植物组织培养设备及其使用

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1、第七节 园林植物的组织培养育苗,概述 1 繁殖速度快 2 繁殖脱毒苗 3 不受季节限制,组织培养繁殖的基本原理,细胞全能性 植物体中每个完整细胞核的细胞,都具有该植物的全部遗传信息和产生新的完整植株的能力。 体细胞(植株的一部分) 完整植株,组培条件,组培室的建立,准备室,接种室,培养室,植物组织培养设备,1.灭菌设备:高压蒸气灭菌锅 用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。 工作原理:在密闭的蒸锅内,01MPa的压力下,锅内温度达121。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。,使用方法:首先检查灭菌锅内是否有水,而且水刚好淹住加热器,然后放入灭菌材料,对称拧紧灭菌锅上的螺丝

2、,关闭放气阀通电。待压力上升到005MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。三次放气后,关阀再通电,压力表上升达01-015Mpa时,维持20min后,断电,待压力降至零时,打开入入气阀,取出灭菌材料。 注意事项:对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间;对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好,高压灭菌20-30min;高压灭菌前后的培养基,其pH值下降0.2-0.3单位。因此,调PH值时,可

3、适当调高0.0.3个单位。,2.接种设备:无菌超净工作台 用于培养材料的消毒及接种。 使用前,将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启,灭菌15min后,关闭杀菌按钮,打开照明按钮,即可在上面进行操作。,电炉,推车,灭菌器,接种器具,酒精灯,培养瓶,封口膜,3.培养设备 带日光灯的培养架,主要用于接种后材料的培养。,恒温箱:又称培养箱,可用于原生质体和酶制剂的保温,也可用于组织培养材料的保存及暗培养。,摇床与转床:在液体培养基中,可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。,4.驯化设备,温室 防虫网室,5、其它辅助设备,培养基灌装机及洗瓶机

4、, 除湿机:使培养室的湿度保持在定的范围内。,空调机:用于接种室和培养室温度的控制。,烘箱:用于干燥洗净后的玻璃器皿,还可用80的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。,冰箱:用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏,细胞组织和试验材料的冷冻保藏,以及某些材料的预处理。,纯水机与蒸馏水发生器: 是实验室必备的仪器。,天平和显微镜:天平包括分析天平,电子天平,药物天平等,用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质,天平的精确度要到0.0001g,这就要求精确度更高的分析天平。,显微镜包括解剖镜,生物显微镜,倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。,酸度计:用于

5、校正培养基和酶制剂的PH。,培养基成分,基本组成 无机元素 1 大量元素:N P K Ca Mg S 2 微量元素: Fe B Zn Cu Mo Cl 有机成分 维生素 肌醇 氨基酸 糖 蔗糖 葡萄糖 果糖,琼脂(0.50.8%) 琼脂粉 琼脂条,植物生长调节剂 细胞分裂素类 KT 6-BA ZT 生长素类 IAA IBA NAA 2,4-D 赤霉素类 GA3 天然添加物 椰子汁 酵母提取液 土豆汁 麦芽提取物等,水 蒸馏水 纯净水 自来水 pH值(5.65.8) 1mol/L HCl 或 NaOH 其它 吸附剂(活性炭) 抗氧化剂(Vc 柠檬酸等),培养基种类,MS培养基 Miler培养基

6、Nitsch培养基 H培养基 White培养基 N6培养基,培养条件,温度:25左右 光照:3000lx10000lx 时间:1216h,操作技术,组培苗工厂化生产的经营与管理,一、经营思想,经营思想是从事经营活动、解决经营问题的指导思想,它是随着生产力发展而发展的。在经营思想指导下形成经营管理理论,经营管理理论用于指导生产经营实践,不断促进生产力发展。,二、市场营销,(一)、经营策略,(二)、市场预测,(三)、产品的营销,1市场需求的预测 2市场占有率的预测,生产规模与生产计划,1、试管苗增殖率的估算,增殖率:是指植物快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。 估算试管苗的繁殖量,是以苗、芽或未生根嫩茎为

7、单位,一般以苗或瓶为计算单位。 年生产量(Y)决定于每瓶苗数(m)、每周期增殖倍数(X)和年增殖周期数(n),其公式为:Y=mXn,2、生产计划的制定,制定的要点: 1)对各种植物的增殖率应做出切合实际的估算; 2)要有植物组织培养信不过各的技术储备; 3)熟悉各种组培苗的定植时间和生长环节; 4)要掌握组培苗可能产生的后期效应。 全年生产量=全年出瓶苗数炼苗成活率,根据植物组织培养的技术路线,拟定工艺流程:如:茎尖表面消毒接种诱导培养基茎尖生长病毒检测鉴定培养无根小植株培养生根完整小植株炼苗20-25天移栽成活。,3、工厂化生产的工艺流程,成本核算与效益分析,一、成本核算的方法,二、效益分析

8、,1成本核算 2产销对路 3规模生产,提高利润,降低成本提高效益的措施,1.掌握熟练的技术技能,制定有效的工艺流程,提高生产效率 2.减少设备投资,延长使用寿命 3.降低器皿消耗,使用廉价的代用品 4.节约水电开支 5.降低污染率,提高成品率 6.提高繁殖系数和移栽成活率 7.发展多种经营,开展横向联合 8.商品化生产的经营管理,1、商业化经营管理思想 2、市场营销经营策略 3、市场预测:(1)市场需求预测;(2)市场占有率预测。 4、试管苗增殖率 年生产量(Y)决定于每瓶苗数(m)、每周期增殖倍数(X)和年增殖周期数(n),其公式为:Y=mXn 5、生产计划的制定: 全年生产量=全年出瓶苗数

9、炼苗成活率 6、成本核算和效益分析:1)成本核算; 2)产销对路; 3)规模生产,提高利润。 7、降低成本提高效益的措施。,小结:,1、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。20.9.2720.9.27Sunday, September 27, 2020 2、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。03:59:5403:59:5403:599/27/2020 3:59:54 AM 3、越是没有本领的就越加自命不凡。20.9.2703:59:5403:59Sep-2027-Sep-20 4、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。03:59:5403:59:5403:59Sunday, Septemb

10、er 27, 2020 5、知人者智,自知者明。胜人者有力,自胜者强。20.9.2720.9.2703:59:5403:59:54September 27, 2020 6、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。2020年9月27日星期日上午3时59分54秒03:59:5420.9.27 7、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。2020年9月上午3时59分20.9.2703:59September 27, 2020 8、业余生活要有意义,不要越轨。2020年9月27日星期日3时59分54秒03:59:5427 September 2020 9、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。上午3时

11、59分54秒上午3时59分03:59:5420.9.27 10、你要做多大的事情,就该承受多大的压力。9/27/2020 3:59:54 AM03:59:542020/9/27 11、自己要先看得起自己,别人才会看得起你。9/27/2020 3:59 AM9/27/2020 3:59 AM20.9.2720.9.27 12、这一秒不放弃,下一秒就会有希望。27-Sep-2027 September 202020.9.27 13、无论才能知识多么卓著,如果缺乏热情,则无异纸上画饼充饥,无补于事。Sunday, September 27, 202027-Sep-2020.9.27 14、我只是自己不放过自己而已,现在我不会再逼自己眷恋了。20.9.2703:59:5427 September 202003:59,谢谢大家,

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