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1、“番茄马铃薯”理想图,通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄马铃薯”植株。,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人 工 诱 导,方法？,促进融合的方法？,融合完成的 标志,植物细胞B,植物体细胞杂交技术过程,成果和未解决的问题,成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出 现自然界没有的新品种。,未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。,如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！,动物细胞也能
2、融合吗？,一、动物细胞融合,细胞A,细胞B,杂交细胞,灭活的病毒,物理法 化学法,仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒,不同DNA的两个细胞,灭活病毒诱导细胞融合,融合后的细胞进行有丝分裂,1、动物细胞融合过程,思考题,1、植物体细胞杂交前做何处理？怎么处理？,去壁 酶解法，如纤维素酶或果胶酶,2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？,无需，因为动物细胞无细胞壁,3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？,离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法,4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法？,能 还可以利用灭活的病毒进行诱导,5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再
3、进行组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？,不能,6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？,思考题,2、动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。,7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？,思考题,利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞,8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？,生产单克隆抗体,细胞融合与融合诱导细胞融合物质：,诱导剂：仙台病毒、聚乙二醇诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细
4、胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。,细胞融合技术应用于哪些方面？,细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。,1.抗体是由何种细胞产生的？ 2. 如何得到抗体？,二、单克隆抗体,抗体,1、抗原 动物体内,抗原不纯,抗体不纯,2、特异性差、纯度低；,产量低、反应不够灵敏,二、单克隆抗体,设计方案： 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？,杂种细胞,二、单克隆抗体,？,？,诱导其融合的方法有哪些？,抗原,浆细胞,2.制备过程：,二、单克隆抗体,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,细胞融合后培养液中有几种细胞？,杂种细胞,整个制
5、备过程要经过几次筛选?,（第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）,3.单克隆抗体的应用：,作为诊断试剂,用于治疗疾病和运载药物,生物导弹,特异性高、灵敏度高等优越性。,主要用于制备 单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法 （同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞
6、分散后诱 导细胞融合,去除细胞壁后诱 导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、 植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株,下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 A培
7、养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变 D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞,A,C,生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是 A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体 D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体,C,一
8、只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种 D改变动物的基因型,D,下列哪项属于克隆 A将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞 D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系,试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下面叙述正确的是 A.都属于无性生殖能保持母本性状 B.都是细胞工程的技术范围 C.都充分体现了体细胞
9、的全能性 D.都不会发生基因重组和变异,D,B,下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：,（1）A中放置的是动物器官或组织。它一般取自 。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ， 然 后用 酶处理，使细胞分散开来，这样做的目的是 。 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第 代，到这时的培养称为 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ，再分装。 （5）在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是 。,CCTV一2于2005年4月7日报道，卫生部4月6日发布了苏丹红危险性
10、报告评估，报道中提到苏丹红一号是一种人工色素(工业染料)，它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员欲采用一定的技术手段探究苏丹红是否对人体有危害。请回答： （1）根据所学的动物细胞工程知识，你认为采取下列哪种技术手段最合适： A动物细胞融合 B动物细胞培养 C胚胎移植 D核移植,（2）根据上述选择，请你设计一个实验来探究“苏丹红一号”是否对人体有危害。 1该实验的原理是： 。 2实验方法步骤： 材料准备：从医院妇产科获取所需要的原材料组织，浓度为0.09“苏丹红一号”试剂，高倍显微镜，培养瓶若干，配制好的培养液，剪刀，培养箱，所需要的酶。 制备检测细胞： a配制细胞悬浮液： 。 b将悬浮液分装到
11、两个以上的培养瓶中，置于培养箱中培养一段时间。 检测过程： 。 实验结果观察、分析得出结论。(略),动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是 A融合的原理 B融合的过程 C融合的诱导手段 D融合的结果,C,下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的有,A0处 B1处 C2处 D3处,（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用 处理，除去了 ；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是 。融合完成的标志是 。 （2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用 技术把D培养成植株。,（3）若A、B是动物细胞，一般取自 ，然后用 使其分散开来；由A、B到C的过程中，
12、常用的不同于植物细胞融合的手段是 ，所形成的D称为 ，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有 。,（1）纤维素酶和果胶酶 细胞壁 电刺激、振动、离心 产生新的细胞壁 （2）植物组织培养,(3)动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 胰蛋白酶 灭活的病毒诱导 杂种细胞 一定的流动性,（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了 。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_，图中B为 。 （5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有 种，用来培养的D细胞应该是 。从中选择出它的方法是 培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中
13、培养和 。,(4)抗原 效应B细胞 抗体和记忆细胞 骨髓瘤细胞 (5)3 杂交瘤细胞 用特定的选择培养基 小鼠腹腔内增殖,若人基因的作用不受鼠基因影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的 号染色体上。,将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如有表（“+”有，“”无）测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。 结果是：B株有a酶活性；A、B、C株均有 b酶活性：A、B株有c酶活性；C株有d酶活性；A、B、C株均无e酶活性。,比特尔等在1941年提出了“一个基因一种酶假说”。在生物体内，各类物质或分子是经过一系列代谢步骤合成的，每一步都受特定的酶所催化。现假设已分离到某微生物的5种突变体（15），它们都不能合成生长所需的物质C，但是该微生物在合成途径中，物质A、B、C、D、E都是必需的，但不知它们的合成顺序；于是分析了这几种物质对各种突变体生长的影响。结果如下：,（1）上述A物质合成的顺序为： 。 （2） 物质是突变体3的生长因子。 （3）突变体1在 两种物质之间合成被阻断。原因是 。,基因突变不能合成催化B D过程的酶,E A C B D G,G,B与D,
