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1、痛平膏药理作用研究论文【摘要】目的观察痛平膏的主要药理作用，为临床应用提供实验依据。方法用热板法、醋酸法致疼痛小鼠模型，观察其镇痛作用；用角叉菜胶、二甲苯致大、小鼠急性炎症模型，考察其抗炎作用；采用葡聚糖致微循环障碍小鼠模型，研究痛平膏的活血作用。结果痛平膏可提高动物因热刺激致痛的痛阈值，减少因醋酸刺激而发生扭体反应的动物只数；对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有抑制作用，可减轻二甲苯致小鼠耳肿胀的肿胀度；对静脉注射葡聚糖溶液引起的小鼠微循环障碍，有明显的改善作用。结论痛平膏具有镇痛、抗炎和活血的药理作用。 【关键词】痛平膏；镇痛作用；抗炎作用；活血作用 【Abstract】ObjectiveTostu
2、dytheprincipalpharmcodynamicsofTongpingointmentandprovideexperimentaldataforclinicalapplication.MethodsMethodsofaceticacid-inducedwrithingandhot-platetestinmicewereusedtostudytheanalgesiceffect.Modelsofacuteinflammatoryreactionsofxylene-inducedmouseearedemaandcarrageen-pastern-inducedratpawedemawere
3、performedtostudytheanti-inflammatoryeffects.TopreparethemodelofmouseearsmicrocirculatorydisturbancebyintravenousinjectionofdextransolutionforobservingpromotingbloodcirculationeffectofTongpingointment.ResultsThepainthresholdwasremarkablyimprovedandthenumberofwrithingmiceinducedbyaceticacidweredecreas
4、ed.Tongpingointmentsignificantlysuppressedcarrageen-pastern-inducedratpawedemaandxylene-inducedmouseearedema.Themicrocirculatorydisturbanceinducedbyinjectingdextransolutionwasamelioratedmarkedly.ConclusionTongpingointmentmanifestedanalgesiceffect，anti-inflammatoryandpromotingbloodcirculationeffectso
5、bviously. 痛平膏是由骨碎补、防风、乳香、没药等多味中药组成的外用中药复方制剂。具有舒筋活血、祛风散寒、消肿止痛的功效。临床可用于颈椎、关节痛、风湿痛、骨质增生痛等症。为获得临床用药的实验依据，采用动物模型观察其镇痛、抗炎和活血作用。 1材料 1.1动物SD品系大鼠，SPF级，14010g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK（京）20020003；ICR品系小鼠，SPF级，体重191g、281g（，用于抗炎试验），由北京维通利华实验动物技术有限公司提供；昆明种小鼠，SPF级，体重191g，由中国药品生物制品检定所提供，许可证号：SCXK11000010。 1.2
6、药品、试剂痛平膏，批号：020801，由北京百草药业提供；扶他林乳剂，批号：01193，北京诺华制药有限公司生产；酸痛灵喷剂，批号：XSH00200，厦 1.3仪器热板测痛仪，型号：GJ-8402，由浙江宁海白石电子医药仪器厂生产；光学显微镜，型号：XSZ-H，重庆光学仪器厂生产。 2方法及结果 2.1分组及给药动物分为痛平膏大、中和小剂量组、空白对照组、酸痛灵喷剂组、扶他林乳剂组。痛平膏各组剂量分别为0.36、0.18和0.09g生药/cm2，酸痛灵喷剂组为0.36ml/cm2，扶他林乳剂组为0.1g/cm2，空白对照组给予生理盐水。 2.2镇痛试验 2.2.1对热板法致小鼠疼痛的影响1因雄
7、性小鼠受热阴囊触及热板，可出现假性结果，所以本试验采用雌性小鼠。本次试验采用一次性给予动物供试品及对照品，观察其药理作用。 取体重为191g的ICR种小鼠，健康。试验前1日，先筛选合格小鼠，每次1只放在加热至恒温的铁板（55）上，小鼠自放在热板上，至出现因热刺激而舔后足所需的时间（s），作为该鼠的痛阈值，出现舔足反应后将小鼠取下。凡舔后足时间小于5s或大于30s或跳跃者弃之不用。间隔1h，重复测定其正常痛阈值，取两次正常痛阈平均值，作为该鼠的给药前基础痛阈值，以平均值不超过30s为合格。将合格小鼠随机分为6组，并将小鼠背部的被毛去除（面积约1cm2）。试验当日，将适量供试品及对照品涂抹于橡皮膏
8、上，固定在小鼠的背部，以不影响其舔后足为度。在给药后不同的时间点，将小鼠放在加热至恒温（55）的铁板上，观察其发生因热刺激而出现的舔足反应时间，小鼠出现舔足反应后，迅速将小鼠取下，以避免烫伤。痛阈值测定时间点分别为给药后0.5、1、2、4、6h。本试验观察受试物的镇痛作用及时效关系。以受试动物出现因热刺激而舔后足反应的时间（痛阈值）为观察指标，对所得的试验数据采用t检验进行统计。同时按下式计算各剂量组动物镇痛百分率。结果见表1。 镇痛百分率=给药组动物痛阈值-空白对照组动物痛阈值空白对照组运动痛阈值100% 表1痛平膏对热板法致小鼠疼痛模型的影响(xs，n=10) 注：与空白对照组比较*P 2
9、.2.2对醋酸致小鼠疼痛的影响1取体重为191g的ICR种小鼠，健康，共84只。本次试验采用一次性给予动物供试品及对照品，观察其药理作用。试验前1日，将受试动物的腹部被毛去除（面积约1cm2）。试验当日，按体重随机分成6组，涂抹于橡皮膏上，固定在小鼠的腹部，给药1h后，将橡皮膏去除，避免影响小鼠的扭体反应。用生理盐水新鲜配置0.6的醋酸溶液，按0.1ml/10g的剂量，腹腔注射给予小鼠。以给予醋酸后15min内，各组受试动物出现扭体反应的只数为观察指标，并进行2检验，与模型对照组比较，组间差异是否有显著性。同时按下式计算各剂量组动物的扭体反应发生率和镇痛百分率。结果见表2。 扭体反应发生率=发
10、生扭体反应的动物数该组动物的总数100% 镇痛百分率=模型对照组扭体反应鼠数-给药组扭体反应鼠数模型对照组扭体反应鼠数100% 表2痛平膏对醋酸致小鼠疼痛模型的影响（n=14） 注：与模型对照组比较。 2.3抗炎试验 2.3.1对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响2因目前不能确证性别对炎症模型的影响，且雌激素有抗炎和免疫抑制作用，故选择雄性大鼠作为本试验的受试动物。取体重为14010g的SD种大鼠，健康，共50只。试验前1日，将试验用大鼠右后腿内侧的被毛去除（面积约1cm2）。试验当日，按体重随机分成5组，分别为模型对照组，扶他林乳剂组，痛平膏大剂量组、中剂量组、小剂量组。分别测量每只大鼠右后肢正常
11、踝关节周长，作为造模前的基础值。测量正常周长后，在右后肢的内侧皮肤，分别给予各组动物适量受试品和对照品，用橡皮膏固定。给药30min后，分别在大鼠右后肢足跖皮下注射1角叉菜混悬液0.1ml/只致炎。在致炎后1、2、4、6h，各测量一次右侧踝关节的周长。以各组动物致炎后与致炎前的踝关节周长之差（肿胀度）为观察指标，采用t检验进行数据统计，按下式计算肿胀抑制率。结果见表3。 肿胀抑制率=模型对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀率模型对照组平均肿胀度100% 表3痛平膏对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响(xs，n=10) 注：与模型对照组比较*P 2.3.2对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响2取体重为281g的IC
12、R种小鼠，健康，共60只。试验当日，按体重随机分成5组，分别为模型对照组，扶他林乳剂组，痛平膏大剂量组、中剂量组、小剂量组。每鼠左耳外侧涂100二甲苯0.02ml致炎，致炎后30min，在致炎的左耳内侧，涂抹适量受试品和对照品。致炎2h后，将小鼠断颈处死，清理剩余药物，沿耳廓基线剪下两耳，用打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用电子天平称重。以每鼠的左耳片与右耳片重量之差（肿胀度）为观察指标，采用t检验进行数据统计，与模型对照组比较组间差异的显著性。按下列公式计算肿胀抑制率。结果见表4。 肿胀抑制率=模型对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度模型对照组平均肿胀度100% 表4痛平膏对二甲苯致小鼠耳肿胀
13、的影响（xs，n=10） 注：与模型组比较*P 2.4活血作用试验1取体重为191g的昆明种小鼠，雌雄各半，健康，共60只。试验共分6组，空白对照组，模型对照组，痛平膏扶他林乳剂组，痛平膏大剂量组、中剂量组和小剂量组。试验前1日，将受试小鼠的背部被毛去除（面积约1cm2）。试验当日，分别给予适量的受试品和对照品，用橡皮膏固定在背部。给药30min后，用1戊巴比妥钠溶液0.05ml/10g腹腔麻醉。剪去耳廓背侧的细毛，并将小鼠腹部向下固定在显微镜的载物台上，使鼠耳固定，调节显微镜（放大倍数为1010），直至可以清楚地观察小鼠耳廓微循环情况。固定视野，调节测微尺的位置，使其可以测量血管直径的变化。
14、给药35min时，观察小鼠耳廓选定部位的微小动、静脉的管径，此测定值为造模前基础值（A、V），并选择血液流态相似的微小静脉，用于观察造模后血液流态的改变。给药40min时，除空白对照组动物外，均按0.3ml/20g的剂量从尾静脉注射葡聚糖溶液（25mg/ml），空白对照组给予同体积生理盐水注射液。分别在造模后10、20、30min时，连续观察小鼠耳部选定的同一位置，记录微动、静脉管径及血液流态的变化。以各组动物造模前与造模后的微动、静脉管径的差值（A、V）为观察指标，同时对微静脉血液的流态进行评分，并作为观察指标，对试验所得数据进行t检验。评分的标准见表5 表5微静脉血液的流态评分标准 分值流
15、态评定标准4分线粒流血流快速，成直线，但有沙粒感3分粒线流血流较快，成直线，但明显有沙粒感2分粒流血流快，成直线，可区分细胞1分粒缓流血流缓慢，明显区分细胞。可见细胞团试验结果见表6。 表6痛平膏对葡聚糖溶液致小鼠耳廓微循环障碍的影响（xs，n=10，m） 注：与模型组比较*P 注：与模型组比较*P 3讨论 炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应，其局部临床特征是红、肿、热、痛和功能障碍。为研究痛平膏的主要的药理作用，本实验分别采用镇痛、抗炎和微循环障碍的经典动物病理模型进行观察。实验结果表明，痛平膏可提高动物因热刺激致痛的痛阈值，减少因醋酸刺激而发生扭体反应的动物只数；对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有抑制作用，可减轻二甲苯致小鼠耳肿胀的肿胀度；对静脉注射葡聚糖溶液引起的小鼠微循环障碍，有明显的改善作用。痛平膏对动物炎症、疼痛模型和微循环障碍模型均具有明显的抗炎、镇痛和活血作用，为临床用于炎症反应提供了实验依据。 痛平膏是外用制剂，其吸收方式和作用时间与常用的口服制剂有较大的区别，为获得较完整的实验数据，实验中尽量测定其作用时间，以获得时效曲线，供临床使用参考。 【参考文献】 1陈奇.中药药理实验研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993，3
