实验一光学显微镜的构造使用和临时装片制作参考PPT

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1、1,实验一 光学显微镜的构造、使用和临时装片制作,一目的与要求 1 了解显微镜的构造,学会正确使用和维护显微镜。 2 学习临时装片的制作和生物绘图的基本方法。,2,二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、 纱布、载玻片、盖玻片 I2KI溶液、蒸馏水 洋葱,3,三 内容与方法 (一)显微镜的构造 1 机械部分: (1)镜座: (2)镜柱: (3)镜臂: (4)镜筒: (5)载物台: (6)粗、细调节螺旋: (7)聚光器调节螺旋:,4,2 光学部分: (1)目镜: (2)物镜: (3)聚光器 (4)虹彩光圈 (5)反光镜或内光源照明系统,5,镜座,镜柱,镜臂,镜筒,载物台,物

2、镜转换器,粗调焦螺旋,微调焦螺旋,目镜,物镜,聚光器,光源,虹彩光圈,6,(二)显微镜的使用方法 1 取、放显微镜: 2 对光: 3 放置标本与调节: 4 低倍镜的使用: 5 高倍镜的使用: 6 用毕复原和存放:,7,(三)显微镜的维护与注意事项 1 规范、正确地操作,自觉保养显微镜。 2 不要用手触摸显微镜地光学镜面,不要擅自拆卸显微镜。 3 观察新的玻片标本必须先用低倍镜,再用高倍镜。 4 上升载物台时,注意物镜镜头不要接触盖玻片。,8,(四)临时装片的制作 1 清洗和擦净载玻片和盖玻片 2 取材与材料放置:在洋葱内表皮划一“井”字,约23mm,用镊子从一角取下,在载玻片中央滴一滴蒸馏水(

3、或染液),放入材料。 3 盖盖玻片:用镊子夹住盖玻片从一侧接触蒸馏水,然后缓慢放下。 4 吸去多余的水分或染液,特别是盖玻片上的,也可在此时在一侧滴加染液。 5 镜检观察。,9,洋葱鳞叶下表皮细胞,观察与思考: 1 在你的制片中是否每个细胞都具有细胞核?为什么? 2 你如何解释不同细胞中细胞核在形态和位置上的差异? 3 你能看见细胞核中的核仁吗?一般有几个?,10,(五)植物绘图方法,1 生物绘图的要求: 科学性、真实感、精细而美观、文字标注清晰。 2 生物绘图的基本步骤: 构图:位置、结构特点、大小、比例等 勾画轮廓 用清晰的线条和圆点完成全图 文字标注:引线、结构名称、图的名称 特别注意:

4、必须使用铅笔进行绘图和文字标注,11,四 实验作业,进行第一次植物学实验的感想 绘图:洋葱鳞叶几个表皮细胞, 示植物细胞的基本结构,12,13,液泡,14,实验二 植物细胞基本结构的观察,一 目的与要求1 观察掌握植物细胞的显微结构,了解植物细胞形态多样性的特征。2 练习制作植物临时装片,提高显微镜的使用技术。,15,二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、载玻片、盖玻片 I2KI溶液、苏丹、蒸馏水 油菜、菠菜、苹果、西红柿、大葱、红辣椒、马铃薯、花生、紫鸭跖草、柿胚乳永久装片、枣胚乳装片,16,三 实验内容与方法 (一)植物细胞的基本形态 取油菜或菠菜叶下表皮、苹

5、果果肉制作临时装片,观察细胞形态。,17,(二)质体 1 叶绿体:取油菜叶下表皮、菠菜叶下表皮或紫鸭跖草下表皮制作临时装片观察保卫细胞中的叶绿体。 2 有色体:取红辣椒果肉或番茄果肉细胞制作临时装片观察。 3 白色体:取大葱叶鞘表皮细胞制作临时装片观察。,18,(三)初生纹孔场 取一小块红辣椒,用镊子固定一侧,用刀片将果肉刮去,直到半透明,观察表皮细胞的初生纹孔场。 (三)胞间连丝 观察柿胚乳永久装片或枣胚乳装片。 (四)后含物 取马铃薯块茎汁液少许制作临时装片,可用稀碘液染色。 取花生子叶薄片,置载玻片中央,加1滴苏丹染液染色10分钟,盖片后观察。,19,三 实验作业 1 绘制你所观察到的表

6、皮细胞和气孔。 2 绘制你所观察到的有色体。 3 绘制你所观察到的初生纹孔场。 4 绘制你所观察到的胞间连丝。,20,实验三 顶端分生组织和植物细胞的有丝分裂,一 目的与要求1 观察掌握顶端分生组织的细胞特征,了解其生理功能及在植物体上的分布位置。2 学会根尖压片技术,观察植物细胞有丝分裂全过程。,21,二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、载玻片、盖玻片 固定离析液(95酒精:浓HCL1:1)、番红、中性红、亚甲基蓝染液 大蒜、洋葱、洋葱根尖纵切片、玉米根尖纵切片、黑藻茎尖纵切片,22,三 内容与方法 (一)顶端分生组织 观察洋葱根尖纵切片、玉米根尖纵切片和黑藻

7、茎尖纵切片,先在低倍镜下观察再用高倍镜观察。 (二)有丝分裂 1 幼根的培养:前3、4天洋葱、大蒜鳞茎诱导生根或用植物种子萌发生根。 2 取材和固定离析:切取根尖35mm迅速投入固定离析液中(95酒精:浓HCL1:1)510分钟。,23,3 材料漂洗和染色:将固定离析好的材料用清水漂洗35次,取1个置载玻片上染色2分钟。 4 压片:用镊子尖轻轻捣碎材料,盖片,用镊子背轻轻垂直敲盖玻片,再覆上一层吸水纸,用双手拇指垂直下压盖玻片。 5 镜检:观察植物细胞有丝分裂全过程。 四 实验作业 绘制你所观察到的有丝分裂间期、前期、中期、后期、末期的细胞。,24,实验四 植物的各类组织,一 实验目的 1 观

8、察掌握植物组织的基本结构和细胞特征,了解其生理功能和在植物体上的分布特点。 2 学会和练习徒手切片法,25,二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、载玻片、盖玻片 I2KI溶液、氯化锌碘染色、盐酸间苯三酚染色、蒸馏水 马铃薯、胡萝卜芹菜、梨、玉米根尖纵切片、黑藻茎尖纵切片、椴数三年茎横切片、蚕豆叶下表皮装片、小麦叶下表皮装片、天竺葵叶下表皮装片、女贞叶横切片、眼子菜叶横切片、梨果肉石细胞装片、桑树皮离析切片、南瓜茎纵切片、苋茎纵切片、松木离析装片、柑桔果皮切片、松木质茎横切片,26,三 实验内容与方法 (一)分生组织 1 顶端分生组织:观察玉米根尖纵切片和黑藻茎尖纵

9、切片 2 侧生分生组织:观察椴数三年茎横切片 (二)保护组织 1 表皮:观察蚕豆叶下表皮装片、小麦叶下表皮装片、天竺葵叶下表皮装片。 2 周皮:观察椴树三年生茎横切片。,27,(三)薄壁组织 1 同化组织:观察女贞叶横切片 2 贮藏组织:取马铃薯或胡萝卜制作徒手切片。用小刀切取马铃薯或胡萝卜底面积为3535mm2的长条,将材料和刀片用水蘸湿,用拇指、食指、中指拿材料,右手平拿刀片,右手手臂用力迅速切,切完选薄而透明的小片,制作临时装片观察。 3 通气组织:观察眼子菜叶横切片,28,(四)机械组织 1 厚角组织:用芹菜叶制作徒手切片,用氯化锌碘染色。 2 厚壁组织:取梨果肉制作临时装片观察。用盐

10、酸间苯三酚染色(先滴加10盐酸过35分钟再加10间苯三酚)。观察梨果肉石细胞装片、观察桑树皮离析切片(纤维),29,(五)输导组织 观察南瓜茎纵切片(双韧维管束、中空)、苋茎纵切片(外韧维管束)看导管、筛管;观察松木离析装片看管胞。 (六)分泌组织 观察柑桔果皮切片(溶生型)、松木质茎横切片(裂生型),30,四 实验作业 1 绘制你所观察到的贮藏组织。 2 绘制你所观察到的厚角组织。 3 绘制你所观察到的厚壁组织。 4 绘制你所观察到的23个导管分子。,31,实验五 植物种子活力的检定,一 实验目的 掌握植物种子活力检定的基本原理及TTC法和红墨水法快速测定种子活力的方法,奠定种子活力检定方法

11、在农业生产实际中的应用基础。,32,二 实验原理 凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生命活力的种胚则无此反应。当氯化三苯基四氮唑(TTC)渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时,便由无色的TTC变为红色的三苯基甲腙(TTF)。,33,有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨水中的酸性大红G不能进入细胞内,胚部不着色。而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染料进入细胞内是胚部染色,所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。,34,三 实验仪器、试剂和材料 恒温箱

12、、培养皿、刀片、烧杯、镊子、恒温箱、电炉。 0.5%TTC溶液、5% 红墨水 玉米、小麦等种子,35,三 实验步骤和方法 (一)TTC法 1 浸种:将待测种子在3035温水中浸种(大麦、小麦、籼谷68小时,玉米5小时左右,粳谷2小时),以增强种胚的呼吸强度,使显色迅速。 2 显色:取吸胀的种子200粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为二半,将其中的一半置于2只培养皿中,每皿100个半粒,加入适量的0.5%TTC,以覆盖种子为度。然后置于30恒温箱中0.51小时。观察结果,凡胚被染为红色的是活种子。,36,3 将另一半在沸水中煮5分钟杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察。 4 计算活种子的百分率。

13、(二)红墨水染色法 1 浸种 将待测种子在 30 35 温水中浸种(大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右),以增强种胚的呼吸作用。,37,2 染色 取已吸胀的种子 200 粒,沿胚的中线切为两半,将一半置于培养皿中,加入 5% 红墨水(以淹没种子为度),染色 10 15 min (温度高时间可短些)。 3 观察 染色后倒去红墨水,用水冲洗多次,至冲洗液无色为止。检查种子死活,凡种胚不着色或着色很浅的为活种子;凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。可用沸水或酒精杀死的种子作对照观察。 4 计算活种子的百分率。,38,五 实验作业 1 计算活种子的百分率。,39,实验六 根的形态结构与观察,一

14、实验目的 1 观察掌握根的初生结构和次生结构及其特点。 2 观察侧根的发生与形成,了解根瘤的形态与结构。,40,二 实验仪器和材料 显微镜 玉米根尖纵切片、洋葱根尖纵切片、毛茛根横切片、水稻幼根横切片、鸢尾根横切片、蚕豆老根横切片、棉花老根横切片、栎根横切片、蚕豆侧根纵切片、蚕豆侧根横切片、大豆根瘤切片、兰花菌根切片,41,三 实验内容和方法 (一)根尖的外形与结构 观察玉米或洋葱根尖纵切片,注意区分根尖的各区及各区细胞的特点。 (二)根的初生结构 1 双子叶植物根的初生结构:观察毛茛根横切片,区分表皮、皮层和维管柱,重点观察内皮层、初生木质部、初生韧皮部的结构,区分出原生木质部、后生木质部。

15、 2 单子叶植物根的初生结构:观察水稻幼根横切片、鸢尾根横切片,区分表皮、皮层和维管柱,重点观察内皮层、初生木质部、初生韧皮部的结构。,42,(三)根的次生结构 观察蚕豆老根横切片、棉花老根横切片、栎根横切片,注意区分次生木质部、次生韧皮部、维管形成层和周皮的结构。 (四)侧根 观察蚕豆侧根纵、横切片,注意侧根起源的部位及过程。 (五)根瘤与菌根 观察大豆根瘤切片、兰花菌根切片,注意观察根瘤、根的形成及结构特征。,43,四 实验作业 1 绘制你所观察的玉米或洋葱根尖纵切面。 2 绘制你所观察毛茛根横切面。 3 绘制你所观察的棉花老根或栎根横切面。,44,实验七 茎的形态结构及其发育,一 实验目

16、的 1 观察茎的初生结构和次生结构,掌握茎的结构及其发育规律。 2 观察了解维管形成层和木材三各切面及树皮的细胞结构。,45,二 实验仪器和材料 显微镜 黑藻茎尖的纵切片、桃芽纵切片、苹果芽纵切片、棉花幼茎横切片、南瓜幼茎横切片、向日葵(示教)幼茎横切片、玉米茎横切片、小麦茎横切片、水稻茎横切片、毛竹茎节间横切片、椴树茎一年生横切片、多年生横切片,杨树茎一年生横切片,棉花茎次生生长切片,接骨木皮孔(树皮)切片、松茎一年生横切片、多年生横切片、银杏茎横切片,46,三 实验内容与方法 (一)茎尖的结构 1 枝芽:观察黑藻茎尖的纵切片,注意区分生长锥、叶原基、幼叶等。 2 花芽:观察桃芽、苹果芽纵切片,注意区分花芽、枝芽及花芽的结构特征。,47,(二)茎的初生结构 1 双子叶植物茎的初生结构:观察棉花、南瓜、向日葵(示教)幼茎横切片,区分出表皮、皮层、维管束、髓、髓射线,重点观察维管束的分布和结构特征,区分出初生木质部、初生韧皮部、束中形成层。 2 单子叶植物茎的初生结构:观察

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