分子生物学试题库(最新-编写)

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1、第第2章染色体与章染色体与 DNA 名词解释名词解释 原癌基因 :原癌基因 : 细胞内与细胞增殖相关的正常基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化 上高等保守。 当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞 过度增殖,从而形成肿瘤。 半保留复制 :半保留复制 : 以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA, 这样新形成的子代DNA中, 一条链来自亲代 DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制。 填空题填空题 3.在聚合酶链反应中,除了需要模板 DNA 外,还需加入引物、DNA 聚合酶、dNTP 和镁离子。 4.引起 DNA 损伤的因素有自发因素

2、、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶、 解螺旋酶、 单链DNA结合蛋白。 6.参与 DNA 切除修复的酶有 DNA 聚合酶、DNA 连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中 DNA 复制的主要酶是 DNA 聚合酶。在原核生物中是 DNA 聚合酶。 8.端粒酶是端粒酶是含一段 RNA 的逆转录酶。 9.DNA 的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA 的直接修复。 简述 DNA 复制的过程简述 DNA 复制的过程 DNA 的复制过程可被分为 3 个阶段,即复制的起始、延伸和终止。每个 DNA 复制的 独立单元主要包括复制起始位点和

3、终止位点。 DNA 复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段,DNA 解旋解链,形成复 制叉, 引发体组装 ; 在引发阶段, 在引发酶的催化下以 DNA 链为模板合成一段短的 RNA 引物。 复制时 DNA 链的延伸由 DNA 聚合酶催化,以亲代 DNA 链为模板,引发体移动,从 53 方向聚合子代 DNA 链。当子链延伸到达终止位点是,DNA 复制就终止了,切除 RNA 引物,填 补缺口,在 DNA 连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的 DNA 长链。 试述真原核生物的 DNA 复制的特点的不同之处试述真原核生物的 DNA 复制的特点的不同之处 真核生物染色体有多个复制起

4、点,多复制眼,呈双向复制,多复制子。原核生物的染 色体只有一个复制起点,单复制子也呈双向复制。 真核生物冈崎片段长约 200bp 比原核生物略短。 真核生物 DNA 复制速度比原核慢, 速 度为 10003000bp/min(仅为原核生物的 1/201/50) 。 真核生物复制的终止在端粒处,原核生物的复制叉相遇时即终止。 真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制 ; 而在快速生长的原核生物 染色体 DNA 复制中,起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时,往往采用更多的复制起 点。 真核生物有多种 DNA 聚合酶,DNA 聚合酶是真正的复制酶,在 PCNA 存在下有持续 的合成能力

5、。PCNA 称为增殖细胞核抗原,相当于大肠杆菌 DNA 聚合酶的-夹子,RFC 蛋 白相当于夹子装配器。 原核生物的 DNA 聚合酶有三种 DNA 聚合酶DNA 的真正复制酶 : 多亚基酶,含十种亚基, 该酶 DNA 合成的持续能力强。 真核生物线性染色体两端有端粒结构, 它是由许多成串的重短复序列组成, 端粒功能 是稳定染色体末段结构,防止染色体间的末端连接,并可补偿滞后链 5-末段在消除 RNA 引物后造成的空缺,使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段 RNA 的逆转录酶。 RPA:真核生物的单链结合蛋白;RNaseH1 和 MF-1 切除 RNA 引物,DNA 聚合酶填补 缺口。 简述半保

6、留复制的生物学意义 DNA 的复制过程(以大肠杆菌为例) 复制起始: (1) 、拓扑异构酶解开超螺旋。 (2) 、Dna A 蛋白识别并在 ATP 存在下结合于四个 9bp 的重复序列。 (3) 、在类组蛋白(HU、ATP 参与下, Dan A 蛋白变性 13 个 bp 的重复序列,形成开链复合物。 (4) 、 Dna B 借助于水解 ATP 产生的能量在 Dna C 的帮助下沿 5 3 方向移动, 解开 DNA 双链,形成前引发复合物。 (5) 、单链结合蛋白结合于单链。 (6) 、引物合成酶(Dna G 蛋白)开始合成 RNA 引物。 链的延长(冈崎片段的合成): 在 DNA 聚合酶的催化

7、下,以四种 5 -脱氧核苷三磷酸为底物,在 RNA 引物的 3端以磷酸 二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA 链的延伸同时进行前导链和滞后链的 合成。两条链方向相反。 6、PCR 的基本原理? PCR 是在试管中进行的 DNA 复制反应,基本原理是依据细胞内 DNA 半保留复制的机理,以及体 外 DNA 分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度, 以促使双链 DNA 变成单链,单链 DNA 与人工合成的引物退火,然后耐热 DNA 聚合酶以 dNTP 为 原料使引物沿着单链模板延伸为双链 DNA。PCR 全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制 的。

8、需要重复进行 DNA 模板解链、引物与模板 DNA 结合、DNA 聚合酶催化新生 DNA 的合成, 即高温变性、低温退火、中温延伸个步骤构成 PCR 反应的一个循环,此循环的反复进行,就 可使目的 DNA 得以迅速扩增。DNA 模板变性:模板双链 DNA?单链 DNA,94。退火:引物 单链 DNA?杂交链, 引物的 Tm 值。 引物的延伸 : 温度至 70 左右, Taq DNA 聚合酶以种 dNTP 为原料, 以目的 DNA 为模板, 催化以引物末端为起点的 53DNA 链延伸反应, 形成新生 DNA 链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板 PCR,就是如此反复循环,

9、 使目的 DNA 得到高效快速扩增。 第三章第三章 启动子启动子 : 是一段位于结构基因 5,端上游区的 DNA 序列, 能活化 RNA 聚合酶, 使之与模板 DNA 准确地相结合并具有转录起始的特异性。指指 RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定 的 聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定 的 DNA 序列。序列。 增强子增强子:能强化转录起始的序列称为增强子。 转录:转录:以 DNA 为模板,按照碱基配对原则合成 RNA,即将 DNA 所含的遗传信息传给 RNA,形 成一条与 DNA 链互补的 RNA 的过程。 RNA 的编辑的编辑:是某些 RNA,特别是 mRNA 的一种加工方式,它

10、导致了 DNA 所编码的遗传信 息的改变。 外显子外显子(Exon) :真核细胞基因 DNA 中的编码序 列,这些序列被转录成 RNA 并进而翻译为 蛋白质。 内含子内含子(Intron) :真核细胞基因 DNA 中的间插序列,这些序列被转录成 RNA,但随即被剪 除而不翻译。 复制子 : 生物体的复制单位称为复制子(replicon) ,是在同一个复制起点控制下的一段 DNA 序列。 转录单元:是一段启动子开始至终止子结束的 DNA 序列。 转录起点:是与新生 RNA 链的第一个核苷酸相对应的 DNA 链上的碱基,通常为一个嘌呤。 转录开始时模板上的第一个碱基,在原核中常为 A 或 G,而且

11、位置固定。 填空填空 1 转录的基本过程包括:模板识别,转录起始,转录的延伸,转录的终止。 2 基因表达包括:转录和翻译 两个阶段。 3RNA 的编辑方式:碱基突变,尿甘酸的缺失和添加。 4 在原核生物中,-35 区与-10 区之间的距离大约是 1619bp 5 帽子结构的功能:1在翻译中起识别作用2使 mRNA 免遭核苷酸的破坏 6 原核生物只有一种 RNA 聚合酶而真核生物有三种, 每一种都有其特定的功能。 聚合酶合 成 rRNA,聚合酶合成 mRNA, 聚合酶合成 tRNA 和 5s rRNA。 三种聚合酶都是具有多亚基的 大的蛋白复合体。 7 转录因子通常具有两个独立的结构域:一个结合

12、 DNA,一个激活转录。 8 在真核细胞 mRNA 的修饰中, “帽子”结构由甲基组成, “尾”由多聚腺嘌呤组成。 9 原核生物的绝大部分起启动子都存在共同的序列,即位于-10bp 处的 区和-35bp 处 的 区, 他们都是 RNA 聚合酶与启动子结合的位点, 能与因子相互识别而具高度亲和 性。真核生物中,在转录起始位点上游-25-35bp 处有 区和位于-70-80bp 处 的 区。 简答题 1 增强子的特点增强子的特点 1有远距离效应2无方向性3顺势调节4无物种和基因的特异性 5具有组织的特异性6有相位性,其作用与 DNA 的构象有关7有的增强子可以对 外部信号产生反应。 2 比较比较

13、DNA 复制和转录的异同点复制和转录的异同点 相同点 : 都以 DNA 链作为模板,合成方向均为 5,端到 3,端,聚合反应均遵循碱基配对原则, 通过核苷酸之间形成的 3,5,磷酸二酯键使核苷酸键延长。 不同点: 复制转录 模板两条链均被复制模板链转录(不对称转录) 原料DntpNTP 酶DNA 聚合酶RNA 聚合酶 产物子代双链 DNA(半保留复制)mRNA tRNA rRNA 配对方式A-T G-CA-U A-T G-C 引物RNA 引物不需要引物 DNA 复制与转录的异同 相同点: 都需要模板 都以三磷酸核苷酸为底物(NTP 或 dNTP) 合成方向都是 53 不同点 转录不需引物; 只

14、转录 DNA 分子中的一个片段(称为转录单位或操纵子,operon); 双链 DNA 中只有一条链具有转录活性(称为模板链) ; 哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。 RNA 聚合酶无校对功能。 原核生物与真核生物 mRNA 的比较 (1) 、原核生物 mRNA 的半衰期短; (2) 、许多原核生物 mRNA 以多顺反子形式存在; (3) 、原核生物 5端无帽子结构,3或只有短的 poly(A)。 (4) 、真核生物 mRNA5端有帽子结构, (5) 、绝大多数真核生物 mRNA3具有 poly(A)尾巴,是转录后加上的,是 mRNA 从核到 质转移所必需的形式,提高 mRNA 的

15、稳定性。 大肠杆菌的转录过程: (1) 、识别阶段:RNA 聚合酶在亚基的引导下结合于启动子上; (2) 、DNA 双链局部解开; (3) 、起始阶段:在模板链上通过碱基配对合成最初 RNA 链; (4) 、延伸阶段:核心酶向前移动,RNA 链不断生长; (5) 、终止阶段:RNA 聚合酶到达终止子; (6) 、RNA 和 RNA 聚合酶从 DNA 上脱落。 论述题论述题 1 真核生物转录的前体真核生物转录的前体 hnRNA 如何加工为成熟的如何加工为成熟的 mRNA? 真核生物 mRNA 的结构组成:5,端存在帽子结构,3,端通常具有 poly(A)尾巴,无内含子, 部分碱基发生甲基化。 5

16、,端加帽 : 当 RNA 聚合酶聚合的转录产物达到 25 碱基长时, 在其 5,端加上一个以 5,3, 方向相连的7甲基鸟苷帽, 防止5,核苷酸外切酶的攻击, 有利于剪接、 转运和翻译的进行 ; 3,端加尾:很多真核生物的 hnRNA 的 3,端经过剪切后再加上多聚 A 残基即 poly(A)尾巴, 这有助于整个分子的稳定;剪接:在真核生物的 mRNA 加工过程中,内含子序列被切除, 两侧的外显子片段连接。剪接反应在核内进行,需要内含子有 5,GU,AU3,以及一段 分支点序列。其过程是 : 内含子先以一个具尾的环状分子或套索状分子形式被删除,然后被 降解, 剪接包括 snRNP 与保守序列结合, 形成剪接体, 在其内发生剪接与连接反应 ; 编辑 ; 甲基化修饰:当序列为 5,RRACX3,时会在第 6 位 N 原子位置发生甲基化。 2 概括细菌细胞的转录过程概括细菌细胞的转录过程 转录是通过 RNA 聚合酶的作用,以一条 DNA 链为模板产生一条单链 RNA 过程。步骤如下: 与 RNA 聚合酶全酶的结合:一个 RN

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