《119例慢性髓细胞白血病急变期核型分析-2016年最新医学论文》由会员分享，可在线阅读，更多相关《119例慢性髓细胞白血病急变期核型分析-2016年最新医学论文（14页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询119 例慢性髓细胞白血病急变期核型分析作者：朱雨，李建勇，潘金兰，吴炜，仇海荣，吴亚芳，杨慧，张建富，陈丽娟，薛永权【摘要】 为了探讨慢性髓细胞白血病急变期(CML-BC)核型变化规律及意义，应用 R 显带技术对 119 例 CML-BC 患者的核型资料进行分析，并在其中随机选出 28 例以荧光原位杂交法（FISH）检测衍生 9号染色体der(9)是否缺失。结果表明： 124 例核型检查中 Ph阴性 11 例（8.9%） ， Ph 阳性 113 例（91.1%） ，其中典型易位 104例（83.9%） ，单纯变异易位 4 例（3.2%） ，
2、复杂变异易位 5 例（4.0%） ； Ph 阴性 CML-BC 中 72.6%伴有附加染色体异常,主要类型是: i(17q)、+14，Ph 阳性者 72.3%伴有附加染色体异常,主要类型是： +Ph、+8、i(17q)；Ph 阴性 CML-BC 急变时间为 2-66 月，平均29.0 月，Ph 阳性者急变时间为 1-127 月，平均 34.2 月，两组比较无统计学差异（P0.05） ； FISH 检测发现 5 例（5/28,17.9%）der(9)缺失。结论： 慢性髓细胞白血病急变期附加染色体异常多见，FISH 技术可有效检测 der(9)缺失。 精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主
3、页查询【关键词】 慢性髓细胞白血病； 慢性髓细胞白血病急变期； 核型分析； 衍生 9 号染色体缺失Karyotype Analysis in 119 Patients with Chronic Myeloid Leuke- mia at Blast CrisisDepartment of Hematology, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Jiangsu Province People Hospital, Nanjing 210029, China; 1The First Affiliated Hos
4、pital of Soochow University, Jiangsu Institute of Hematology,Suzhou 215006, ChinaAbstractTo investigate the karyotype of chronic myeloid leukemia in blast crisis (CML-BC), karyotype analysis was performed with R-banding technique in 119 patients with CML-BC. Dual fusion fluorescence in situ hybridiz
5、ation (FISH) was used to detect derivative chromosome 9 deletions in randomly selected 28 cases of them. The results showed that 11 cases (8.9% ) were Ph negative;113 cases (91.1% ) were Ph positive; 104 cases (83.9%) had standard Ph translocation;9 cases (7.2% ) showed variant translocation, 精品文档欢迎
6、来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询including 4 cases (3.2%) with simple variant translocation and 5 cases (4.0% ) with complex variant translocation. 72.6% of Ph negative CML-BC had extra chromosomal abnormalities, with the most common ones being i(17q) and +14. 72.3% of Ph positive CML-BC had extra cytogenetic ch
7、anges and +Ph, +8, i(17q) were the most frequent. The average time between diagnosis and blast crisis was 29.0 months (range 2 to 66 months) for Ph negative cases and 34.2 months (range 1 to 127 months) for Ph positive cases. 5 cases (5/28,17.9%) with der(9) deletions were detected by FISH technique
8、. It is concluded that extra chromosomal abnormalities are common in CML-BC patients and FISH can effectively detect the der(9) deletions.key wordschronic myeloid leukemia; CML-BC; karyotype analysis; derivative chromosome 9 deletion慢性髓细胞白血病（CML） 是一种起源于多能造血干细胞的血液系统恶性疾病，占白血病总数的 15%-25%，Ph 染色体被认为是 CML
9、的特异性标志。在临床上患者一般在确诊 2-5 年内由慢性期进展到精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询急变期（blast crisis, BC） ，慢性期时对化疗反应良好，进入急变期后化疗有效率不超过 30%，生存期短，预后极差。CML 病程中出现新的染色体异常克隆预示急变已得到广泛认可，进入急变期后附加染色体出现频率高、种类多，本研究对 119 例进入急变期的 CML 患者的核型进行了分析。材料和方法病例来源119 例 CML-BC 患者，其中男 85 例，女 34 例，男女比为2.51，中位年龄 40.6 岁。CML 诊断及分期标准参照张之南主编的血液病诊断及疗效标准 （第二
10、版） 1 。所有 119 例患者均行常规核型分析，其中随机选取 28 例标本作荧光原位杂交（FISH） ，以检测是否有衍生 9 号染色体der(9)缺失，取 5 例正常人骨髓作对照。核型分析精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询119 例患者中有 5 例在 CML-BC 期做了 2 次染色体检查，共有 124例次核型资料，其中 51 例核型变化资料为定期复诊患者从初发病到急变及继续治疗后的核型变化资料。在上述 51 例中 4 例急变后行异基因造血干细胞移植。全部病例均采用直接法及不加植物血凝素的短期培养法制备染色体标本，然后采用改良的热处理姬姆萨 R 显带技术分析 20-40 个
11、分裂中期细胞核型，并参照人类细胞遗传学国际命名体制ISCN(1995) 加以描述2 。荧光原位杂交取出-20冰箱内保存的 R 显带后细胞,换用新鲜的甲醇/冰醋酸（31）固定液，气干法滴片，在普通光学显微镜下找到中期细胞。37 2SSC 中老化 30 分钟，依次以 70%、85%、100%的乙醇梯度脱水，每梯度 2 分钟。72甲酰胺中变性 2 分钟，再 70%、85%、100%冰乙醇梯度脱水，每梯度 2 分钟，晾干。暗环境中取 BCR-ABL 双色双融合 DNA 易位探针 1.0 l(美国 Vysis 公司产品)、双蒸馏水 2.0 l、杂交稀释液 7.0 l 于 Eppendorf 管中，离心、
12、混匀，72水浴变性 5 分钟。每杂交区加 10 l 上述反应液，盖上玻片并封胶 4精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询周。标本置于湿盒杂交 16-18 小时（37） 。杂交后移去盖玻片，72 0.3% triton/ 0.4SSC 洗液中洗 2 分钟，再于 0.1% triton/2SSC 中洗 1 分钟。晾干后每杂交区加 6 l DAPI II，盖上玻片，暗盒中复染 45-60 分钟。Leica DMRA2 荧光显微镜在DAPI/FITC/TexasRed 三色滤光镜激发间期细胞荧光杂交信号：绿色荧光信号为 BCR 及（或）其断裂信号，桔红色荧光信号为 ABL 及（或）其断裂
13、信号，黄色为融合信号。每例计数 500 个间期细胞，不计数重叠细胞。典型 t(9;22)(q34;q11)为 1 红 1 绿 2 融合，其中期细胞可见 Ph 染色体及 der(9)(9pter9q34:22q1122qter)上均有一个融合信号。对于间期细胞中仅有 1 个融合信号的标本，同时观察染色体分散较好、荧光信号清晰的 10 个中期细胞，以明确是否为 der(9)(q34: 22q1122qter)缺失。统计学处理采用成组 t 检验和卡方检验。结果精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询核型分析Ph 染色体的类型及频率 124 例次 CML-BC 中 Ph 阳性表达 113
14、例（91.1%） ，其中典型易位 104 例（83.9%） ，单纯变异易位 4 例（3.2%）（表 1） ，复杂变异易位 5 例（4.0%） （表 2） ，Ph 阴性表达 11 例（8.9%） ，其中 2 例为正常核型（1.6%） 。Table 1. Karyotype of 4 patients with simple variant translocation（略）Table 2. Karyotype of 5 patients with complex variant translocation（略）附加染色体异常的类型及频率 113 例次 Ph 阳性 CML-BC 中 82 例（72.
15、6%）伴有附加染色体异常，主要类型是： +Ph、+8、i(17q)；11 例次 Ph 阴性 CML-BC 中 8 例（72.7%）伴有附加染色体异常，主要类型是： i(17q)、+14，两组比较无统计学差异（P0.05） 。具体结果见表 3。除此以外，出现 2 例次的附加异常有： -X、-Y、-2、+3、-5、+5q-、7p+、-7、+9、+9q+、+8p、+12、+12p+、-16、-18、Phq+；出现 1 次的附加染色体异 CML 随病程进展的核型变化本研究收集到 51 例患者从 CML 初诊到 BC 的核型演变资料。4 例（7.8%）患者初诊时即为 CML-BC，其中 3 例有附加染色
16、体异常，1 例为典型精品文档欢迎来主页查询更多精品文档,欢迎来我主页查询Ph 易位。初诊为慢性期（CP）47 例（92.2%） ，其中 9 例（19.1%）为典型易位，急变后核型不变，35 例（74.5%）急变后出现附加染色体异常；2 例（4.3%）初诊为正常核型，1 例急变后核型不变，1例出现附加异常；1 例（2.1%）初诊时即为复杂异常核型，急变后又出现了新的附加异常。与 CP 核型相比较，进入 BC 后出现附加染色体异常或出现新的附加染色体异常的病例共有 37 例，占 78.7%，而核型保持不变的病例共为 10 例，占 21.3%。5 例在 CML-BC 做了 2次染色体检查的病例中有 3 例（60%）第二次核型检查出现新的附加异常，2 例核型不变。初诊时 46 例 Ph 阳性，包括单纯变异 2 例及复杂变异 2 例；除 4 例初诊时即为 CML-BC，其余 42 例中 27 例（64.3%）急变后出现附加染色体异常。5 例 Ph 阴
