转染 6 孔板1、转染前一天，接种到 6 孔培养板上4*105/ml.）转染时，细胞要达到 90~95%的融合细胞铺板在 2ml 含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中2、溶液 A：240ul 无血清培养基 + 10 ul lipofectamine 2000 per well （总体积 250 ul）（温育 5min）如果 D-MEM 做为Lipofectamine 2000 的稀释液，必须在 5 分钟内同稀释的 DNA 混合3、溶液 B：246 ul 无血清培养基 + 4 ug 质粒 per well（总体积250 ul）（此为推荐剂量）｛摸 5 个梯度 分别是 4 ug 质粒：4ul lipo，4ug 质粒：6ul lipo 4 ug 质粒：8ul lipo 4ug 质粒：10ul lipo 4ug 质粒：12ul lipo 4、将溶液 A 与溶液 B 混合，室温下置 20min5、与此同时，将 6 孔板中的细胞用无血清培养基冲洗细胞两遍后，加入 2ml 无血清培养基6、将溶液 A 与溶液 B 的混合液逐滴加入孔中，摇动培养板，轻轻混匀在 37℃，5％的 CO2 中保温 5~6 小时。
7、6 小时后，更换含有血清的全培养基，在 37℃，5％的 CO2 中48~72h 检测转染水平8、如果做稳定转染，换全培养基培养后 24h，即可以 1：10 或更高的稀释比例（根据细胞的生长情况）接种到新的培养板，加抗生素进行筛选。