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1、.,第九章 细胞系(株)的 建立与鉴定,.,一、基本概念,细胞系 细胞株,.,二、建立细胞系（株）的档案,建立细胞系或细胞株应对如下几方面加以说明： 1.培养细胞的来源 对拟建立的细胞系（株）应交代细胞供体所属物种及供体的年龄、性别、取材的器官或组织。如是肿瘤组织、应说明临床诊断结果、组织来源和病例号等。,.,2.细胞生物学特征,对所培养细胞的生物学性状予以说明。,.,3.培养条件和方法,说明所使用的培养基血清，使用浓度、并说明细胞生存的适宜温度、CO2浓度、PH值等条件。有些细胞生长还需添加的一定附加成分。,.,三、细胞系的鉴定,拟建立的细胞系或细胞株、除说明培养细胞的来源外，还要对其进行一
2、系列的鉴定。,.,1.检定细胞系的纯度,检定细胞系的纯度包括鉴定除主类细胞外还含有哪类细胞及其所占比例多少。,.,2.细胞系的稳定性,细胞连续培养过程中主要指标有无明显变异。使用稳定的细胞系能保证实验结果的准确性、重复性。,.,3.细胞学特征,观察细胞系的形态和表达特征的数据及其与来源细胞的差异。,.,4.微生物污染检查,有无病毒、细菌、真菌、支原体等污染。,.,5.染色体稳定性,包括检查染色体数、染色体分组、染色体分带以及有无标记染色体等内容。,.,6.有无细胞系（株）交叉污染,包括用同工酶谱和抗原抗体反应等鉴定细胞系（株）的细胞特异性。,.,四、细胞系（株）的保藏,生物学家普遍认为，一个国
3、家或地区拥有培养物的种类、数量和质量及对培养物的研究、开发和利用，将对科学和经济的发展产生重大影响。,.,美国典型培养物保藏中心（Amercian Type Culture Collection,ATCC）是现今最大的细胞库。 ATCC网址：http:/www.atcc.org/ ATCC接纳细胞必须检测的项目如下：,.,1.培养简历 2.培养液 3.冻存液 4.细胞活力 5.细胞形态类型,.,6.核型 7.无污染检验 8.物种检测 9.免疫检测 同时提供细胞系(株)建立者和检测者的姓名。,.,中国国家专利局委托武汉大学建立的中国典型培养物保藏中心（China Center Type Culture Collection,CCTCC）保藏了十几个国家的专利培养物1000多株，非专利培养物3000多株，其中包括各类微生物菌种、动、植物细胞系、病毒、单细胞藻类和质粒等。,.,CCTCC E-mail: ,.,中科院细胞库是中科院典型培养物保藏委员会成员库之一。 网址：,.,
