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1、实验四 蛙心脏灌流 蛙心起搏点的观察 期前收缩与代偿间歇,目的要求 1.学习暴露蛙类心脏的方法,熟悉心脏的结构。 2.观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。 实验原理 1. 两栖类动物的心脏解剖 2. stannius结扎 实验器材 动物:蟾蜍 仪器及药品:蛙类手术器械,丝线,任式液。,一、蛙心起搏点的观察,方法步骤 1.破坏脑脊髓 。 2. 仰卧位固定于蛙板上。 3.打开胸腔暴露心脏 ,观察心脏的结构 。 4. 斯氏结扎,记录结果。,实验结果及理论分析,斯氏结扎记录表(次/分钟),实验目的 1学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。 2观察心脏在兴奋过程中兴奋性的变化。 实验原
2、理 心肌的有效不应期(收缩期,舒张早期) 实验器材 动物:蟾蜍 仪器及药品:生物信号采集处理系统,刺激电极, 蛙心夹,张力换能器,蛙类手术器械,任式液。,二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇,方法步骤 1. 破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。 3. 打开胸腔暴露心脏 4. 蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖 5. 连接张力换能器和刺激器 6. 选择合适的刺激强度 ;分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激,观察心跳曲线的变化。,实验结果,讨论,结论,1. 蟾蜍毁髓时要彻底。 2. 实验过程中,应经常用任氏液湿润心脏。 3. 刺激电极要与心室肌接触良好,应避免短路。 4. 心跳曲线的上升支应代表心室收
3、缩,下降支代表心室舒张,如相反则应将换能器倒向。 5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉,以检测强度是否适宜。,注意事项,思考题,1.正常情况下,为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点?它对潜在起搏点如何控制? 2.每次结扎后会出现什么现象,为什么? 3.如何证实心肌有较长的不应期?心肌的较长不应期有何生理意义? 4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗?为什么? 5.代偿间歇是怎样产生的? 6.为何期前收缩幅度有时比正常心缩幅度高,有时比正常心缩幅度低? 7.为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现?,三、蛙心灌流,实验目的 学习离体蛙心的灌流方法。 观察灌流液中几种离子浓度的改变, 相应受 体激动剂和阻断剂对心脏
4、收缩活动的影响。,实验原理 两栖类动物的离体心脏,在用与其内环 境相似的任氏液灌流时,能维持节律性收缩 和舒张。改变罐流液中的离子浓度或加入某 些受体激动剂和阻断剂,可以观察到心脏舒 缩活动的改变。,实验方法 1、标本的制作: (1)将毁损脑脊髓后的蟾蜍固定在蛙板上, 从腹上部正中至两前肢剪开皮肤,打开胸 腔,暴露心脏。 (2)用眼科剪剪开心包膜。 (3)用蛙心夹夹住心尖部。,(4)插管:在总主动脉下穿一线,打活结。在 左主动脉干根部向心脏方向剪一小切口, 将装有少量任氏液的蛙心插管从切口处插 入主动脉球。将蛙心插管与心尖部呈45度 角,并将插管外旋插入心室。见液面上下 波动,心室部可触及插管
5、,即插管已进心 室,用备用线结扎血管及插管。将插管中 的血液冲洗干净。游离心脏,勿伤静脉窦,2、仪器设备的安装连接: (1)将蛙心插管用木夹子固定在铁三脚架上。 (2)在木夹子的下方,将张力传感器固定在铁 三脚架上。 (3)将夹在蛙心尖上的蛙心夹上的丝线系在张 力传感器的簧片小孔上。线的松紧适度。 (4)张力传感器与放大器 CH1相连;打开循 环实验蛙心灌流,开始实验。,3、观察项目 观察以下处理因素对心脏收缩的影响: (1)0.65%Nacl (2)1%Kcl (3)1%Cacl (4)1:10000肾上腺素 (5)1:100000乙酰胆碱 (6)乳酸 (7)NaHCO3,注意事项 1、各药品的滴管分开使用,不能混淆。 2、每次给药前要有正常心博曲线,和给药标记 3、药效出现后立即将药吸出,并冲洗干净等心 脏搏动恢复正常以后再进行下一项实验。 4、插管内液平面应保持一致。 5、换能器头段保持向下倾斜,防止进水。 6、蛙心插管不要插得太深,防止损伤心脏。,窦房沟,