毛壳科Chaetomiaceae真菌多基因系统演化及分类鉴定研究

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1、毛壳科 Chaetomiaceae 真菌多基因系统演化及分类鉴定研究毛壳科 Chaetomiaceae 真菌是一类分布非常广泛的资源子囊菌。该类真菌大多数种类都能产生纤维素酶、木聚糖酶、漆酶等,降解纤维素和木质素,许多种类具有产生生物活性物质的能力, 可有效抵御肿瘤细胞、作为生物防治材料,少数种类能够引起木本植物病害和人的病害,因此,开展毛壳菌分类研究, 对有效利用这类资源具有重要的理论意义。本研究在陕西、新疆、北京、甘肃、内蒙、西藏等17 个省市的局部地区采集多种植物残体1139 份,不同生态环境土壤表层样品及动物粪便196 份。采用形态分类和多基因系统发育相结合的研究策略,对采集分离自我国

2、部分地区的毛壳菌资源,进行了较系统的形态学分类,进一步地通过28S rDNA序列、 18SrDNA序列、 rDNA-ITS 序列、 EF-1 序列和细胞色素b (cytb)基因序列,从多基因水平开展了分子系统学分析, 探索了毛壳科成员属间和种间的系统发育关系,分析了主要形态性状与系统发育之间的关系,同时对形态学分类结果从基因水平进行了验证。本研究主要取得以下研究成果:1、经过分离,获得的139 个毛壳菌菌株,根据形态学性状,对这些菌株进行了分类鉴定,结果显示,它们分属毛壳科Chaetomiaceae 的毛壳属 Chaetomium、无毛毛壳属 Achaetomium 和棒囊壳属Corynasc

3、us 的 19 个种类,其中毛壳属Chaetomium16种,无毛毛壳属Achaetomium2种,棒囊壳属 Corynascus1 种。共发现新种 4 个,国内新记录种 3个,建立新组合28 个。在所分离鉴定出的毛壳菌类群中,球毛壳Ch. globosum 为优势种群,占总量的 61.87%,其次为旋丝毛壳Ch. bostrychodes和墙毛壳 Ch. murorum ,分别占 7.91%和 5.76%。对毛壳属 Chaetomium新种北疆毛壳 Ch. beijiangensis sp.nov. 和赤峰毛壳 Ch. chiifengensis sp. nov.;无毛毛壳属 Achaeto

4、mium新种小孢无毛毛壳 A. microsporum sp.nov.和星无毛毛壳 A. stellatis sp. nov.进行了鉴定描述。2、采用 28S rDNA基因序列、 18S rDNA基因序列、 rDNA-ITS 基因序列、 cytb序列和 EF-1基因序列,研究了毛壳科Chaetomiaceae 真菌的系统发育关系,证实毛壳属 Chaetomium (含法氏壳属Farrowia )、无毛毛壳属 Achaetomium、棒囊壳属 Corynascus、梭孢壳属 Thielavia、毛喙壳属 Chaetomidium 为毛壳科Chaetomiaceae 成员。 18S rDNA基因序

5、列、 28S rDNA基因序列和 rDNA-ITS 序列系统发育树一致显示,毛壳属Chaetomium、毛喙壳属 Chaetomidium、梭孢壳属Thielavia都不属于单元演化群。表明现行毛壳科 Chaetomiaceaee 属级单元分类系统不能正确反映其自然演化关系,建议重新建立属间分类标准关系,并对属的界限进行定义。3、多基因序列系统发育树显示: 毛壳菌子囊果的形状和子囊孢子的形状与分子系统发育间密切相关,可以作为分属的主要依据; 毛壳菌在培养过程中产生的泌溢物及色泽也与系统发育之间有一定的关系;而子囊果孔口的有无、 附属丝类型与着生方式及子囊的形态与属级单元间关系不大,不应该作为属

6、级分类的性状。4、综合形态学特征和多基因序列系统发育性状,发现毛喙壳属Chaetomidium 和梭孢壳属 Thielavia,在子囊果、子囊、子囊孢子、果壁组织类型等方面与毛壳属Chaetomium相似,属于无孔口的毛壳属类型,据此,将毛喙壳属 Chaetomidium 和梭孢壳属 Thielavia与毛壳属 Chaetomium合并,并对毛壳属 Chaetomium属的概念进行了重新定义。5、 28S rDNA基因序列、 rDNA-ITS 序列、 EF-1基因序列和 cytb 基因序列系统发育树都显示球毛壳Ch. globosum不同菌株核苷酸序列存在很大变异,在系统发育树中处于多个不同分

7、支中,表现为非单元演化群,表明根据目前种级分类标准划分的球毛壳Ch. globosum 实际是一复合群,可能隐含多个不同的种类。6、角毛壳 Ch. caprinum Bainier与旋丝毛壳 Ch. bostrychodes在栅栏状细胞结构和培养性状方面明显不同,在多基因序列发育树中它们也处于不同的分枝中,应该作为两个独立的种,建议将角毛壳Ch. caprinum从旋丝毛壳 Ch.bostrychodes 中分离出来,恢复其早期独立的种的地位。 7、毛壳科真菌 rDNA-ITS基因和 EF-1基因序列具有相当的变异,基因进化速率适中,种间变异程度较大,种内又有一定保守性, 是合适的分子标记类型, 藉此可准确方便地进行毛壳菌种内和种间的分类。而 cytb 基因序列保守性强,对种间的区分能力不强,不建议将之作为种间系统发育研究的性状。而而 而

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