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1、“畜牧微生物学”实验2009-2010-1华中农业大学 动物科技学院动物医学院,要 求:,1、遵守作息时间,2、认真听讲,3、严格按要领操作,4、爱护仪器设备,5、讲究卫生,实验一:显微镜油镜的使用、细菌的形态观察、细菌的抹片制备及染色(4学时)实验二:培养基的制备(4学时)实验三:细菌的分离培养及移植(3学时)实验四:细菌的生长表现及生化反应(3学时)实验五:真菌的制片及形态观察(2学时)大实习:鲜乳的微生物学检验(5天),实验内容,实验报告:将所做的5个实验有机的结合起来,自己设计写出一份总报告(包括内容、目的、材料和器具、方法、步骤、结果等)。,友情提示:,实验一显微镜油镜的使用、细菌的
2、形态观察、细菌的抹片制备及染色,一、显微镜油镜的使用方法1. 油镜的识别2. 调节光源3. 聚焦(香柏油,先靠拢后分开)4. 油镜观察完毕后要“三擦”,1. 油镜的识别,2. 调节光源: 集光器(聚光器)升至最高光圈打至最大,3. 聚焦(香柏油,先靠拢后分开),人眼的分辨能力在0.2 mm左右,因此光学显微镜的最大有效放大倍数(使用油镜)是1,000到1,500。,很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的光线可以进入物镜,使照明亮度提高,改善观察效果。,浸没油与玻璃的折射率相近,4. 油镜观察完毕后要“三擦”首先用擦镜纸擦掉油镜头上的香柏油;用擦镜纸蘸取少许二甲苯拭去油镜头上的油渍再用
3、擦镜纸拭净镜头上的二甲苯。,二、光学显微镜下细菌形态和特殊结构的观察,葡萄球菌,链球菌,大肠杆菌,炭疽杆菌(荚膜),荚膜(capsule),芽胞(endospore),苏云金杆菌(芽胞),1. 玻片的准备2. 抹片3. 干燥4. 固定,细菌抹片(smear)的制备,1. 草酸铵结晶紫染色2. 革兰氏碘液助染3. 95乙醇脱色4. 碱性复红复染,C.Gram(革兰)于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。,革兰氏染色法(Gram stain ),Procedures of Gram Staining,染色缸,消毒缸,1-2min,1-3min,30s-1min,10s-30s,Gram Stain,Gram Positive,Gram Negative,(大肠杆菌),(链球菌),