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1、植物显微技术 计划学时：48 讲课16 实验32 主要参考书： 1.王灶安主编植物显微技术 2.曾小鲁主编实用生物学制片技术 3.郑国錩主编生物显微技术 4.黄承芬，杜桂森编著生物显微制片技术 5.郑若玄编著实用细胞学技术 6. 李和平主编植物显微技术,内容简介 植物制片的方法及准备工作 石蜡法制作原理与方法 其他制片方法 植物显微化学制片 半薄切片和超薄切片 显微镜的主要光学部件及性能 各类显微镜简介 几种显微技术的应用 显微摄影技术,研究论文题目： 几种常绿植物（海桐、洋玉兰、冬青卫矛、桂花、黄杨等）叶片解剖结构研究 几种药用植物（地黄、黄精、丹参、乌头、麦冬等）肉质根解剖结构特征 及其增
2、粗生长机理研究 变态器官萝卜、胡萝卜、生姜、莲藕等解剖结构研究 松属植物（雪松、白皮松、油松、华山松等）表皮特征及叶片解剖结构研究 蔷薇科李属植物（日本樱花、晚樱、红叶李、碧桃）腺体结构特征研究,第一章 植物制片的方法及准备工作 植物制片的方法 切片法 用切片刀或刀片将各种组织切成薄片制成玻片标本的方法。 1.徒手切片法 2.石蜡切片法 （切片厚度8-10m） 3.火棉胶切片法 4.冰冻切片法 5. 滑走切片法 6.半薄切片法（切片厚度1-2m） 7.超薄切片法（切片厚度50-60nm）,非切片法 将小形植物体或较大植物体的一部分或其组织，不用刀切成薄片而制成玻片标本的方法。 1.整体装片法
3、2.涂片法 3.压片法 4.平铺法 5.离析法 6.扫描电镜样品制备,制片前的准备工作 制片用的主要设备 1、显微镜,2、石蜡包埋工具 恒温箱 用于浸蜡、烤片及染色加温等。 包埋箱(熔蜡箱) 用于浸蜡、包埋。温度调节在60。 3、切片工具 旋转切片机 滑走切片机 冰冻切片机 超薄切片机,1、旋转切片机,2、滑走切片机,2、滑走切片机,4、冰冻切片机,5、超薄切片机,6、切片刀及其附件,7、自动磨刀机,8、染色工具 染色缸,立式染色缸,卧式染色缸,染色皿,9、载玻片和盖玻片 载玻片的规格 7626mm，厚度：11.2 mm。 盖玻片的规格 方形：1818 mm，2020mm，2222mm，242
4、4mm。 长盖玻片: 5024 mm或60 24mm。 厚度：0.130.17mm。,盖玻片规格,小型真空泵,10、真空泵 用于抽出材料中的气体。,11、电热温台,常用溶液的配制 各级酒精浓度的配制,低浓度溶液的配制 1%番红水溶液的配制：1g番红溶于100 ml蒸馏水中。 0.1%固绿酒精溶液的配制：0.1g固绿溶于100 ml95%的酒精溶液中。,第二章 石蜡法制片原理与方法 材料的选择、采集与分割 取样前应注意的问题 1.研究正常结构时，应选择健全而具有代表性的部位取材；采取病理材料时，除取其病变的部位外，还应从病变的中央部分向四周，连同正常组织一起采取，以利观察分析。 2.采取标本前，
5、要根据制片的要求，选择并配制固定液，取材后应立即投入固定液，以防组织自溶和腐败。,3.切取材料时，刀必须锐利，动作要快但要仔细，切割时切勿拉锯式的来回切取，镊取时须轻夹轻放，尽量不损伤材料。 4.材料尽可能新鲜，并切成所需的大小。这样有利于固定液的透入。 5取材时要详细记录日期、采集地点、标本名称、时期、取材部位、断面和固定液等。,样品采集与分割 1、叶,取样部位,取样部位,玉米叶,2、根,主根,侧根,不定根,一级侧根,二级侧根,根尖分区,根的初生构造,有丝分裂、核型分析,3、茎,4、花,花药的发育,孢原细胞,胚囊的发育,单核胚囊,第一次有丝分裂,二核胚囊,第二次有丝分裂,四核胚囊,八核胚囊,
6、植物材料的分割,材料的固定 固定的目的和作用 1.防止组织自溶和腐败 2.使细胞内的蛋白质、糖、脂肪等各种成分沉淀保存下来，从而保存细胞的各种组成成分、形态和结构。 3.使细胞内不同的成分产生不同的折光率造成光学上的差异，使原来在生活情况下看不清楚的结构变得清晰易见。 4.有的固定剂有助染作用(如醋酸、苦味酸)，从而使细胞各部分易于染色； 5.固定剂还兼有硬化作用，使柔软组织硬化而不易变形，有利于操作。,固定液的选择 选择固定液时，必须符合下列条件： 1.能迅速杀死细胞，使细胞内的成分凝固或沉淀，从而使细胞的形态、结构和成分不发生变化。 2.必须具有快的渗透速度，使组织内、外迅速固定。 3.对组织细胞尽可能不发生收缩或膨胀现象，以及不产生人为的产物。 4.能增加细胞内各结构的折光率，易于鉴别。 5.能使组织变硬，适于切片，但又不致使材料变得太硬而松脆。 6.是良好的保存剂，便于材料的保存。,固定时的注意事项 1.固定的材料越新鲜越好。 2.材料与固定液的比例以1：20为准。 3.根据材料的性质和制片的目的选择固定液，固定液一般是以临用前配制的为好。 4.所固定的植物材料，若表面有毛茸或其它不易穿透的物质，则可用含有酒精的固定液固定，如Carnoy液。 5.含有气泡的材料投入固定液后，材料不会下沉，必须将气泡抽出，使材料下沉。,
