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1、2011 高考生物备考：必考知识点汇编（13）选修 3 现代生物科技专题知识点专题 1 基因工程一知识网络概念：又叫 DNA 重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品来源：主要从原核生物分离纯化限制性核酸内切酶（限制酶） 作用：识别双链 DNA 中某种特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开结果：产生黏性末端或平末端基 来源：大肠杆菌本 作用 ：连接黏性末端 工 来源：T 4 噬菌体具 作用：可连接两种末端 常用载体：质粒 能在受体细胞中复制并稳定保存基因进入受体细胞的载体 必
2、备条件 具有一至多个限制酶切点（“分子运输车” ） 具有标记基因 其他载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞EcoliDNA 连接酶T4 DNA 连接酶（“分子手术刀” ）DNA 连接酶“分子缝合针”基因工程工具目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用组成：目的基因 + 启动子 + 终止子 + 标记基因将目的基因导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法将目的基因导入动物细胞：显微注射法Ca2+ 含重组 DNA 分将目的基因导入微生物细胞：受体细胞 感受态 子的缓冲液 感受态细胞吸细胞 收
3、 DNA 分子目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因从基文库中获取目的基因方法 利用 PCR 技术扩增目的基因用化学方法直接人工合成基因组文库部分基因文库（cDNA 文库）基因工程的操作程序目的基因的检测与鉴定基因工程应用基因工程操作中的几个问题DNA 连接酶、DNA 聚合酶等的理解检测转基因生物的染色体 DNA 是否插入了目的基因（DNA 分子杂交法）检测目的基因是否转录出了 mRNA（分子杂交法）检测目的基因是否翻译成蛋白质（抗原抗体杂交法）抗虫转基因植物减轻农药对环境的污染植物基因工程 抗病转基因植物抗逆转基因植物利用转基因改良植物的品质把正常基因导入体内，使该基因表达产物发挥作用基因治疗
4、 体外基因治疗方法 体内基因治疗提高动物生长速度改善畜产品的品质动物基因工程 用转基因动物生产药物用转基因动物作器官移植的供体基因工程药品的生产蛋白质工程与基因工程比较项目 蛋白质工程 基因工程过程 预期蛋白质功能设计蛋白质结构推测氨基酸序列推测脱氧核苷酸序列合成 DNA表达出蛋白质获取目的基因构建表达载体导入受体细胞目的基因的检测与鉴定实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向地改造生物的遗传性状，以获得人类所需的生物类型或生物产品（基因的异体表达）区别结果 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或
5、制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现如果有一亲代 DNA 上某个碱基发生突变，一定会使其子代的性状发生改变吗？体细胞中某基因发生改变，生殖细胞中不一定出现该基因；DNA 上某个碱基对发生改变，它不一定位于基因的中能编码氨基酸的部位；若为父方细胞质内的 DNA 上某个碱基对发生改变，则受精后一般不会传给子代；若该亲代 DNA 上某个碱基对发生改变产生的是一个隐性基因，并将该隐性基因传给子代，而子代为杂合子，则隐性性状不会表现出来；根据密码子的兼并性，有可能翻译出相同的氨基酸；性状表现是遗传基因和环境因素共同作用的结果，在某些环境条件下，改变了的基因可能并不会在性状上表现出来。思考：真核生物的基因导入细菌细胞后，不能正常发挥功效的可能原因有哪些？被细菌体内的限制性内切酶破坏。该基因指导合成的蛋白质不能在细菌体内正确修饰和表达。细菌的 RNA 聚合酶不能识别真核基因的位点，致使不能启动转录。细菌细胞中没有切除内含子转录部分的酶。
