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1、1,实验 1 淀粉酶产生菌（细菌）的筛选 一、实验目的 掌握完整的分离纯化淀粉酶产生菌的方法和技术 二、基本原理 土壤中含有大量的微生物，将土壤稀释液涂在不同类型的培养基上，在适宜 的环境中培养几天，细菌或者是其他的微生物便能在平板上生长繁殖，形成菌落。 将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养，因为只有能够产生淀粉酶的细 菌才能够利用培养集中的淀粉成分来完成自身的生命活动，才能够生存。故在淀 粉培养基上长出的菌便是淀粉产生菌。在培养基上滴碘液，淀粉被分解掉的部分 不显现蓝色，出现透明圈，可以通过透明圈的大小来初步判断菌种产淀粉的能力。 三、材料与器材 1、菌源 校园土样 2、培养基： 淀粉
2、培养基：蛋白胨 10g，NaCl 5g，牛肉膏 5g，可溶性淀粉 2g，蒸馏水 1000ml，琼脂 1520g，121高压灭菌锅灭菌 20 min，待冷却至 50左右时， 于超净工作台倒摇瓶若干。 3、器材 培养皿若干个 、1ml 移液管 1 根、刮铲 1 把、锥形瓶若干个、高压灭菌 锅、超净工作台、试管若干、摇床 四、实验步骤 1、选定采土点后，铲去表土层 2-3cm，取 3-10cm 深层土壤 10g，装入灭过 菌的牛皮纸袋内，封好袋口，并记录取样地点、环境及日期。土样采集后应及时 分离，凡不能立即分离的样品，应保存在低温、干燥条件下，尽量减少其中菌相 的变化。 2、称取土样 10g，放入
3、盛有 90mL 蒸馏水并带有玻璃珠的锥形瓶中，振摇 约 20 分钟，使土样与水充分混合，将细胞分散。 3、初筛：用一支 1mL 移液管从中吸取 0.1mL 土壤悬液加入盛有淀粉培养基 的培养皿中，重复两次。后置于培养箱中培养。 检测：培养出菌落后向培养皿均匀的喷洒碘液，有明显的透明圈的菌落 即为活性较高的淀粉酶产生菌。 4、复筛：选取步骤 3 活性较高的淀粉酶产生菌菌落移植进盛有淀粉培养基 的摇瓶中，放于摇床中培养。 测定：把所有摇瓶中的菌株发酵液用琼脂平板法测定一遍（同步重复 23 块板），将其中活性圈大而清晰的菌株发酵液进一步采用精确检测法测定，选出 较优良的菌株 23 株，并移植进斜面中培养。 五、实验结果
