矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验

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1、品种名称:脑心浸萃琼脂培养基英译名称:Brain Heart Infusion Agar品种编号:028361培养基规格:100g 干燥培养基培养基用途:广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养,包括营养要求较高的微生物的培养,特别用于矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验。图册:脑心浸萃琼脂培养基使用原理:胨和脑心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。脑心浸萃琼脂培养基配方(每升):幼牛脑(提取浸出粉)200g牛心(提取浸出粉) 250g葡萄糖 2g氯化钠 5g月示 胨 10g磷酸氢二钠 2.5g琼脂 15g最终 pH7.40.

2、2脑心浸萃琼脂培养基使用方法:1. 称取脑心浸萃琼脂培养基 51g,加入 1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,121灭菌 15分钟,做成斜面培养基。2. 从滤膜上挑取典型菌落,接种到脑心浸萃琼脂培养基斜面上,在350.5培养 2448 h。3. 挑取典型培养物到一片清洁的载玻上,加几滴新鲜的 3%的过氧化氢到载玻片的涂抹菌液上,如果没有气泡发生,就显示过氧化氢酶反应为阴性,则菌落可视为粪链球菌,就应该继续如下确证过程。如果有气泡发生,则过氧化氢酶反应为阳性,因此菌落不属于粪链球菌确证试验至此即可结束。4. 以接种环从脑-心浸萃琼脂培养基上转移一典型菌落到脑-心浸萃

3、液态培养基内,在 45培养 48h。此外也要同时转移一典型菌落到胆汁液态培养中,在 35培养 72h。这种培养基是以无菌的 10%牛胆汁加入到 60mL无菌的脑-心浸萃液态培养基中面配成。5. 转移到上述培养之后,若是菌落能得到繁殖,则表示结果为阳性。6. 计数结果。菌数/ 100mL = N / V 100N经证实的粪性链球菌菌落数V过滤的水样体积(mL)脑心浸萃琼脂培养基质量控制:质控菌株接种后于 350.5培养 24h,结果如下:菌 名 菌 号生长状况粪性链球菌CMCC(B)32223 良好乙型溶血性链球菌CMCC(B)32210良好大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好培养基贮存注意事项:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

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