球菌生长。在 143 例深部穿刺液厌氧培养（经耐氧实验证实） ，共检出厌氧菌 5 株，其中有 1 株为单独检出，另 4 株是与兼性厌氧 G杆菌共同检出。3 讨论 细菌培养与标本涂片镜检是细菌学检查最常用的 2 种方法。涂片镜检的特点是快
6、速及对死活菌达一定数量时均可检出；不足之处是阳性率低，不同标本涂片镜检意义不同及涂片结果对临床治疗的帮助较小。一些非污染性标本如本研究所涉及的深部穿刺物，非常适于涂片镜检。在此类标本中只要直接涂片镜检阳性，标本中的细菌数量一般大于 105，可以认为有细菌感染存在。细菌培养检查是细菌学检查最可靠的方法。由于培养时接种标本量较大，所以其阳性率应很高。特别是培养后能对细菌进行鉴定及药敏试验，对临床诊断及治疗有决定性意义，因此临床更重视细菌培养。目前由于临床经验用药的广泛存在，在采集标本前已经使用抗生素会有很多情况下不能培养出细菌（标本中细菌为死菌或严重受抑） ，给临床诊断造成困难。 标本涂片镜检对细
7、菌培养结果有重要的补充作用。本研究中 104 例涂片镜检阳性的标本有 31 例培养后无菌生长，假阴性率为 29.8%，虽然不能完全排除培养方法中的问题，但以本研究中的方法来说造成培养阴性的重要原因是经验用药的影响。值得一提的是本研究中有 31 例为用抗生素治疗前采集的标本，其涂片镜检与培养结果完全一致。从本研究中可以看出，在 70 例涂片检出 G+球菌的标本中有 30 例未培养出 G+球菌，假阴性率为42.9%；在 41 例涂片检出 G杆菌的标本中有 9 例未培养出 G杆菌，假阴性率为22.0%。这说明经验用药对 G+球菌培养的影响明显大于 G杆菌。 直接涂片镜检有时还会获得意外的重要信息。1
8、43 例标本中共有 5 例直接涂片检出抗酸杆菌，虽总结时未计入本资料，但说明平时做细菌学检查时不可忽视结核菌的检查，必要时应做结核菌培养或结核抗体筛查实验。另有 2 例腹水标本在做革兰氏染色镜检时意外发现有成团的非白细胞有核细胞，经脱落细胞学检查证实为癌细胞。 细菌培养检查仍是较为可靠的方法。本研究 39 例涂片镜检阴性标本中有 13 例培养阳性，说明培养确实能提高检出率。在这 39 例中，全部患者都经过抗生素治疗 515d 不等，在对 13 例分离出的细菌进行药敏试验时，发现采集标本前按经验使用的抗生素均为非敏感药物。 涂片镜检对细菌培养检查有重要的补充作用，特别是对经验用药的标本尤其是细菌培养标本最好在使用抗菌药物治疗前采集，经验用药后采集的标本无论涂片镜检还是细菌培养都会影响其结果。本结果也提示实验室最常做的血培养最好是在使用抗菌药物之前采集，否则会大幅度降低血培养的阳性率。【参考文献】1 周惠平. 临床细菌学检验面临的挑战 J .中华医学检验杂志，1999,22:12申明：本论文版权归原刊发杂志社所有，我们转载的目的是用于学术交流与讨论，仅供参考不构成任何学术建议。
