动物生理学实验课件7讲诉

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1、实验八 尿生成的调节,实验目的 1. 掌握输尿管插管技术,学习尿量的记录和测量方法; 2. 观察神经体液因素及药物对尿生成的影响,并分析其作用机制。,实验原理 尿生成的过程包括:肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过程的因素均可引起尿量的改变。 尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因素,观察尿量及其成分的变化。,尿生成的生理基础,原 理 终尿生成滤过液(原尿)重吸收量分泌(比较少,可不考虑) 有效滤过压毛细血管压(胶体渗透压囊内压) 凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成,从而引起尿量的改变,有效滤过压毛细血管压-(胶体渗透压囊内

2、压),本实验用两道同步记录 1道记录血压 2道记录尿量,实验对象:家兔,实验器材和药品 器材:BL-420 生理机能实验系统、 50ml量筒、手术器械一套、兔手术台、输尿管插管、玻璃分针、注射器(1ml、5ml、20ml)、压力换能器、记滴器、纱布。 试剂:生理盐水、20的氨基甲酸乙酯、20葡萄糖、垂体后叶素、0.01%肾上腺素。,步骤 (一)麻醉、固定(25乌拉坦4ml/kg) (二)颈部手术 1做颈部切口,逐层分离皮肤、皮下组织、肌肉(钝性分离),暴露气管。 2气管插管。 3分离双侧迷走神经,穿线备用。,(三)尿液收集方法 1. 输尿管插管法 在耻骨联合上缘作46cm正中切口(切勿伤及其下

3、方的膀胱),剪口以能将膀胱拉出体外为度(勿因剪口过大暴露其他器官组织)。将膀胱翻至体外(勿使肠断外露,以免血压下降)。膀胱的正常位置是在输尿管腹面,当轻轻拉出并翻转膀胱时,输尿管则位于膀胱的前方。仔细辨认并分离一侧输尿管(莫损伤伴行血管),各穿两条线备用,分别将输尿管近膀胱端结扎,在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口(可先用玻璃分针探一下),把预先充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管(1cm左右),用线结扎固定。,2. 膀胱套管法 腹部剪毛,耻骨联合上方正中剪口3-5cm,沿腹白线剪开腹壁,将膀胱向尾侧移至体外,辨认膀胱和输尿管的解剖部位,用针筒抽取尿液6ml,装入两只试管。然后在膀胱顶部选

4、择血管较少处,作一直径约1.5cm的,在其中央沿纵向剪一小切口,插入膀胱插管(或膀胱漏斗)。把切口周围的缝线拉紧,结扎固定。插管口最好正对输尿管在膀胱的入口处,但不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管。膀胱插管的另一端则用导管连接至记滴器或刻度试管,记录尿流量。手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。用线结扎膀胱颈部,以阻断同尿道的通路。,(四) 连接换能器和记滴器 输尿管插管或膀胱套管与记滴器相连,使引流出的尿液 滴在记滴器的两个电极之间,构成一个完整的电通路,记录通道会记录下来一次尿滴。,观察项目 手术和实验装置安装完毕后,记录正常血压和尿量曲线,然后依次进行下列实验,观察血压和尿量的变化。注

5、意:每项实验前都要记录尿量作为对照。,记录正常每分钟尿形成的滴数。 耳缘静脉注射生理盐水20ml,观察尿量的变化 耳缘静脉注射110000肾上腺素0.5ml,观察其尿量变化。 耳缘静脉注射20%葡萄糖液10-15ml,观察尿量变化 结扎并剪断两侧迷走神经,用连续单刺激其外周端,使血压下降,观察尿量变化 。 耳缘静脉注射抗利尿激素2U(0.2ml),观察尿量变化 。,结果分析,一次快速注射20ml生理盐水,使血容量增加,会引起下列情况: (1)血液被稀释,血浆胶体渗透压下降,肾小球有效滤过压增加,肾小球有效滤过率增加,尿量增加。 (2)血容量增加,肾小球血浆流量增加,使尿液滤过增多,也促使尿液增

6、加。 (3)血容量增加,刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器,冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核,使抗利尿激素(ADH)的分泌与释放减少,远曲小管,集合管对水的重吸收减少,尿液增多。,结果分析,静注大剂量肾上腺素后,血压上升(使与外周小动脉平滑肌中的受体相结合,使之收缩)尿量减少 机制:肾小球毛细血管血压高低既受全身动脉血压的影响,又受肾小球入球小动脉和出球小动脉的口径比例(也就是血管平滑肌舒缩程度)的影响,而后一种因素比前一种因素更为重要。可使肾小球入球小动脉收缩,使肾小球毛细血管中血流量降低,滤过率减少,尿量减少。 因此在临床上抢救休克病人,使用大剂量的肾上腺素时一定要注意患者尿量的变

7、化。,结果分析,20%葡萄糖4ml/Kg注入后,可见尿量立即大量增加 因为加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的肾糖阈,经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收,致使小管液中出现较多的葡萄糖,使肾小管液中的渗透压增加,防碍水的重吸收,于是水随葡萄糖一起排出,尿量增加。此称为渗透性利尿。 此时尿液作生化实验,可检测出尿糖。,结果分析,刺激迷走神经,心输出量减少,尿量减少,迷走兴奋,结果分析,抗利尿激素 antidiuretic hormone, ADH 来源:下丘脑视上核和室旁核神经元分泌,神经垂体 贮存、释放 作用:提高远曲小管和集合管对水的通透性; 增加髓质组织间液的溶质浓度 机制:

8、ADH V2 GS AC cAMP PKA 使AQP-2镶嵌在管腔膜上形成水通道,增加水的重吸收,思考题 1. 试分析尿生成的主要环节,讨论各因素影响尿生成的机制。 2. 一次性口服大量清水和静脉大量生理盐水时,尿量变化有何异同?其作用机制如何?,实验前给家兔喂食足量的青菜或水,否则应在手术时给予静脉补液。 每一项处理因素前,要求完整对照。等前一项影响因素 基本消失、血压和尿量基本恢复后再实施下一步新的项目操作。实验项目顺序可根据实验情况做调整。 保护耳缘静脉。静脉注射尽量从耳缘静脉远心端开始,逐步向近心端移行。亦可保留耳缘静脉输液用的头皮针,方便静脉给药。 输尿管插管防止出血及插入夹层。输尿管手术的难度较大,应注意防止导管被血凝块堵塞,或被扭曲而阻断尿液的流通。,注意事项,人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。,

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