《2020高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2020高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂将( ) A变蓝色B变红色 C变黑色D变棕色 解析： 细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH 升高，加入 酚红指示剂将变红。 答案： B 2测定土壤中细菌数量一般选用10 4、105 和 10 6 倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌 的数量一般选用10 2、103 和 10 4 倍稀释，其原因是( ) A细菌个体小，真菌个体大 B细菌易稀释，真菌不易稀释 C细菌在土壤中数量比真菌多 D随机的，没有原因 解析： 土壤中的微生物大约70% 90% 是细菌，真菌的数量
2、要比细菌少。样品的稀释度 越高， 在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中， 通常选用一定稀释范围的样品液进 行培养，以保证获得菌落数在30300，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的 稀释倍数。 答案： C 3用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出 样品中的活菌数。原因是( ) A平板上的一个菌落就是一个细菌 B菌落中的细菌数是固定的 C此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 D此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同 解析：用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品 稀释液中的一个活菌，但偶尔也能来自两个细菌，
3、所以此方法统计的菌落数可能与活菌的实 际数不相同。 答案： C 4土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种( ) A尿素酶B脲酶 C蛋白酶D肽酶 解析： 能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一 2 步利用。 答案： B 5(2016四川卷) 图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的 mRNA 部分序列。 (1) 图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_ 作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成 _色。 (2) 在 5 个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10 5 的土壤样品溶液0.1 mL ，培养一
4、 段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178 和 191。该过程采取的接种 方法是 _，每克土壤样品中的细菌数量为_ 10 8 个；与血细胞计数板 相比，此计数方法测得的细菌数目较_。 (3) 现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA 在图乙箭头所示的 位置增加了70 个核苷酸，使图乙序列出现终止密码( 终止密码有UAG 、UGA和 UAA)。突变基 因转录的mRNA 中，终止密码为_，突变基因表达的蛋白含_个氨基酸。 解析：(1) 关键信息： “筛选产脲酶细菌” “接种稀释倍数为10 5 的土壤样品溶液” ，使“图 乙序列”出现终止密码。 (2)
5、解题关键：区别选择培养基与鉴别培养基，掌握细菌计数的方法。 本题考查微生物的培养与分离方法及基因表达。 (1) 脲酶能够催化尿素分解为氨，要从土壤中筛选出产脲酶的细菌，需用以尿素作为唯 一氮源的选择培养基。由于尿素被分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH 升高，使酚 红指示剂变红色。 (2) 将稀释倍数为10 5 的土壤样品溶液接种在细菌培养基平板上，用于计数细菌菌落数 的方法是稀释涂布平板法。统计的菌落数应介于30300 之间，选择细菌菌落数为156、178 和 191 的平板计数，每克土壤样品中细菌数量为(156 178191)30.1 10 51.75 10 8 。由于两个或多个细菌连
6、接在一起时，往往统计的是一个菌落，用此方法测得的细菌数 目偏低。 (3) 密码子由3 个相邻的碱基组成，箭头前面的碱基一共构成91 个密码子；插入的70 个核苷酸和后面2 个碱基一共构成24 个密码子，后面是UGA ，是终止密码，翻译结束后， 3 表达的蛋白质含有115 个氨基酸。 答案： (1) 尿素酚红红 (2) 稀释涂布平板法1.75 少 (3)UGA 115 A 级基础巩固 1分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( ) 加尿素不加尿素加琼脂糖不加琼脂糖加葡萄糖不加葡萄糖 加硝酸盐不加硝酸盐 AB CD 解析： 分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解
7、 尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。 答案： C 2从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有( ) 尿素有机氮化物无机盐有机碳化物 水无机碳化物 AB CD 解析： 分离能分解尿素的细菌，故培养基中一定有尿素，一定没有有机氮化物；另外， 水、无机盐和碳源、能源也是细菌生长所必不可少的。有机碳在这里既是碳源又是能源，因 为分解尿素的细菌是异养微生物，不能利用无机碳化物。 答案： A 3关于土壤取样的叙述错误的是( ) A土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B先铲去表层土3 cm 左右，再取样 C取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D应在火焰旁称取土壤 答案： C 4下列关于
8、微生物培养和利用的叙述不正确的是( ) A利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数 B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落 C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 4 D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少 解析：用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；接种划线可以将菌 体分散， 最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；以尿素为唯一氮源且含酚红 的培养基可选择和鉴别尿素分解菌；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10 天 后含量开始下降。 答案： A 5 在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10
9、6 培养基上筛选出大约150 个菌落， 而其他同学只筛选出大约50 个菌落。 A同学的结果产生原因可能有( ) 由于土样不同由于培养基被污染由于操作失误没有设置对照 AB CD 答案： A 6下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( ) A采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平 均值作为统计结果 解析： 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落 数往往比活菌的实际数目低。一般
10、选择菌落数在30300 的平板进行计数，密度过大会使计 数结果偏小，影响结果的准确性。涂布三个平板，作为重复组，取其平均值作为统计结果能 增强试验的说服力与准确性。 答案： C B级能力训练 7在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。 (1) 如图是利用 _法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步_分散到培养基 的表面。 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、 H2O 。若此培 养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述的_， 并加入 _， 以补充 _ 源。 5 (3) 若在稀释倍数为10 6 的培养基中测得平板上菌落数的平均值为
11、233，那么每毫升样 品中的菌落数是( 涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)_ 。 解析： (1) 由题图可知， 其采取的是平板划线法，该方法能把聚集的菌种逐步稀释分散 到培养基的表面。 (2) 培养分解尿素的细菌，其氮源是尿素， 所以培养基中要除去含氮物质， 即除去 NaNO 3，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源。(3) 根据题意可知，每毫升样品 中的菌落数平板上菌落数的平均值体积稀释倍数2330.2 10 61.165 109。 答案： (1) 平板划线稀释(2) NaNO3尿素和葡萄糖氮、碳(3) 1.165 10 9 8有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高
12、效降解氯苯的微生 物。回答下列问题： (1) 为了获得能降解氯苯的微生物菌种，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以 _为碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外， 培养液还应含有_、无机盐 和蒸馏水等。 (2) 将获得的3 种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1 L 含 20 mg氯苯的相同培养液中 培养 ( 培养液中其他营养物质充裕、条件适宜 ) ，观测从实验开始到微生物停止生长所用的时 间，甲、乙、丙分别为33 h 、15 h 、46 h ，则应选择微生物乙作为菌种进行后续培养，理 由是 _ 。 (3) 若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用_直接计数， 也可 选用 _法统计活菌数
13、目。 (4) 制备固体培养基，基本步骤是： 计算称量溶化分装_包扎高压蒸汽灭菌_。 (5) 接种时要对接种环进行灼烧，目的是_。 答案： (1) 氯苯氮源(2) 微生物乙分解氯苯的能力比甲、丙更强 (3) 血细胞计数板稀释涂布平板 (4) 加棉塞倒平板(5) 杀灭接种环上的微生物，避免感染杂菌 9广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高， 种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精 的一般工艺流程为：甘蔗榨汁( 蔗糖) 酵母发酵蒸馏成品( 燃料酒精 ) 。 (1) 具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母
14、菌进行诱变后 通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下： 步骤 1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。 步骤 2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意_和_，加琼脂 后灭菌，制成固体平板。 步骤 3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。 步骤 4：根据 _ ， 6 筛选出突变菌。 (2) 上述步骤2、3 和 4 的依据分别是 _ _ 。 解析： (1) 要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培养基中必须加入高浓度蔗糖和调低pH，能在 选择培养基上生长的即为所需菌种。(2) 步骤 2 是给其提供高糖或酸性的筛选环境；步骤3 是为了获得单菌落；步骤4 是根据能生长的菌株具有耐
15、高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。 答案： (1) 添加高浓度蔗糖(葡萄糖 ) 调低 pH 是否能在选择培养基上生长(2) 提供 高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长的菌落具有耐高糖和耐酸的特性 10(2017全国卷) 某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和 NH3，供植物吸收和利用。 回答下列问题： (1) 有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生_。能分 解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是_， 但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_( 答出两点 即可 ) 。 (2) 为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时， 应选择 _( 填 “尿素”“NH4NO3” 或“尿素 NH4NO3”) 作为氮源，不选择其他两组的原因是_
