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1、寄生虫粪便检查法,1,实验一,寄生虫粪便检查法,寄生虫粪便检查法,2,一、目的要求,掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱和盐水漂浮法； 应用显微镜观察粪便中虫卵的形态结构,寄生虫粪便检查法,3,二、方法概述,用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。 1、蠕虫卵检查 2、原虫检查 1）活滋养体检查 2）包囊的碘液染色检查 3）卵囊检测 4）隐孢子虫卵囊染色检查：改良抗酸染色法,一）直接涂片法,寄生虫粪便检查法,4,寄生虫粪便检查法,5,二）浮聚法,原理：利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有三种： 1、饱和盐水浮聚法 2、硫酸锌
2、离心浮聚法 3、蔗糖离心浮聚法,寄生虫粪便检查法,6,虫卵比重与漂浮液比重,寄生虫粪便检查法,7,饱和盐水漂浮法操作示意图,自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块，置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中,2. 将粪便捣碎，与盐水搅匀，再加饱和盐水,3. 将满时，改用滴管，加至略高于管口但不超出为止,4. 取洁净载玻片一张盖在管口上，静止30分钟左右,5. 如图垂直向上提起载玻片,6. 敏捷地翻转，覆以盖片镜检,寄生虫粪便检查法,8,三）沉淀法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。 1、自然沉淀法 2、离心沉淀法 （四）漂浮-沉淀法 该法的原理是
3、利用粪便中各种虫卵及粪渣中其它成份比重的差别，将不同比重的虫卵分别集中进行检查，即先按漂浮法检查比重较小的虫卵，然后将管中上层液倒掉，取沉淀物检查不能上浮而沉在下面的比重较大的卵，所以，该法可用于检查比重大小各异的寄生虫卵,寄生虫粪便检查法,9,五）拭子检查法 适用于在肛周、皮肤产卵（蛲虫），或常在肛门附近发现虫卵（带绦虫）的虫卵检查法。 1、棉签拭子法 2、透明胶纸法,寄生虫粪便检查法,10,漏斗幼虫分离法(贝尔曼法)。取粪便15-20g，放在漏斗内的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一个小试管。加入40到淹没粪球为止，静置1-3小时。此时大部分幼虫游走于水中，并沉淀于试管底部。取试管底
4、部沉渣制成涂片镜检。 平皿法。取被检粪球3-4个，放于平皿中，加适量40温水，浸泡10-15min后，除去粪球，留下的液体在低倍显微镜下检查,六）粪便内蠕虫幼虫检查法 1、幼虫分离法：网尾线虫、类圆线虫 2、粪便内虫卵培养法：圆形线虫目 3、毛蚴孵化法,寄生虫粪便检查法,11,结肠小袋纤毛虫 Balantidium coli,十二指肠贾第虫 Giardia duodenalis,球虫,隐孢子虫,寄生虫粪便检查法,12,肝片形吸虫虫卵,日本血吸虫虫卵,蛭形巨吻棘头虫,寄生虫粪便检查法,13,膜壳绦虫虫卵,犬复孔绦虫卵,猪带绦虫虫卵,细粒棘球绦虫虫卵,莫尼茨绦虫虫卵,寄生虫粪便检查法,14,犬鞭虫
5、卵,钩虫卵,犬弓首蛔虫卵,鸽毛细线虫卵，球虫卵囊,肉鸽蛔虫卵,猪蛔虫卵,寄生虫粪便检查法,15,测微尺的使用,通常的镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0m，是专门用来校正目镜测微尺的,通常的目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分、把10 mm长度刻成100等分或将1mm长度刻成100等分,寄生虫粪便检查法,16,测微尺的使用,寄生虫粪便检查法,17,漏斗架2个/组；漏筛6个/组；小烧杯（50ml）12个/组；500ml烧杯2个/组；100mL烧杯1个/组；青霉素瓶6个/组；离心管6个/组；滴管1个/人；饱和盐水1瓶/组；甘油水
6、1瓶/组；100mL量筒1个/组；小方瓷盘1个/组；擦镜纸1平皿/组；小棉块1份/组；载玻片、盖玻片1份/组；离心机、小天平各1台；镊子2个/组；显微镜；试管架1个/组；动物粪便1份/班；50mL烧杯两个用于配平,一）、实验用品,三、试验内容,寄生虫粪便检查法,18,1. 每2人操作1份饱和盐水漂浮法静置滤液 30分钟； 2. 直接涂片法（每2人操作1份）； 3. 离心沉淀法（每2人操作1份）； 4. 继续“1”未完的操作,二）实验安排,寄生虫粪便检查法,19,六、注意事项 1.高倍镜下观察必须加盖玻片 2.采用直接涂片法时，不要涂得太多，必须分散开，均匀 3.观察寄生虫卵前，需校对目镜每格的长度；先在低倍镜下观察，发现后换为高倍镜 4.使用离心机前，需配平离心管 七、作业：绘制粪便样品镜检看到的虫卵 八、思考题：粪便中虫卵、卵囊的检查需要注意那些问题
