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1、离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响 厉旭云 浙江大学医学院,实验目的(Objectives): 学习Straub法灌流蟾蜍离体心脏的方法。 掌握K+、Ca2+离子浓度变化以及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对蟾蜍离体心脏的影响。,1. 材料与方法(materials and methods):,1.1 实验动物 蟾蜍,1.2 药品与试剂 任氏液、0.65NaCl、2% CaCl2、1% KCl、1:10000 肾上腺素、 1:10000 乙酰胆碱、0.1% 阿托品、 3%心得安。,任氏液:用于维持离体蛙心长时间搏动的生理盐溶液,由氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、磷酸二氢钠和蒸馏水配置而成,其电解质、
2、晶体渗透压、PH值与蛙的组织液相近。用于蛙类离体组织、器官的营养和湿润。,1.3 仪器和装置,1.3.1 器材,张力换能器,RM6240C微机生物信号处理系统,1.3 仪器和装置,1.3.1 仪器连接,1.4 离体蟾蜍心脏标本制备,1)蟾蜍毁脑毁脊髓,2)仰卧位固定蟾蜍四肢,3)打开蟾蜍胸腔,暴露心脏。,4)插管:在主动脉根部剪一斜口,将插管插入动脉圆锥, 在心室收缩时将插管插入心室,结扎固定。,1.4 离体蟾蜍心脏标本制备,蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。 蛙心脏没有营养性血管,斯氏蛙
3、心灌流法,插管直接插入心室,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透获得的。,2. 观察项目,2.1 观察正常蛙心搏动曲线,记录心率、心室收缩的幅度,2.2 更换任氏液为0.65NaCl溶液,记录心率和收缩幅度。冲洗。,2.3 滴加2CaCl2 溶液12滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。,2.4 滴加1%KCl 溶液12滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。,2.5 滴加1:10000肾上腺素溶液12滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。,2.6 滴加心得安溶液12滴,观察心跳变化。滴加1:10000肾上腺素 溶液12滴记录心率和收缩幅度。冲洗。,2.7 滴加1:10000乙酰胆碱溶液12滴,记录心率和收缩幅度,冲
4、洗。,2.8 滴加阿托品溶液12滴,观察心跳变化。滴加1:10000乙酰胆碱 溶液12滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。,2. 观察项目,数据测量:舒张期张力、收缩期张力、心率,收缩期张力,舒张期张力,3. 结果(Result): 3.1 正常离体蛙心的舒张期张力为1.1g、收缩期张力为2.5g,心率为34bpm。 3.2 用0.65NaCl溶液后灌流,蛙心舒张期张力为1.1g,收缩期张力为1.5g,心率为35bpm. 3.2 滴加2CaCl2溶液12滴前蛙心蛙舒张期张力为1.1g,心收缩期张力为2.5g,心率为34bpm,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为3.5g,心率为0bpm。 3.3 滴加1%KCl溶液12滴前心静止张力为1.1g,心发展张力为1.5g,心率为34bpm,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为1.0g,心率为0bpm。 3.4 ,表1 离子与药物对蟾蜍离体心脏活动的影响,