维生素B12注射液的定性鉴定及含量的测定,实验目的,了解紫外可见分光光度计的构造及正确使用方法 掌握吸收曲线的绘制方法 掌握紫外可见分光光度法对物质的定性鉴定和含量测定实验原理,紫外分光光度法仍然是基于LambertBeer定律 A = kcb 其中k为吸光系数在条件改变时，吸光系数k可以用摩尔吸光系数或比吸光系数 所代替实验原理,维生素B12是含有Co的有机化合物，为深红色结晶或结晶性粉末其注射液在2781nm、3611nm、5501nm波长处有最大吸收实验原理,通过对最大吸收峰处吸光度比值的计算，可对其进行实性鉴定中华人民共和国药典2000版规定维生素B12的定性鉴定标准为：,实验原理,维生素B12注射液含量测定是依据标准维生素B12的 即为本试样稀释液1L中含维生素B12多少克 将此值乘以稀释倍数，即得1L原注射液含维生素B12多少克（g/L）实验步骤,1. 参看紫外可见分光光度计仪器简介和使用操作部分，熟悉其性能和操作方法接通电源，打开仪器，预热20min实验步骤,2. 按药典方法，取维生素B12注射液1支（1mL），倒入25mL容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，充分混匀，置于1cm石英吸收池中以蒸馏水作参比溶液，在波长230nm580nm的范围内，每间隔20nm测定一次吸光度，在最大吸收峰278nm、361nm、550nm附近，每间隔2nm测量一次，然后绘制A吸收曲线图，确定最大吸收峰位置，并计算吸光度之比值，进行定性鉴定。
实验步骤,3. 依据在361nm处测得的吸光度值，计算试样中维生素B12的质量浓度思考题,1. 紫外可见分光光度计测定维生素B12含量及定性鉴定的原理是什么？ 2. 称取0.0500g维生素C，溶于0.01mol/L H2SO4溶液中，然后转移至100mL容量瓶中，稀释至刻度吸取该溶液2.00mL，准确稀释至100.0mL取此溶液在1cm厚的吸收池中用245nm波长的单色光测其吸光度为0.551，试求维生素C的质量分数已知 (245nm)标= 560。