1. 目的 建立六味地黄丸检验操作规程2．范围 本规程适用于六味地黄丸的全项检验3．责任 QC检验员、QC主管、QA主管4．标准 《六味地黄丸质量标准》5．内容 5.1 性状 本品为棕黑色的水蜜丸、棕褐色至黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味甜而酸 5.2 鉴别5.2.1取本品，置显微镜下观察：淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24～ 40μm,脐点短缝状或人字状（山药）不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色， 直径4～6μm（茯苓）薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（熟地黄）草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中，有时数个排列成行（牡丹皮）果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形， 垂周壁连珠状增厚（酒萸肉）薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化有稀疏细孔沟（泽泻）5.2.2取本品水蜜丸6g，研细，或取小蜜丸或大蜜丸9g，剪碎，加硅藻土4g，研匀 加乙醚40ml，低温回流1 小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml 使溶解，作为供试品溶液另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上， 以环己烷－乙酸乙酯(3:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性 5％三氯化铁 乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同的蓝褐色斑点 5.2.3取本品水蜜丸6g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸9g,剪碎，加硅藻土4g，研匀加乙酸子40ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液，另取泽泻对照药材0.5g,加乙酸乙酯40ml，同法制成对照药材溶液照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各1 ～10μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸 (12：7：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 5.3 含量测定5.3.1 酒萸肉 照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定5.3.1.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液（1：4：8：87）为流动相；检测波长为36nm；柱温为40℃.理论板数按马钱苷峰计算应不低于40005.3.1.2对照品溶液的制备 取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得5.3.1.3供试品溶液的制备 取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取约0.7g，精密称定，或取重量差异项下的大蜜，剪碎，取约1g，精密称定。
置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250w,频率33kHZ）15分钟使溶散，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得5.3.1.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得5.3.1.5本品含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)计，水蜜丸每1g不得少于0.41mg；小蜜丸每1g不得少于0.30mg；大蜜丸每丸不得少于0.90mg 5.3.2牡丹皮 取水蜜丸、小蜜丸5g，精密称定，或取重量差异项下的大 蜜丸2g，精密称定用水蒸气蒸镏，收集馏出液约450ml，置500ml 量瓶中，加水稀释至 刻度照分光光度法（附录Ⅴ A），在274nm 波长处测定吸收度，按丹皮酚(C9H10O3)的 吸收系数（Ｅ1% 1cm）为862计算，即得 本品含牡丹皮按丹皮酚（C9H10O3）计，大蜜丸每丸不得少于6.3mg 5.3.3山茱萸 5.3.3.1本品含山茱萸以熊果酸（C30H48O3）计，大蜜丸每丸不得少于1.17mg 5.4 检查 应符合丸剂项下有关的各项规定（附录Ⅰ A ）5.4.1重量差异：操作方法见重量差异检查法。
5.4.2水分：操作方法见水分测定法5.4.3微生物限度：操作方法见微生物限度检查法5.5 检验依据： 中国药典2010年版一部597页。