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1、常见性病实验室检测原理、方法,1,性病实验室检测概述,2,病原体 淋球菌 梅毒螺旋体 生殖器疱疹病毒 生殖道沙眼衣原体 乳头瘤病毒 病毒 杜克雷噬血杆菌 衣原体 念珠菌 滴虫 疥虫 阴虱 肝炎病毒 ,病 种 淋病 梅毒: 生殖器疱疹: 生殖道沙眼衣原体感染: 尖锐湿疣: 感染/艾滋病: 软下疳: 性病性淋巴肉芽肿: 念珠菌性阴道炎: 滴虫性阴道病: 疥疮: 阴虱病: 肝炎（乙、丙）： ,性传播疾病(）,3,梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 非淋菌性尿道炎 生殖器疱疹 尖锐湿疣,梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿,50-60年代 经典性病,80-90年代 监测性病,目 前 传染法报告病例
2、监测性病,梅毒 淋病 沙眼衣原体感染 生殖器疱疹 尖锐湿疣,我国主要流行的性传播疾病（性病）,沙眼衣原体: 30%50% 生殖支原体: 10%40% 其它: 20%30%,梅毒 淋病,4,性病实验室检测方法及试剂,我国性病的检测方法及试剂的现状：多样、比较混乱 例1：梅毒 产品：国产54家、 进口7家 种类：凝集、胶体金、 、发光法、荧光法,5,性病实验室检测方法及试剂,（1）淋球菌检测试剂盒 【说明】本试剂盒是利用淋球菌特有的30%过氧化氢试验，经科学放大提高该试验的灵敏度， 【功效】特别适用于分泌物少的慢性淋菌性尿道炎患者，只需少量尿液即可检测。,（2）淋球菌检测试剂条 【说明】 规格：2
3、5盒 产品注册号：粤食药管械（准）字2004第2400222号 （更） 本试剂盒特点1、高灵敏度。2、操作简便，全部反应时间仅为3-5分钟。3、检测结果易于判断。4、适用于脓性、非脓性尿道炎的检测（包括隐性患者）。5、特别适用于大批量体检标本检测。,例2：淋病,（3）淋球菌抗原检测板 【产品名称】淋球菌抗原检测板 【产品编号】Y70 【英文名称】 【产品规格】25T 【检测方法】层析金标 【生产产商】 【商品价格】350.00元 【说明书】下载=,6,性病实验室检测方法及试剂,例3：沙眼衣原体感染 快速抗原检测：5-6厂家 法 荧光抗体标记法 核酸检测法： 、实时荧光、 、 、 快速抗体检测：
4、4-5厂家（非正规方法）,7,主要常见性病实验室检测介绍,梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体感染 生殖器疱疹 阴道滴虫病 细菌性阴道病 生殖器念珠菌病,8,一、梅 毒,9,全国梅毒检测技术规范（送审稿）,10,梅毒及其病原体 样品的采集和处理 病原学检测 血清学检测 核酸检测 实验室生物安全 梅毒血清学检测实验室质量管理,10,常用梅毒检测方法,病原学检测 血清学检测,11,病原学检查,原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 方法：病
5、原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法,12,病原学检查的临床意义,病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。 如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。,13,梅毒血清学检测分类,(1) 非梅毒螺旋体抗体检测试验（非特异性梅毒抗体） (2) 梅毒螺旋体抗体检测试验（特异性梅毒抗体）两类方法。,14,非梅毒螺旋体抗体试验,1、原理： 梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体
6、2、方法： 快速血浆反应素环状卡片试验 () 甲苯胺红不加热血清试验（） 性病研究实验室试验 ()等。,15,结果,16,非梅毒螺旋体抗体试验临床意义,非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。 早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。,17,梅毒螺旋体抗体试验,1、原理：用梅毒螺旋体特异蛋白为抗原，检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体 2、方法： 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 () 梅毒螺旋体血球凝集试验 () 梅毒酶联免疫吸附试验（） 化学发光试验 梅毒免疫层析法-梅
7、毒快速检测 () 梅毒抗体检测（） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（）等,18,梅毒螺旋体抗体试验临床意义,作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如等)初筛阳性标本的确证试验。 梅毒患者经过抗梅治疗后，等梅毒螺旋体抗体试验试验仍可阳性，故等试验阳性不能作为疗效观察的指标。 等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。,19,非梅毒螺旋体抗体试验结果解释示意图,早期,晚期,一期,二期,早期潜伏,晚期潜伏,三期,治疗前 治疗后,阳性,阴性,20,梅毒螺旋体抗体试验结果解释示意图,早期,一期,二期,早期潜伏,晚期,晚期潜伏,三期,治疗前 治疗后,阳性,阴性,21,梅毒血清学试验结果
8、的临床意义总汇,意义 _ _ 排除梅毒 一期梅毒的早期 + + 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外) + - 生物学假阳性 - + 早期梅毒经治疗后,22,梅毒血清学检测意义,检测目的: 临床诊断、血液筛查、流行病学监测 以临床诊断为目的的检测是为了确定梅毒感染的状况。 以血液筛查为目的的检测是为了防止梅毒的经血传播。 以流行病学监测为目的的检测是为了调查梅毒血清学感染率和发病率。,23,梅毒血清学检测检测策略及要求,检测要点 根据目的选择检测方法及检测策略。 可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。 检测试剂要求 所有应用于临床的检测试剂均必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效
9、期内的试剂，有批批检合格证的试剂。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。,24,附：2009年度梅毒血清学 检测试剂评估结果,25,2009年参评试剂厂家(非梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂名称 生产厂家(试剂简称) 批号 有效期 梅毒快速血浆反应素环状卡片 上海科华生物技术有限 20090901 20100906 试验诊断试剂盒() 公司(科华) 梅毒甲苯胺红不加热血清试验 上海荣盛生物技术有限 20090901 20100903 诊断试剂盒() 公司(荣盛) 梅毒甲苯胺红不加热血清试验 北京金豪制药有限公司 200909098 20100704 诊断试剂盒() (金豪) 梅毒甲苯胺红
10、不加热血清试验 北京万泰生物药业有限 M20090803 20100806 诊断试剂盒() 公司(万泰) 梅毒甲苯胺红不加热血清试验 英科新创(厦门)科技有限 2009057602 20100521 诊断试剂盒() 公司(英科) 梅毒甲苯胺红不加热血清试验 郑州安图绿科生物工程 20090818 20100817 诊断试剂盒() 有限公司(安图),26,27,参评试剂厂家(梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂名称 生产厂家(试剂简称) 批号 有效期 梅毒螺旋体抗体诊断试剂(双抗 上海科华生物技术有限公司 20090517 20100515 夹心法)() (科华) 梅毒螺旋体抗体胶体金诊断 艾康生物
11、技术(杭州)有限公 200911208 09-2011 试剂 () 司(艾康) 梅毒螺旋体抗体酶联免疫诊断试剂 北京华大吉比爱生物技术有 20091005 2010.10.05 盒(双抗原夹心法) () 限公司(华大) 梅毒螺旋体抗体诊断试剂(双抗 北京金豪制药有限公司 200909105 2010/09/09 夹心法)() (金豪) 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(化学 北京科美东雅生物技术有限 20091026 20101025 发光法) 公司(科美发光) 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联 北京现代高达生物技术有限 200908003 20100817 免疫法) () 责任公司(现代) 梅毒螺旋体
12、抗体诊断试剂(双抗 北京万泰生物药业有限 N20090302 20100304 夹心法)() 公司(万泰) 梅毒螺旋体抗体诊断试纸盒 北京万泰生物药业有限公司 O20090903 2011-02-07 () (万泰) 梅毒螺旋体抗体酶联免疫诊断试盒剂 英科新创(厦门)科技有限公司 2009097513 20100903 (双抗原夹心酶联免疫法) () (厦门英科新创) 梅毒螺旋体抗体检测试纸条(胶体金) 英科新创(厦门)科技有限公司 2009040919 20101024 () (厦门英科) 梅毒螺旋体抗体诊断试剂(双抗夹心 珠海丽珠试剂有限公司 20090702 20100701 法)()
13、(丽珠),28,29,结 果(非梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂简称 敏感性 (% ) 特异性(% ) 值 金豪 96.2 94.9 0.899 荣盛 94.3 96.9 0.912 新创 92.5 95.9 0.883 安图 92.5 95.4 0.876 万泰 91.5 95.9 0.876,30,结 果(梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂简称 敏感性(%) 特异性(%) 功效率 (% ) 值 科美发光 100.0 100.0 100.0 1.000 万泰 100.0 100.0 100.0 1.000 新创 97.6 100.0 99.0 0.979 丽珠 96.7 100.0 98.7
14、0.972 华大 96.7 100.0 98.7 0.972 科华 100.0 98.9 99.3 0.986 现代 100.0 98.3 99.0 0.979 金豪 99.2 98.3 98.7 0.972 万泰 100.0 99.4 99.7 0.993 英科 96.7 99.4 98.3 0.965 艾康 91.1 99.4 96.0 0.916,31,二、淋 病,32,常用淋病检测方法,直接显微镜检查 分离培养淋球菌,33,直接显微镜检查,原理：男性淋菌性尿道炎患者常有大量黄白色脓性分泌物，其多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。 方法：革兰染色为一传统方法，革兰染色将菌分为二大类，即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。,34,直接显微镜检查的临床意义,男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅4070%
