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1、 （一）溶液配制注意事项 1 药 品 要 有 较 好 的 质 量 试 剂 分 为 优 级 纯 （ 保 证 试 剂 ， Guaranteed reagent， G R ） 、 分析试剂 （Antalytical reagent， A R ） 化学纯（Chemical pure，CP ）和实验试剂（Laboratory reagent， LR ）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用， 如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。 2药品称量要精确。 3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在 50 万 欧姆以上，pH 在 5.57.0 之间才可应用，在组织培养等特殊用途时 应
2、注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子 水。 配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物 质） ，以防杂菌生长。 （二）0.067（1/15）Mol/L 磷酸缓冲液 1 1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制 ： 称取磷酸二氢钾 （KH2PO4， A R ） 9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入 1 000ml 容量瓶内，再稀释至刻度 （1 000ml） 。 2/15Mol/L 磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠 （Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者 Na2HPO42H2O 11.87g）用蒸馏水 溶解后， 放入 1 000ml 容量瓶内， 再加蒸馏水
3、稀释至刻度 （1 000ml） 。 3按附表的比例，配制成不同 pH 值的缓冲溶液。 附表 1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升） pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 5.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.4 5.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.0 6.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.2 6.1 15.3 84.7 7.3 80.8 19.2 6.2 18.6 81.4 7.5 84.1 15.9 6.3 22.4 77.6 7.6 87.
4、0 13.0 6.4 26.7 73.3 7.7 89.4 10.6 6.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.5 6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8 6.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.3 6.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.2 6.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.0 7.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0 （三）0.15Mol/L PB 液 附表 2 0.15Mol/LPB 液配制法 pH 0.15Mol/L Na2HPO4（ml） 0.15Mol/L NaH2PO4（ml） 6.4 26.5 73.5 6.
5、6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 Na2HPO42H2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L。 Na2HPO412H2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L。 NaH2PO4H2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L。 NaH2PO42H2O 分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L。 （四）0.2Mol/L PB 缓冲液 附表 3 0.2mol/L P
6、B 缓冲液配制法 pH 0.2 Mol/L Na2HPO4（ml） 0.2Mol/L NaH2PO4（ml） 5.8 8.0 92.0 6.0 12.3 87.7 6.2 18.5 81.5 6.4 26.5 73.5 6.6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 7.8 91.5 8.5 8.0 94.7 5.3 0.2Mol/L Na2HPO42 H2O 溶液 35.61g/L Na2HPO412 H2O 溶液含 71.64g/L 0.2Mol/LNaH2PO4H2O
7、溶液含 27.60g/L NaH2PO42 H2O 溶液含 31.21g/L 欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀 释 1 倍即可。欲配制 PBS 液时，则在溶液中加 0.85的 NaCl 溶液即 可。 （五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS） （0.15Mol/L PH 7.2） NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g （如为 Na2HPO412H2O，则为 2.89g） KH2PO4 0.2g 将上述试剂依次溶于 1 000ml 去离子水中，完全溶解后，115高压 灭菌 10min15min，存在 4冰箱中备用。此液可用
8、于配制和稀释细 胞分散剂以及洗涤细胞培养物。 （六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer） 文章来自： 医药 园 () 整理：zfg 1硼酸（3BO3） 0.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。 2硼砂（Na2B4O7） 0.05Mol/L 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。 附表 4 不同 pH 的 0.2Mol/L 硼酸缓冲液配制法 pH 0.05Mol/L 硼砂（ml） 0.2Mol/L 硼酸（ml） pH 0.05Mol/L 硼砂 （ml） 0.2Mol/L 硼酸（ml） 7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7.
9、6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5 7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 （七）巴比妥缓冲液 1pH8.2 离子强度 0.05Mol/L 巴比妥缓冲液 巴比妥钠 47.6g 蒸馏水 3 000ml 1.17N HCl 55.0ml （1.17 N HCl=193ml 浓 HCl 加 1 807ml 蒸馏水） 将 4.76g 巴比妥钠溶于 3 000ml 蒸馏水。 加 1.17 N HCl 55ml。 用 HCl 调节 pH 到 8.2，并加蒸馏水至 4 265ml。 2pH8.4 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.8
10、4g 巴比妥钠 10.30g 加蒸馏水至 1 000.00ml 3pH8.6 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.66g 巴比妥钠 12.76g 加蒸馏水 1 000.00ml （八）0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液 见表附表 5 附表 5 0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液配制法 pH 0.2Mol/L Tris（ml） 0.1Mol/L HCl（ml） pH 0.2Mol/L Tris（ml） 0.1Mol/L HCl（ml） 23 37 23 37 9.10 8.95 25 5 8.06 7.90 25 27.5 8.92 8.76 25 7.5 7.96 7.82 25 30.0
11、8.75 8.60 25 10.5 7.87 7.73 25 32.5 8.62 8.48 25 12.5 7.77 7.63 25 35.0 8.50 8.37 25 15.5 7.66 7.52 25 37.5 8.40 8.27 25 17.5 7.54 7.40 25 40.0 8.32 8.18 25 20.0 7.36 7.22 25 42.5 （九）三羟甲基甲烷盐酸缓冲液（TrisHCl 缓冲液） 不同 pH，0.05Mol/L 25ml0.2Mol/L 三羟甲基氨基甲烷加 ml0.1NHCl，加水稀释至 100ml （见下表） 附表 6 TrisHCl 缓冲液配制法 pH 0.
12、2Mol/L Tris(ml) 0.1NHCl (ml) pH 0.2Mol/L Tris(ml) 0.1NHCl (ml) 23 37 23 37 9.10 8.96 25 5 8.05 7.90 25 27.5 8.92 8.78 25 7.5 7.96 7.82 25 30.0 8.74 8.60 25 10.0 7.87 7.73 25 32.5 8.62 8.48 25 12.5 7.77 7.63 25 35.0 8.50 8.37 25 15.0 7.66 7.52 25 37.5 8.40 8.27 25 17.5 7.54 7.40 25 40.0 8.32 8.18 25
13、20.0 7.36 7.22 25 42.5 8.23 8.10 25 22.5 7.20 7.05 25 45.0 8.14 8.00 25 25.0 25 三羟甲基氨基甲烷（Tris） 分子量=121.14 0.2Mol/L 三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至 1 000ml。 0.1NHCl：取 HCl8.6ml，加水至 1 000ml。 （十）0.5Mol/L pH9.5 碳酸盐缓冲液 NaHCO3 3.70g Na2CO3 0.60g 溶于 600.00ml 蒸馏水中即得。 不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使 PH 下降。最好小量配 制。 （十一）甘油磷酸缓冲液 1
14、配制 pH8.0 磷酸缓冲液 0.1Mol/L Na2HPO4 94.50ml 0.1N NaH2PO4 5.50ml 混合即可 29 份甘油与 1 份 pH8.0 磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。 用途：用于免疫荧光试验。 （十二）Hanks 液 1贮存液 NaCl 80.00g KCl 4.00g Na2HPO412 H2O 1.52g KH2PO4 0.60g 葡萄糖 4.00g 0.4酚红液 50.00ml 双馏水加至 100.00ml 115高压灭菌 15min，冰冻保存。 2工作液 贮存液 1 份 双馏水 9 份 115高压灭菌15min。 临用时用灭菌的5.6NaHCO3液调pH值至7. 2 左右（溶液呈橙红色） 。 （十三）萘（钠）氏试剂（Nesslers reagent） 配方 1：氯化汞 6.0g 碘化钾 12.4g 20NaOH 30ml 加蒸馏水至 100ml 配方 2：碘化汞 11.5g 碘化钾 8g 蒸馏水 50ml （完全溶解后）过滤，加 20NaOH 50ml。 用途：检测溶液中氨离子。 （十四）阿氏（Alsevers）液 葡萄糖 2.05g 柠檬酸钠 0.80g 氯化钠 0.42g 蒸馏水 100ml 溶解后，以
