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1、精品文档就在这里-各类专业好文档，值得你下载，教育，管理，论文，制度，方案手册，应有尽有-药物分析检验 中药显微数量分析方法概述 生技082邵丽2008054028中药显微数量分析方法概述摘要：中药显微数量分析方法是在对不同中药类群显微组织比较鉴别实践中，不断探索和总结出的一种用于中药显微鉴别的新方法。这种方法弥补了中药显微鉴定方法的不足，并扩展其应用范围。中药显微数量分析方法是应用生物统计学方法，进行中药材、饮片、中药粉末制剂的纤维组织、细胞及其后含物比较研究。主要用于分析中药不同基源、不同产地、野生品与栽培品、生品于炮制品显微组织、细胞及其后含物的差异，寻找其鉴别特征。关键词：中药显微数量
2、分析；中药显微鉴定 ；生物统计学；显微计量Abstract: The number of microscopic analysis of traditional Chinese medicine in Chinese medicine for different groups to identify the microstructure more practice, continue to explore and sum up for a new method for microscopic identification of Chinese medicine. This method of
3、traditional Chinese medicine to make up for the lack of microscopic identification methods, and expand its scope of application. Chinese medicine is the application of numerical analysis of microscopic biological statistical methods for Chinese herbal medicines, Herbal Medicine, Chinese medicine pow
4、der formulations of fibrous tissue, containing cells and the subsequent comparative study of material. The main base for the analysis of traditional Chinese medicine different sources, different areas, wild and cultivated materials goods, raw materials for processed products microstructure, containi
5、ng material of cells and subsequent differentiation to find the differential characteristics.Keywords: quantitative analysis of micro-medicine; medicine microscopic identification; biostatistics; microscopic measurement在中药显微鉴定研究中，会遇到一些需要比较显微特征大小和多少差异的情况，特别是当前对中药道地药材的研究、栽培品与野生品、炮制品与生品的比较研究，常常是对同一物种的显
6、微结构的比较研究，然而，这正是中药显微鉴定方法的弱点。在工作实践中，在显微鉴定方法的基础上，借鉴了生物统计学方法和理念，增加了显微计量、实验设计和试验分析等内容，使中药显微鉴定方法得到补充及应用范围的扩展。作者给了这种方法一个新的名称：中药显微数量分析方法，表示区别。1 中药显微鉴定方法的意义与缺陷中药显微鉴定是中药鉴定中主要方法之一，是用显微镜观中药的组织构造、细胞形态及内含物，鉴定中药的真伪优劣的方法。从中药显微鉴定方法建立以来，其研究内容从中药正伪品鉴别研究，发展到对中药物种资源(同属不同物种)的鉴别研究；对中药粉末鉴定、中成药显微鉴定及定量研究也得到了极大的发展2】，为中药资源扩展、中
7、成药检验和质量保证起了重要作用。随着对中药研究的深入，中药鉴别研究的范围涉及到不同产地、野生品与栽培品、生品与炮制品显微差异比较，原有的中药显微鉴定法的不足显现出来，如对细胞组织的定性描述明确(有与没有)，对定量描述模糊(大小、多少)；实验样品代表性不够，虽然，在“八五”期间对中药品种的整理和质量研究中，强调药材市场调查，强调样品数量和代表性。2 中药显微数量分析方法的含义与原理中药显微数量分析方法是应用生物统计学方法，进行中药材、饮片、中药粉末制剂的显微组织、细胞及其后含物比较研究。主要用于分析中药不同基源、不同产地、野生品与栽培品、生品与炮制品显微组织、细胞及其后含物的差异，寻找鉴别特征。
8、中药显微数量分析法所以加入生物统计学内容，是为了能够以有代表性的样本，推断不同类群中药(物种、产地、野生品或栽培品、生品或炮制品)的显微鉴别特征。防止12份样品的实验结果的误差，克服以往中药显微鉴定实验结果的模糊性。在中药显微数量分析方法中，体现的定量和生统计学的概念主要有以下几点刁J：根据中药组织结构的差异性与相似性，寻找中药不同类群(物种、产地、野生品或栽培品、生品或炮制品)的差异和鉴别特征。中药的主要来源为生物(动物、植物)，因此存在生物现象的基本特征，变异性、不确定性和复杂性。任何两个生物之间或多或少的存在差异，造成生物的差异的因素有遗传方面的，也有环境方面的。同理，不同类群的中药的显
9、微组织、细胞，也表现出其差异性与相似性。一些中药的类群常常来源于同一物种，由于不同的生长地域、生长方式(野生或栽培)、种植方式和加工方法，表现出形态(宏观和微观)和药效的不同。比如，生长在湿润遮荫环境中的植物细胞会大些，而生长在干旱、阳光充足环境中的植物细胞会小些；对不同产地丹参根的横切面观察时，发现有的产地丹参韧皮部散有石细胞，有的产地的却没有；炮制过的天南星细胞中含有的草酸钙针晶形态发生改变、数量减少等等。利用中药的这种特性，可以寻找不同类群中药材的显微鉴别特征。中药显微数量分析法采用中药组织结构的描述与计量分析。对中药显微形态结构有质和量的描述是显微鉴别的常规实验方法，如对中药材横切面的
10、组织结构的描述、对其纤维、石细胞、导管、草酸钙结晶等细胞和后含物的形态和大小的描述。但是，中药显微形态结构质和量的描述带有模糊性，常常有较大、较小、较多、较少等描述词语；在一些比较对象(细胞、后含物)的大小数值交叉的情况下，很难描述其差异。当中药基源为同属不同物种、同物种不同产地、野生品与栽培品、生品与炮制品显微特征描述，更是难于解决的问题。为弥补中药组织结构描述的缺陷，中药显微数量分析法通过对一定数量的样本数据资料进行分析，以判别中药不同类群显微特征的差异，确定鉴别标准。中药显微数量分析法应用显微计量(或称显微定量)分析表现为：首先在实验设计时考虑样品的代表性，尽可能得到要研究类群中有代表性
11、的样本，又能节省试验成本。通常要考虑物种的分布和产地，样品常取自多个产地，单一产地的样本通常是多个个体，一般不少于510个个体，理想的个体数应不少于30个。其次，考虑实验过程的平行操作，如粉末显微计量制片中注重每个制片的样品量、封片溶液用量的定量。再次，对中药显微组织结构的实验结果进行统计学分析，对比较对象(细胞、后含物等)的差异进行评价。中药显微组织结构比较研究中，强调进行试验设计和统计分析。中药显微数量分析法进行试验设计的目的在于减少试验误差，提高试验的准确度和精确度，使试验结果正确可靠。中药品微数量分析法的试验设计与一般生物学试验设计基本要求类同，首先明确试验目的，选择有代表性的试验条件
12、，使试验结果日靠、能够重演。显微数量分析方法，按照统计学的方法进行试验方案的制定，数据资料的搜集和整理、数据特征的度量、统计判断、方差分析、回归和相关分析等。显微数量分析方法是在实际研究工作不断总结的，采用数据分析方法可根据要解决的问题选择。3 中药显微数量分析方法的基本操作31取样首先明确需要研究问题的目的，确定研究的对象，确定取样方法和取样的量。显微数量分析方法的目的是力图对中药某一类群的总体特征，不同类群间的差异做出推断，但是由于这个类群往往是很大的，而且通常是无限的、动态的和假想的，所以不可能收集到总体中每个个体的数据资料，通常是从类群中按一定方法抽取部分具有代表性个体，即样本。在实验
13、前做好取样设计，尽可能得到要研究的类群中有最好的代表性的样本，又最大限度的节省成本。在统计学中的抽样方法有多种，显微数量分析方法取样方法常常是分层抽样，结合典型抽样。比如，选取不同产地、栽培品与野生品、生品与炮制品样本等。样本量根据显微实验的具体情况，尽可能有代表性，又能省时省力。在中药显微数晕分析实验中，通常要考虑物种的分布和产地，样品多取自多个产地，比如黄芩野生品与栽培品显微特征比较，黄芩的野生品与栽培品各取lO个产地样品，其中包括道地产地和主产地样品。单一产地的样本通常是多个，一般不少于510个个体，大样本量也是可以考虑的。32制片样品横切面或粉末制片一般参照药典中药材切片方法和粉末制片
14、方法制作。样品粉末显微计量样品制片：注重每制片平行操作。比如，野生与栽培芍药显微数量分析研究中悼1，每份样品由5个以上个体混合粉碎，过200目筛，称取样品500 mg，加10 mL冰醋酸一甘油一水(1：1：1)液，充分混匀，取混悬液01 mL置载玻片上，用22 mm22 mm盖玻片封片。不同的中药品种或不同的研究项目，可根据具体实验样品的性质和需求，设计取样量、溶剂和溶剂用量，以及盖玻片大小。需要注意的是，由于药材粉末样品粒度不均匀，制备液也是不均匀的混悬液，以及各种组织、后含物比重不同，样品的均匀性不易控制。33显微观察、寻找研究的显微特征用光学显微镜对显微制片进行初步观察，必要时采用扫描电
15、镜观察，选择有鉴别意义的显微特征，如纤维、石细胞、淀粉粒、草酸钙结晶等，它们在不同类群中应该表现出差异。显微测量、计量显微测量方法是在光学显微镜下，用显微测微尺测量每个显微特征，如纤维、石细胞等的长度、直径等数值，每个显微特征测量要不少于20个数值。计算最大值、最小值和平均值。显微特征计量方法：比如，野生与栽培芍药显微数量分析研究中【8】，将每个样品制片平分9为个区域，分别在各区域光学显微镜下，用网格测微尺统计一个观测视野中显微组织特征，如淀粉粒、草酸钙簇晶等的数量，合并数据，计算单位面积的数量；每样品观测5张制片，统计平均值、标准差。34数据处理显微数量分析方法主要是分析不同类群的差异，常用的数据分析方法有一检验，方差分析等。比如，栽培黄芩与野生黄芩粉末显微特征比较研究中【9 J，对显微镜观察到两者有区别的主要显微特征韧皮纤维、石细胞、导管进行显微测量，对栽培组样品与野生组样品的测量数据的平均值进行一检验，结果表明：韧皮纤维直径、石细胞的长径和短径两者有显著性差异(P005)，而韧皮纤维的长度和导管直径没有显著性差异。见表l。4 中药显微数量分析方法的应用
