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1、A 卷 20192019 年第一期临床基因扩增检验实验室规范化培训班年第一期临床基因扩增检验实验室规范化培训班 理理论论考考试试卷卷 单位名称单位名称姓名姓名学员编号学员编号 一.填空（每空 0.5 分，共 15 分） 1. 为加强医疗机构临床基因扩增实验室规范化管理，卫生部于2010 年发布 ，北京市卫生局为做好实验室备案工 作，于 2012 年发布了北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核暂行规定 。 2. 北京市卫生局及各区县卫生局负责所辖行政区域内地方医疗机构临床基因扩增检验实验 室 的 备 案 和 监 督 管 理 工 作 。 其 中 备 案 的 技 术 审 核 工 作 流 程 主
2、 要 包 括 ： 申 报、 、。医疗机构的医学检验科应当设 有专业诊疗科目。备案的临床基因扩增检验实验室参加 医疗机构的年度校验。 3. 临床基因扩增检测的分析中质量保证关键内容包括：和。 其中前者监测和控制的是实验室测定的，而后者则通过对不同的实验室 测定结果的比对而评价实验室测定的。 4.在进行荧光定量 PCR 检测之前，样本手工预处理应该在中进行，并且 使用吸头进行样本操作。 5. PCR 的基本反应过程包括、。 6. 荧光定量 PCR 使用的 Taqman 探针两端标记有基团和基团。 7. 根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为。 8. 普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区：
3、、 、。 9. 提纯的核酸样品可根据波长的光吸收值算出其含量，通过计算 的比值计算出其纯度。 10. 临床基因扩增实验室检测用的试剂应当经批准。 11.cfDNA 的中文名称是，ctDNA 的中文名称是。 1 A 卷 二是非题（在你认为正确的句子后面打，错误的后面打，每题1 分，共 15 分） 1.DNA 双链中，碱基 A-T 之间以三个氢键相连，G-C 以两个氢键相连。（） 2.PCR 反应中，复性过程中引物与DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。 （） 3.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的 PCR 试剂盒，该酶可以降解含有 UTP 的 扩增产物。（） 4.核酸的复制是
4、由 3 5方向进行的。（） 5.自制室内质控品时， 应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。（） 6.定量 PCR 与定性 PCR 测定原理的最主要的区别点在于前者的测定点在 PCR 的指数扩增 期，而后者多为扩增平台期。（） 7.处理 PCR 标本时，在没有生物安全柜的情况下，可用超净台操作。（） 8.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定结果的SD 增大。（） 9.扩增管没有盖好会造成 PCR 反应液热蒸发，直接影响结果，但不会成为一个污染源。 （） 10. 核酸是极性化合物，可溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂。（） 11. 核酸的解链温度（Tm）与 G+C 含量有关，G+C 含量愈大，Tm 愈
5、高。（） 12. 无法参加室间质量评价计划时， 可以用室内质控替代。（） 13. PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高。（） 14. PCR 可应用于遗传病、肿瘤、病原体检测及判断亲缘关系等方面。（） 15. 质量管理体系的要素包括质量方针、质量目标和质量指标。（） 三单选题（请将所选答案填写在题后的括号中，每题三单选题（请将所选答案填写在题后的括号中，每题 1 1 分，共分，共 2525 分）分） 1.PCR 技术扩增 DNA,需要的条件是（） 目的基因引物四种脱氧核苷酸 DNA 聚合酶等 mRNA核糖体 A.B.C.D. 2. 多重 PCR 需要的引物对为（） A.一对
6、引物B.半对引物C.两对引物D.多对引物 3. Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（） A.35-40B.50-55C.70-75D.80-85 2 A 卷 4. 以下哪项不是临床 PCR 实验室设计的一般原则（） A.各区合并B.注意风向C.因地制宜D.方便工作 5. 下列哪一种病毒的遗传物质为RNA（） A.乙肝病毒B.人乳头瘤病毒C.巨细胞病毒D.人类免疫缺陷病毒 6在做结核分枝杆菌-荧光 PCR 检测之前，应采用下面哪个浓度的氢氧化钠对痰液标本进 行液化。（） A. 2%B. 3%C. 4%D. 5% 7. 普通 PCR 基因扩增仪最关键的部分是（ A.热盖B.温度控制系统C.
7、软件系统D.荧光检测系统 8.PCR 技术的发明人是：（ A. Watson J.D.Watson J.D.;B. Crick F. H.C.;Crick F. H.C.; C. Kary MullisKary Mullis;D. Rosalind FranklinRosalind Franklin . 9. 生物安全水平的级别共分为几个等级（ A1 个B2 个C3 个D4 个 10. 以下在 PCR 反应中，对扩增产物的特异性起决定因素为（ A.模板B.引物C.dNTPD.镁离子 11.有关荧光定量 PCR 方法， 下述哪一条是错误的？（ A.在扩增的指数期定量；B. 在扩增的终点测定定量；
8、 C.可采用 Taqman 探针；D. 采用内标和外标方法均可。 12. 在选择开展临床检验项目时，应首先考虑：（ A.临床有效性和分析有效性；B. 检测精密度和检测准确度； C.临床有效性和检测精密度；D. 分析有效性和检测准确度。 13 以下哪项有利于 DNA 的保存：（ A. 加入 EDTA螯合钙离子，去除核酸酶的活性；B. 加入少量 DNase； C. 溶于 pH 3.0 溶液；D. 加入少量 RNase。 14.荧光定量 PCR 检测过程中，基线漂移的可能原因有：（ A.蒸发；B.探针水解C.相邻荧光通道干扰D.以上都是 15.将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态，目的是：
9、（ A.防止有生物传染危险的样本逸出； B.防止扩增产物从该区逸出； C.防止该区灰尘的逸出； D.为了生物安全的目的 3 ） ） ） ） ） ） ） ） ） A 卷 16. 真核生物染色体 DNA 主要以下列哪种形式存在（） A. 环状单链分子B. 线性单链分子 C. 环状双链分子D. 线性双链分子 17. TaqMan探针采用的是（） A荧光标记的探针B生物素标记的探针 C同位素标记的探针DSYBR Green 荧光染料 18. 最大量程为 200ul 的微量移液器，显示读数为020，实际的吸液容量值为： （） A 0.2 ulB 2ulC20 ulD200 ul 19.有关核小体的错误叙
10、述是：（） A核小体是染色体的基本单位B DNA 和组蛋白共同构成核小体 CDNA 和组蛋白 H1 构成核小体连接区DRNA 和组蛋白共同构成核小体 20.基因突变的实质是：（） A染色体上的 DNA 序列变化了B染色体上的 DNA 变成了 RNA C染色体上的 DNA 变成了蛋白质D染色体上的 DNA 高级结构发生了局部改变 21. 如果一个 PCR 反应体系中加入模板 200 个，经过 30 个循环后扩增产物的数量将达到 （） A. 200302B. 200230C. 200230D. 200302 22. 双链 DNA 中的碱基对有：（） A A-UB G-TC C-AD T-A 23.
11、 下列四个 DNA 片段中含有回文结构的是（） A.GAAGAAB.TGGAAA C.GAAAAGD.GAATTC 24. 核酸分子中储存遗传信息的关键部分是：（） A. mRNAB. tRNA C. rRNAD. DNA 25. 核酸检测探针的标志性特征是：（） A一小段已知序列的单链核酸；B. 一小段未知序列的单链核酸； C. 一小段已知序列的双链核酸；D. 有同位素或非同位素标记物。 4 A 卷 四.简答题(每题 5 分，共 25 分) 1. 简述什么情况下应该对分子诊断检验程序进行性能验证？ (5 分) 2. 临床 PCR 实验室质量管理体系文件应包含哪些内容？(5 分) 5 A 卷
12、3. 可用哪些方法对分子诊断实验室的员工进行技术工作能力评估（至少列出5 种） 。 (5 分) 4.感染性疾病的定量、定性检测，人基因组的基因型检测，对上述三类 PCR 检测的室内质 控品的浓度水平和型别如何要求？(5 分) 5.简述生物安全的概念、实验室生物安全水平的概念。 (5 分) 6 A 卷 五.论述题(共 20 分) 1. 某一开展乙肝 DNA 定性检测的临床 PCR 实验室，参加盲样测试（包括三个阳性样本，两 个阴性样本） ，该实验室做出的结果为 5 份样本全部阳性，工作人员将盲样全部阳性的结果 确认后立即发出。 第二天发现当天的室内质控结果也是全部阳性， 并且当天的阳性率明显增 高。请回答： （1）这样做是否正确？（4 分） （2）应该如何处理？（8 分） （3）分析该情况产生的所有可能原因？ (8 分) 7
