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1、 2LongTaq PCR StarMixLoading Dye-free2无染料长片段预混 PCR 反应体系【产品概述】本产品为预混的含有优化浓度的 GenStar高纯度 LongTaq DNA Polymerase、dNTPs 、Mg 2+、反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型 2 倍浓度的 PCR 溶液，对 10 kb 以上的超长 DNA 片段仍然具备较强的扩增能力，可扩增 30 kb 以 DNA 为模板的片段或 15 kb 以基因组 DNA 为模板的片段，故适用于构建基因图谱。本产品有含染料(红色)和不含染料(无色) 两种选择。使用含染料的产品在 PCR 反应完成后，不需添加上样缓冲液即可
2、直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程，其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 300 bp 双链 DNA 片段相近。【产品组分】2LongTaq PCR StarMix 0.5 mlddH2O 0.5 ml【保存条件】 -20恒温保存一年，避免反复冻融。经常使用，可置于 4保存至少三个月。【使用方法】用户需自备的试剂：DNA 模板、引物操作示例：1. PCR 反应体系的建立： 2. PCR 反应条件的设置：DNA 模板* 1 l正向引物 (10 M) 1 l反向引物 (10 M) 1 l2LongTaq PCR StarMix 2
3、5 lddH2O 22 l94 2 min94 30 sec5565 30 sec 2535 循环72 1 min/1 kb72 5 min 模板量： 101000 ng 基因组 DNA，1 30 ng 质粒，或 12 l RT-PCR 反应后的 cDNA。注意：以上举例为常规 PCR 反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异 ，需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。3. 结果检测：取25 l反应液电泳观察结果。含染料产品可直接上样电泳，无染料产品需添加上样缓冲液后进行电泳。【补充说明】1. 模板 DNA 的纯度和完整性是长片段
4、PCR 成功的关键。扩增 10 kb 以上的 DNA 片段时，应采用高质量的 DNA 提取试剂或试剂盒制备模板 DNA，而不能采用加热或蛋白酶消化法粗提的 DNA。同时引物的设计也至关重要。建议引物的长度在 30 个碱基左右，以保证其特异性。2. TA 克隆：使用 2LongTaq PCR StarMix 扩增的 PCR 产物一部分附有 3-末端突出的 A 碱基，可以进行 TA 载体克隆。然而商业化的 T 载体通常在 34 kb 之间，用于连接 LongTaq 酶的 PCR 产物的效率非常降低。长片段 PCR 产物可通过酶切直接连接到较大的目标载体上，或者通过 TA 克隆方法连接到长片段 PC
5、R 产物专用载体上（如需相关资料可来电索取） 。3. 对保真性能要求比较高的 10 kb 以下片段的扩增，建议使用我公司的 2HiFiTaq PCR StarMix (货号 A117-01，A118-01)。【备注】本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，仅限于此产品的价值本身。货号 规格A125-01 0.5 ml x 1 支，含染料A125-05 0.5 ml x 5 支，含染料 A125-10 0.5 ml x 10 支，含染料 A126-01 0.5 ml x 1 支，无染料A126-05 0.5 ml x 5 支，无染料A126-10 0.5 ml x 10 支，无染料货号：A126-10保存：-20运输：28
