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1、仅供科研使用，不得用于临床检验。 品牌：YANKOBIO 货号：YKD1013 规格：96T 应 用： 定性 检测 （阻断法 ） 价格：询价 羊小反刍兽疫病毒抗体定性检测试剂盒（ELISA）说明书 【产品名称】 通用名称：羊小反刍兽疫病毒抗体定性检测试剂盒（ELISA） 英文名称： Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus ELISA KIT 【包装规格】 96 人份/ 盒 【预期用途】 仅供科研使用，小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒（Peste des Petits Ruminants Virus， PPRV
2、 ）引起的一种急性接触性传染病，其特征为口腔、舌粘膜糜烂、流泪、流鼻液。本病的 易感动物为山羊，也可感染绵羊、白尾鹿等，但对牛无感染性。 本试剂用于检测羊血清中小反刍兽疫病毒抗体，可用于小反刍兽疫疫苗免疫效果评价。 【检验原理】 本试剂盒系由预包被小反刍兽疫病毒重组抗原的酶标板、抗体工作液、酶标记物及其他配 套试剂组成，应用竞争酶联免疫法（ELISA）原理检测羊血清、血浆样本中小反刍兽疫病毒抗 体。实验时在酶标板中加入待检样本和抗体工作液，经温育后洗涤除去未结合的其他成分后； 再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标 1 / 3 仅供科研使用，不得用于临
3、床诊断。 2 记物，在孔中加TMB底物液，若样品中含有小反刍病毒抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上 抗原结合，从而使后续反应不出现显色；反之则出现显色；显色深浅与样品中的特异性抗体 含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应 孔中的吸光值，即可知样品是否含有小反刍兽疫病毒抗体。 【样品准备】 1. 浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水20 倍稀释成工 作洗涤液。 2. 取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1 周内可于 28保存，长期需置 -20 保存。 3. 用工作洗涤液将待检血清样本按5 倍稀释（如
4、 10l 样本加入 40l 工作洗涤液中， 混匀） 。阴、阳性对照不用稀释。 【检验方法】 1. 使用前将试剂盒置室温30 分钟，恢复至室温。 2. 取所需用量酶标板条，设阴性/ 阳性对照各 2 孔，未用的板条尽快密封，28保存。 3. 阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50l ；样品孔每孔加入稀释后的样品50l 。 4. 每孔加抗体工作液50l ，混匀，置 37反应 30 分钟。 5. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，重复洗涤5 次，拍干。 6. 每孔加酶标记物 100l ，置 37反应 30 分钟。 7. 洗涤，同步骤 5。 8. 每孔依次加底物液A、底物液 B各 50l
5、 ，混匀， 37避光反应 15 分钟。 9. 每孔加终止液50l ，混匀，于 450nm(可用 630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A 值） 。 【参考值】实验正常的情况下，阴性对照吸光值1.0 ，阳性对照吸光值阴性对照吸光值 50% 。 【检验结果的解释】 1.PI （阻断率） =（1- 样本值 / 阴性对照孔均值） 100% ，PI 50% 为阳性； PI50% 为阴 性。 2. 本实验结果为阴性表明羊只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。 【试验方法的局限性】 2 / 3 仅供科研使用，不得用于临床诊断。 3 该试验仅作为定性检测羊血清中小反刍兽疫病毒抗体，根据PI 值高低可作抗体水平强、 中、弱的粗略评估。 【保存条件】 2-8 保存，有效期 6 个月。 3 / 3
