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1、痰诱导,1,诱导痰检测在气道炎症评价中的应用,痰液检查已经有100多年的历史，最初主要用于肺结核和肺肿瘤的诊断。未经处理的痰液涂片，细胞分布不均，而且混在粘液中不易识别，使痰细胞学检查的准确性受到影响。1958年首次建立了诱导痰检测方法，对不能自然咳痰的患者通过吸入雾化高渗盐水诱导痰液生成，利用二硫苏糖醇等粘液溶解剂对痰进行处理，消除粘液的影响。 并进一步分析痰液中细胞成分和上清液可溶性介质，用来研究气道炎症性疾病（如哮喘、COPD、间质性肺疾病），感染性疾病、肿瘤诊断等。,2,诱导痰流程,一:评估患者： 1.一般情况良好，无哮喘急性发作、慢性阻塞性肺病（肺功能FEV1%低于70%而患者一般情
2、况良好者，可予以10min以内的诱导操作；如果高于70%，而患者有急性喘憋症状者，则避免诱导诱发气道痉挛）。动态结合患者临床症状评估，询问患者服用药物情况。如患者用药史、激素、抗过敏药等。（患儿或情况不佳的患者可考虑用生理盐水进行雾化，以降低风险） 2.询问患者检查的项目，安排检查的先后顺序（ENO优先，肺功能其次，痰诱导最后进行）。 3.诱导前准备：喷万托林300-400ug，静待5min后进行雾化。如果患者有当日使用万托林史，可根据患者当时临床症状决定用药与否。,3,诱导痰流程,二:雾化 1. 高渗盐水（400ml0.9%生理盐水+12g浓盐水配比成3%的高渗盐水），流速1ml/min可获
3、得较高的诱导成功率。 2.雾化时间：10-15min后要求主动咳痰，肺通气功能较差的患者可缩减为5-10min，如痰量不足可继续进行诱导，但累计时间不超过30min。,4,诱导痰流程,三:注意事项： 1.重症哮喘患者不宜进行高渗盐水诱导，当FEV1小于70%时，对患者进行自然咳痰或等渗盐水诱导。 2.诱导前必须准备好相关的抢救设备和药物，诱导过程中密切观察患者表现，以防气道收缩导致呼吸困难。（具体抢救措施参照肺功能室的哮喘发作抢救措施） 3.诱导过程中注意尽量减少唾液对痰的污染和稀释，如每次咳痰前均要漱口，尽量吐净唾液后立即咳痰。（留痰后及时分离选取标本） 4.独立及安静的雾化空间，清晰的雾化
4、诱导指引。 (1)向患者讲述雾化程序，观察痰液性状，留取粘稠的白色或黄色痰液0.25-0.5ml，摒弃口水、唾沫、鼻腔分泌物。选取方式有两种：a、全取法。b、选取法。 (2)评判痰液是否合格标准（显微镜下取材） 5.每个患者做完检测，均需酒精喷洒操作台消毒。,5,诱导痰流程,四:痰处理： 1、痰标本冷藏保存：4，尽可能在3小时内处理。 2、处理标本： 1）裂解：全取法是不经挑选，咳出来的全部收集起来，选取法是经挑选的。使用裂解剂0.1%（二硫苏糖醇-DTT），全取法收取的痰液加入与痰液等量（ml）的DTT；选取法则是将选好的痰标本称重（g），加入重量数值4倍（ml）的粘液裂解剂。37环境水浴下
5、水浴5-10分钟，同时震荡器进行震荡充分裂解（time，frequence）。较浓的痰栓需要增加裂解时间。 2）震荡：充分使痰液与裂解剂混匀，促进裂解。（震荡仪）（time） 3）过滤：使用专用过滤纸(48目)，将充分裂解的痰液过滤，去除杂质。 4）离心（3000转速，10分钟；3600转速，6分钟）离心力， 5）涂片，充分风干。或用甩片机 6）标本固定，放入10%甲醛固定10min（不超过48h），清水冲洗3min。 7）染色：苏木素-伊红染色（苏木素目前染色1min，冲洗3min，放入1：99盐酸酒精中脱色2-3秒，冲洗3min，伊红染色，冲洗至少6min）。,6,诱导痰流程,五:所用相关器材材料如下: 超声波雾化器 电子天平（g） 水浴箱 振荡器 离心机 EP管 移液器（1000ul 100ul ）枪头 试管 显微镜 玻片 48目尼龙馏网 一次性口嘴、雾化管道、培养皿 。 水平层流净化操作台,7,试剂 LPS 二硫苏糖醇DTT 乙酸钠 甲醛 苏木素 伊红 盐酸 100%酒精,8,
