茶叶冲泡时茶多酚的溶出条件分析论文1 材料与设备绿茶 ( 江苏洞庭碧螺春 ) 购于市场， xx 年 3 月产 ; 无水碳酸钠、没食子酸均为分析纯 ; 福林酚试剂天津博美科生物技术有限公司 ; 表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表儿茶素没食子酸酯 (ECG)、表没食子儿茶素 (EGC)、没食子儿茶素 (GC)、表儿茶素 (EC)、没食子儿茶素没食子酸酯 (GCG)、儿茶素 (C) 、咖啡碱 (caffeine) 标准品上海顺勃生物工程有限公司 UV－2102PCS型紫外可见分光光度计上海尤尼柯仪器有限公司 ;LC－20A 型高效液相色谱系统日本岛津公司2 试样冲泡与茶多酚的测定方法模拟生活泡茶， 以绿茶为样品，在不同的温度、 液料比、时间、次数、冲泡容器、 是否加盖和搅拌条件下进行实验，分析不同因素对茶汤中茶多酚溶出量的影响，采用 GB/T8313－xx［10］福林酚法对茶汤中多酚的溶出量进行计算 称取 1.0g 的绿茶，分别加入 100mL60、70、80、90、100℃的蒸馏水， 冲泡 5min，不搅拌，冲泡一次，过滤，用少许蒸馏水清洗滤渣，合并滤液，定容至 100mL，测定茶汤中茶多酚溶出量。
称取 1.0g 绿茶，分别以液料比为 50∶1、100∶1、150∶ 1、200∶1、250∶1(mL/g) 加入 80℃蒸馏水冲泡 5min，测定茶多酚溶出量称取 1.0g 绿茶，加入 150mL80℃的蒸馏水分别冲泡 2、 5、8、11、14min，测定茶多酚溶出量称取 1.0g 绿茶，加入 150mL80℃的蒸馏水冲泡 5min，过滤后的滤渣继续进行第二次、第三次冲泡，测定茶多酚溶出量称取 1.0g 绿茶分别置于同内径的保温杯和玻璃杯中，加入 150mL80℃的蒸馏水冲泡 5min，另采用保温杯进行加盖与无盖处理以及在无盖条件下进行搅拌和不搅拌处理的实验， 测定茶多酚溶出量3 响应面分析实验优化茶多酚提取工艺采用 DesignExpert7.0 ，根据 Box－Behnken设计原理，在单因素实验的基础上，选取温度、液料比和时间三个因素，以茶多酚溶出量为响应值，采用三因素三水平响应面分析方法对茶多酚提取工艺进行优化，响应面实验因素与水平见表 14 儿茶素类及咖啡碱的测定方法采用 ZorbaxSB－C18(4.6mm250mm，5μm)色谱柱，流动相 A:3% 甲酸水溶液，流动相 B: 甲醇。
梯度洗脱程序为 (min/B%):0/2 、20/32 、 30/40 检测波长 278nm，流速 1.0mL/min ，柱温 35℃，进样量 20μL分别精密称取 8 种标准品 10mg置于 10mL的容量瓶中，定容即得浓度为 1mg/mL的标准储备溶液，分别吸取一定量的上述标准储备液配成系列标准溶液，以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线为方便与样品图进行分析，配制浓度分别为咖啡碱 100μg/mL、EGCG50μ g/mL、EGC200μg/mL、ECG100μg/mL、GCG100μg/mL、EC100μg/mL、C50μg/mL 和 GC200μg/mL 的混合标准溶液，按 1.4.1 条件进样得到混合标准品液相图 以响应面分析实验得到的绿茶茶多酚最适冲泡条件进行冲泡，茶汤过 0.22 μm水相滤膜，进样测定峰面积，根据各成分标准曲线得出浓度并算出溶出量5 数据统计实验结果以平均值标准差 ( 珚 XSD)表示，每个处理重复 3 次，显著性分析采用 SPSS17.0分析软件进行1 单因素实验由图 1 可知， 60～80℃茶多酚溶出量随着温度的升高而增加明显，随后增加变缓， 80～100℃间差异不显著 (p ＞ 0.05) 。
因绿茶采用嫩叶加工制成，水温过低，溶出量较少，水温过高，汤色易变黄，茶叶表面易熟化、结膜，阻碍茶多酚等成分的溶出，且维生素 C等有益成分易遭破坏， 综合考虑，选取 80℃为最适温度 由图 2 可知，50～150mL/g 时随着液料比的增加，茶多酚溶出量增大， 150∶1(mL/g) 时达 113.87mg/g，随后呈轻微下降趋势，在相同的温度和时间里，水量越大，降温速度越慢，茶多酚会部分发生氧化，并且伴随茶汤中溶出物含量增多，溶剂比例增加，对溶出物起到一定的稀释作用，影响口感，故选择 150∶1(mL/g) 为最适液料比由图 3 可知，绿茶的茶多酚溶出量随着时间的增加，呈现先增后减的趋势，且在 5min 达到最大值，一般茶的滋味随着冲泡时间延长而逐渐增浓， 茶多酚溶出量逐渐增大，但时间过长，会造成部分茶多酚氧化，选择 5min 为最适时间不同冲泡次数对茶多酚溶出量的影响见图 4第一次冲泡可使大部分茶多酚溶出，第二次后溶出量明显减少，而随着次数的增加，较易溶出的氨基酸、 维生素 C和可溶性糖等成分的溶出量减少， 口感明显变差，因此确定冲泡次数为 1 次采用绿茶对生活习惯因素 ( 冲泡容器、是否加盖、是否搅拌 ) 冲泡下茶多酚的溶出量进行研究，其中冲泡容器选择玻璃杯和保温杯， 结果见表 2。
保温杯起到恒温作用，多酚较易溶出，可见泡茶所用器具对茶多酚的溶出量存在一定的影响，但是作用不大，影响不显著 (p ＞0.05) 搅拌可使茶叶充分浸泡，多酚的溶出量大幅度提高， 但伴随着其他成分的大幅度溶出， 会一定程度的影响口感，可根据个人喜好决定搅拌时间对于绿茶，不加盖溶出量略高，可根据实际情况而定2 响应面实验设计在单因素实验的基础上，根据响应面实验设计，以温度、液料比、时间 3 个因素为自变量，茶多酚溶出量为响应值，实验结果见表3经二次多项回归拟合，得到各实验因子对响应面影响的回归方程为 : 茶多酚溶出量 (mg/g)=116.35+8.05A+1.26B+12.72C －2.72AB－3.55AC－0.33BC－19.60A2－8.58B2－9.02C2对模型方程进行方差分析表明，该方程显著，结果见表 4其中校正决定系数 R2Adj=0.9622，相关系数 R2=0.9834，说明回归方程对实验拟合度较好，失拟项不显著，各因素对响应值的影响不是简单的线性关系， 使响应值变化复杂，所以二次相应曲面回归方程能够很好的拟合本实验所得的结果 响应面图形是响应值对各因素 (A、B、C)所构成三维空间的曲面图，根据回归方程作出不同因子的响应面分析图，结果见图 5。
响应面图代表着在第三个变量保持最佳水平时，另两个独立变量之间的交互作用由响应面实验得绿茶茶多酚最适冲泡条件为 : 温度 81.42 ℃、液料比151.92 ∶1(mL/g) 、时间 7.03min ，茶多酚溶出量理论最大值为121.23mg/g，为了实际操作方便，修正条件为温度 81℃、液料比 150∶1(mL/g) 、时间 7min，采用修改后最适条件进行验证实验，结果为茶多酚溶出量为 (112.80 0.10)mg/g ，相对标准偏差 RSD为 0.88%3 高效液相色谱分析结果在以茶多酚为响应值得出的最适条件下进行冲泡，采用高效液相色谱法，以总酚研究为基础， 对茶汤中儿茶素类及咖啡碱溶出量进行分析，进一步探讨最适冲泡条件下各成分溶出量之间相互作用对茶滋味的影响各成分标准曲线和线性范围见表 5，其中保留时间与混合标准品色谱图相对应混合标准品色谱图 (A) 及绿茶最适冲泡条件下样品色谱图 (B) 见图 6由图 6 可知，样品与标准品图中所对应峰的信息一致，虽绿茶成分复杂，但所研究成分在 30min 内均得到分离，可以进行 HPLC定量分析根据标准曲线回归方程与峰面积可计算出各成分的溶出量，结果见表 6。
在响应面最适条件下冲泡，总儿茶素溶出量占茶多酚溶出量的 57.29%，是多酚类物质的主体部分，赋予了绿茶特有的涩味其中 EGCG、ECG、EGC和 EC的溶出量较高， GCG 未检出， C和 GC的溶出量较少除总酚外，咖啡碱溶出量也较高，使绿茶略带苦味， 因绿茶属不发酵茶， 咖啡碱的含量相比较其他发酵茶略低些，但最适条件冲泡仍得到较高的溶出量， 与儿茶素类共同作用，对改善茶汤的滋味起到一定的作用， 减轻单一存在的苦味和涩味，使茶味醇和本实验模拟生活泡茶，以绿茶为样品，研究了温度、液料比、时间、次数以及生活习惯因素对茶多酚溶出量的影响 通过单因素实验和响应面分析实验得出绿茶茶多酚的最适冲泡溶出条件 :1g 绿茶加150mL水在 81℃下冲泡 7min，茶多酚溶出量为 112.80mg/g生活中小小的变化可以使溶出量大幅度提高，为避免口感过于单薄或浓重，在可接受范围内可适当搅拌， 不同的容器和是否加盖可根据个人生活习惯以及口感需求进行调整 在最适条件下冲泡， 采用液相对儿茶素类和咖啡碱进行测定，发现 EGCG、ECG、EGC、EC和咖啡碱有较高的溶出量，对改善绿茶的滋味起着重要的作用陈正函、吕晓玲、徐蕾然、孟颖、张锋 单位：天津科技大学、葫芦岛茂华生物有限责任公司）内容仅供参考 。