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1、.,真 菌,主讲人：范国权 电 话：13834529928 E-mail：,第四篇,第三十六章 真 菌,是一大类具有细胞壁和典型细胞核、不含叶绿素、不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。细胞分化程度高，细胞器完整，大部分为多细胞，少数为单细胞结构，分布广、种类多，多数无害，有的有益，少数有害，引起感染、中毒、超敏反应。,与医学有关的有4个亚门,1、接合菌亚门：机会致病性真菌，如毛霉菌、 根霉菌 2、子囊菌亚门：如芽生菌属、组织胞浆菌属、 毛癣菌属、酵母菌属 3、担子菌亚门：食用菌如蘑菇、灵芝、新生隐 球菌 4、半知菌亚门：球孢子菌属、白假丝酵母菌,接合菌（Zygomycotina）,.,接合菌（Z
2、ygomycotina）所致疾病,多变根毛霉病,肺毛霉菌病,子囊菌亚门（Ascomycotina）,担子菌（Basidiomycotina）,半知菌（Deutemycotina）,一、真菌的形态与结构,形态多种多样，大小不一。比细菌大的多。小的如白假丝酵母菌，大的如蘑菇、木耳。 （一）单细胞真菌 1、酵母型：由母细胞以芽生方式繁殖， 菌落似细菌，细胞圆形、椭圆形、圆柱形。530m35m。 2、类酵母菌：芽生方式繁殖，可形成假菌丝。,.,形态结构,单细胞真菌 （酵母型及类酵母型）,菌丝,芽生孢子,酵母菌,多细胞真菌 （丝状菌或霉菌）,单细胞真菌,呈圆形或椭圆形，不产生 菌丝，有假菌丝联结在一 起
3、的假菌丝体,（二）多细胞真菌,1、菌丝：孢子出芽形成芽管，延长呈丝状即菌丝，横径约56 m，长出分枝，交织成团形成菌丝体。 有隔菌丝/无隔菌丝:病原性真菌多为有隔菌丝。 营养菌丝：长入培养基中的菌丝。 气中（生）菌丝：露出培养基表面的菌丝。其中可以产生孢子的菌丝称为生殖菌丝。,.,菌丝 hypha,按功能分： 营养菌丝 气生菌丝 生殖菌丝,.,菌丝形态有助于鉴别,2、孢子（spore）,真菌的生殖结构，由生殖菌丝生成。大多数真菌通过有性或无性孢子繁殖。病原性真菌多产生无性孢子。 （1）叶状孢子：菌丝直接形成。 芽生孢子 关节孢子 厚膜孢子 （2）分生孢子：菌丝或其分枝后的结构顶端或侧面直接形成
4、。 大分生孢子 小分生孢子 （3）孢子囊孢子：菌丝末端形成孢子囊，内有许多孢子。孢子成熟后则破囊而出，如毛霉菌、根霉菌。,.,1）无性孢子,（1）叶状孢子：菌丝直接形成。 芽生孢子 关节孢子 厚膜孢子 （2）分生孢子：菌丝或其分枝后的结构顶端或侧面直接形成。 大分生孢子 小分生孢子 （3）孢子囊孢子：菌丝末端形成孢子囊，内有许多孢子。孢子成熟后则破囊而出，如毛霉菌、根霉菌。,.,2）有性孢子,是由细胞间配合（质配和核配）后产生的孢子，有接合孢子、子囊孢子、担子孢子。有性孢子绝大多数为非致病性真菌所具有。,.,真菌孢子与细菌芽孢的区别,多细胞真菌,菌丝（hypha） 孢子（Spore）,A大分生
5、孢子（小孢子菌）B芽生孢子和假菌丝（假丝酵母菌） C厚膜孢子（假丝酵母菌）D关节孢子（球孢子菌） E孢子囊孢子（毛霉）F小分生孢子（曲霉）,真菌无性孢子的形态,.,孢子囊孢子,.,大分生孢子,小分生孢子,.,关节孢子,芽生孢子,厚膜孢子,二、真菌的培养,（一）真菌的繁殖方式 无性生殖、有性生殖。无性生殖是指不经过两性细胞的结合便产生新的个体。无性繁殖是真菌的主要繁殖方式。,.,（二）真菌的培养,培养特点：低营养、低温度（浅部）22-28、低PH(4.0-6.0)、高湿度和氧 “三低两高”,.,（二）真菌的培养,1.最常用的培养 沙保弱培养基（Sabourauds glucose agar） 4
6、% malt extract agar 2.温度 多数都在22 28oC，但深部感染真菌最适温度为37oC 3.酸碱度：pH4.0 6.0 4.病原菌通常生长缓慢，14周,.,沙保弱培养基成分： 葡萄糖 20g 蛋白胨 5g 琼脂 10g 蒸馏水 500ml,灭菌前沙保弱培养基的pH要调到5.6，从而抑制细菌的生长。,5.三种菌落,酵母型：单细胞菌落，有芽生孢子，无菌丝。 类酵母型菌落：可见假菌丝。 丝状型菌落：多细胞真菌。 真菌菌落的形态、结构和颜色可作为鉴定真菌的参考,真菌菌落,酵母型菌落（yeast colony） 菌落光滑、湿润。无菌丝 隐球菌菌落 类酵母型菌落（yeast-like
7、colony） 外观和酵母型菌落相似，显微镜下可看到假菌丝 白色念株菌菌落 丝状型菌落（filamentous colony） 菌落系由多细胞菌丝体所组成 大多数丝状真菌或霉菌的菌落,三、变异性与抵抗力,对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力 不耐热，菌丝与孢子60 1小时均可被杀死 对2石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞和2.5%碘酊敏感 对常用于抗细菌的抗生素不敏感 灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑等抗真菌药物对多种真菌均有抑制作用,.,不同的真菌可通过下列几种形式致病：1.致病性真菌感染。 2.条件致病性真菌感染 。3.真菌超敏反应性疾病。 4.真菌性中毒症 。5.真菌
8、毒素与肿瘤的关系。,第二节 致病性与免疫性,.,1、致病性真菌感染：外源性真菌感染 浅部真菌真菌的嗜角质性，产生角蛋白酶,水解 角蛋白；皮肤局部繁殖时造成的机械 刺激和代谢产物毒性作用 深部真菌吞噬细胞内繁殖，慢性肉芽肿或组织 溃疡坏死,一、真菌致病性,.,2、条件致病性真菌感染：内源性真菌感染致病性弱，只有在机体免疫力降低时引起感染 内源性真菌感染多见于长期大量使用广谱抗生素、皮质激素、放疗或导管介入、手术等过程易于发生 肿瘤、白血病、糖尿病、免疫缺陷病,.,3、真菌超敏反应性疾病 过敏体质者，吸入菌丝或孢子引起 哮喘、变应性皮炎、荨麻疹等 4、真菌性中毒症（mycotoxicosis） 粮
9、食受潮霉变，摄入真菌或其产生的毒素后 可引起急、慢性中毒称为真菌中毒症，可引 起肝、肾、血液、神经系统损害,与细菌性中毒症区别,.,灰黄霉素引起的剥脱性皮炎,.,黄曲霉毒素是肝癌病因或促发病因的重要因素之一。 肝癌高发区的花生、玉米、粮油作物中，黄曲 霉污染最高，黄曲霉毒素含量高； 该毒素毒性很强，有致癌性，其中B1 致癌作用最强； 该毒素耐热，粮食被污染后，加热不能祛除。 赭曲霉产生黄褐毒素诱发动物肝肿瘤； 镰刀菌T-2毒素诱发大鼠胃癌、胰腺癌、脑肿瘤； 展青霉素引起局部肉瘤； 曲霉菌诱导曲霉瘤等,5、真菌毒素与肿瘤,.,免疫性,天然免疫： 皮肤粘膜屏障作用（皮脂腺分泌物杀菌）； 正常菌群拮
10、抗作用； 吞噬作用（促癣吞噬肽、转铁蛋白）,获得性免疫： 细胞免疫为主；特异性抗体（包括SIgA）阻止真菌转为菌丝和发生粘附,.,.,标本 浅部感染真菌 毛发、皮屑、指甲 深部感染真菌 痰、血液、脑脊液等 直接镜检： 浅部标本-KOH处理后镜检 假丝酵母菌-革兰染色（假菌丝、厚膜孢子） 隐球菌-墨汁负染（厚荚膜） 其他多细胞真菌-特殊染色镜检 分离培养 血清学检查 核酸检测,第三节 真菌的微生物学检查法,.,注意皮肤卫生，避免与患者接触 保持鞋袜干燥，防止真菌孽生 提高机体免疫力 高危人群监测 抗真菌药物（唑类、二性霉素B、丙烯胺类）,第四节 防治原则,小结：真菌与细菌的比较,.,第37章 主
11、要病原性真菌,真菌按其侵犯的部位和临床表现，可分为浅部感染真菌、深部感染真菌和条件致病性真菌。,.,第一节 浅部感染真菌,一、表面感染真菌 这类真菌主要寄居于人体皮肤和毛干的最表层。因不接触组织细胞，很少引起宿主细胞反应。这类真菌在我国主要有秕糠马拉癣菌(Malasseziafurfur)，可引起皮肤表面出现黄褐色的花斑癣，如汗渍斑点，俗称汗斑。此菌具嗜脂性。有报道从92%正常人头皮、躯干、面部、四肢等部位分离出。诱发因素为高温多汗。由于此菌能产生对黑色素细胞有抑制作用的二羧酸，使花斑癣局部色素减退。此菌有粗短、分枝的有隔菌丝和成丛的酵母样细胞。患者皮肤用Wood灯紫外线波长365nm照射或刮
12、取鳞屑照射，能发出金黄色荧光，有助于诊断。,.,花斑癣,花斑癣病理,大面积花斑癣,花斑癣为轻微的，通常无症状的慢性皮肤角质层真菌感染。皮损有糠秕样鳞屑，色素减退或增加。分布全球，热带及亚热带地区十分流行，温带地区常见于夏秋季。患者多为成人，男性多于女性，由直接或间接接触传染。,头皮屑,.,二、皮肤癣真菌,引起皮肤浅部感染的真菌主要是一些皮肤癣菌(dermatophytes)。皮肤癣菌有嗜角质蛋白的特性，使其侵犯部位只限于角化的表皮、毛发和指（趾）甲，而病理变化是由真菌的增殖及其代谢产物剌激宿主引起的反应。皮肤癣，特别是手足癣是人类最多见的真菌病。皮肤癣菌分毛癣菌(Tricho-phyton)、
13、表皮癣菌（Epidermophyton)和小孢子癣菌(Microsporum)3个属。,.,（一）生物学性状 皮肤癣菌可在沙保培养基上生长，形成丝状菌落。根据菌落形态、颜色和所产生的大分生孢子，可对皮肤癣菌作出初步鉴定,.,（二）皮肤癣真菌的致病性,一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变，相同部位的病变也可由不同的皮肤癣菌引起。3种癣菌均可侵犯皮肤，引起手足癣、体癣、股癣、叠瓦癣等。毛癣菌和表皮癣菌可侵犯指（趾）甲，引起甲癣（俗称灰指甲），使指甲失去光泽，增厚变形。此外，毛癣菌与小孢子癣菌还可侵犯毛发，引起头癣、黄癣和须癣,.,指（趾）甲 皮肤 毛发 毛癣菌 属 + + + 皮肤癣菌属 + + -
14、小孢子癣菌属 - + +,.,.,三、皮下组织真菌感染,引起皮下组织感染的真菌主要有着色真菌和孢子丝菌。感染常发生于真菌侵入的外伤部位。感染最初发生于真皮深层、皮下组织或骨，逐渐扩展，最后可达到皮表下。感染一般只限于局部，但也可缓慢扩散至周围组织。,.,（一）孢子丝菌,孢子丝菌属于腐生性真菌，广泛存在于土壤、植物、木材上，常因外伤接触带菌的花草、荆棘等引起感染。感染的主要病原为申克孢子丝菌 。,.,孢子丝菌致病性,致病性： 1.孢子丝菌可经微小损伤侵入皮肤，然后沿淋巴管分布，引起亚急性或慢性肉芽肿，使淋巴管形成链状硬结，称为孢子丝菌下疳。 2.此菌也可经口进入肠道或经呼吸道进入肺，随后经血行播
15、散至其他器官引起深部感染。,.,孢子丝菌下疳,肺孢子丝菌病,.,（二）着色真菌,是一些在分类上接近、引起的疾病症状近似的真菌的总称。感染都发生在暴露部位，病损皮肤变黑，故称着色真菌病(chromomycosis)。 在我国主要有卡氏枝孢霉和裴氏着色芽生菌 着色真菌的分生孢子有3型：树枝型；剑顶型；花瓶型。,.,着色真菌致病性,在人体主要侵犯肢体皮肤。潜伏期约一个多月，长者数月乃至1年。病程可长达几十年。早期皮肤患处发生丘疹，丘疹增大形成结节，结节融合成疣状或菜花状。随病情发展，原病灶结疤愈合，新灶又在四周产生。日久疤痕广泛，影响淋巴回流，形成肢体象皮肿。免疫功能低下时亦可侵犯中枢神经，或经血行
16、扩散。,.,着色真菌病,.,三、地方性流行真菌,这些真菌均属二相性，对环境温度敏感。一般在体内或37培养时呈酵母型，在室温下人工培养变为丝状型。 1.荚膜组织胞浆菌 2. 厌酷球孢子菌 3. 皮炎芽生菌,.,1.荚膜组织胞浆菌(Histoplasmacapsulatum)标本在油镜下检查可见单核细胞或中性粒细胞中有圆形或卵圆形的酵母型细胞（直径15m)。以出芽繁殖，四周有不着色的荚膜样物质。在沙保培养基上室温下生长缓慢，形成白色棉絮样菌落，逐渐从黄色转变为褐色。镜检可见细长有隔菌丝，在菌丝侧面或孢子柄上长有特殊的圆形大分生孢子(815m)，厚壁，四周有棘突，排列如齿轮，这种孢子有诊断价值。,.,2.厌酷球孢子菌：镜检可见有较大的厚壁球孢子(2080m)，内含许多内生孢子(2
