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1、第3讲 实验一 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,还原糖+斐林试剂 _ 蛋白质+双缩脲试剂_,脂肪+,苏丹染液橘黄色 苏丹染液_,砖红色沉淀,红色,紫色,1.在检测脂肪的实验中，若选择花生种子作为实验材料，必须提前浸泡3 h4 h，以便于切片。 2.在蛋白质的检测实验中，动物材料常用的是鸡蛋的蛋清，但使用时必须稀释，以防反应时粘固在试管内壁上，使反应不彻底且不易洗刷试管。,1.还原糖的鉴定 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织,结论：组织样液中含有可溶性_,还原糖,橙黄色,低倍显微镜,34滴,紫色,蛋白质,1.为什么选材应选用颜色较浅或者无色且含还原糖量高的组织材料？ 提示：材料的颜
2、色会干扰实验结果的观察，因此不能选择 有颜色的材料，如西瓜、胡萝卜汁、血液、含还原糖多的绿色叶片等；含还原糖量高便于检测，但含糖量高的甘蔗、甜菜（含蔗糖）和马铃薯（含淀粉）也不能选择，因为蔗糖、淀粉为非还原糖。,2.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同，但在使用时，斐林试剂 甲液与乙液必须混合使用，而双缩脲试剂则先加A液，再加B 液，请分析原因。 提示：鉴定还原糖的原理是新制Cu（OH）2与还原糖反应， Cu（OH）2被还原为Cu2O（砖红色）；而检测蛋白质需要在 碱性环境下进行反应，先滴加双缩脲试剂A液的目的是制造 碱性环境。,【技巧点拨台】 实验中重要操作归纳 （1）加热。只有鉴定还原糖时，需要水
3、浴加热煮沸才能出现砖红色沉淀，其余两个实验不需加热。 （2）用量。只有鉴定蛋白质时，必须保证双缩脲试剂A液过量，且加液体的次序不能颠倒。因为过量的B液会产生Cu（OH）2蓝色沉淀，干扰实验的紫色现象。 （3）显微镜。脂肪鉴定时可用显微镜，如要观察橘黄色油滴，则一定要在显微镜下观察。,实验方法 选择实验材料的注意事项 【理论指导】 任何一个实验都离不开实验材料的选择，“选对材料就等于实验成功了一半”，对实验材料的选择应把握以下几个方面： 1.符合实验的要求 选择的实验材料应含有符合实验目的要求的观察对象。如观察叶绿体不能选择根细胞，因为根细胞不含叶绿体；观察动物细胞的细胞核不能选择哺乳动物成熟的
4、红细胞，因为此细胞没有细胞核。,2.符合实验的原理 实验原理是完成实验的依据，选择的材料既要保证反应原理的实现，又要方便检测结果的观察。如在鉴定还原糖时不能选用甘蔗，因为它含有丰富的蔗糖，还原糖的含量少，不利于与斐林试剂发生反应。,3.选取易于获得的材料 要保证实验的顺利进行，应选取在当地容易获得，又比较便宜的材料。如生物组织中淀粉的鉴定实验不宜选取板栗作实验材料。 4.选取易于观察的材料 选取的实验材料观察现象越明显，越有利于得出正确结论。如观察植物细胞的液泡时不能选用叶肉细胞，因为叶肉细胞的液泡基本无色，并且叶绿体的绿色会对实验结果产生干扰。,5.选取易于操作的材料 选取的材料易于操作，有
5、利于实验的顺利进行。如鉴定生物组织中的脂肪，不能将芝麻种子做切片观察，因为芝麻种子很小，不容易操作。,【典例分析】 在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中，提供了如下备选实验材料： 苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、花生、大豆。 【分析】实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：,【拓展】 （1）鉴定还原糖时，为什么不选取甘蔗或韭菜的叶？ 提示：甘蔗中主要含有蔗糖，含还原糖很少，不符合选材的要求；韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。 （2）鉴定脂肪时，为什么不选取核桃？ 提示：核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。 （3）如果把
6、大豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽鉴定蛋白质吗？ 提示：不能，因为大豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。,1.在可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述错误的是( ) A.马铃薯块茎中含有较多的糖且近于白色，可用于进行可溶性还原糖的鉴定 B.花生种子富含脂肪且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的好材料 C.大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D.鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料,【解析】选A。用于可溶性还原糖鉴定的材料的要求是：含糖量高，且必须是还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）。颜色较浅或近于白色，便于观察。马铃薯块茎中含有的糖大多是淀粉，还原糖含量极少。
7、用于脂肪鉴定的材料是富含脂肪的种子，花生种子富含脂肪，是用于脂肪鉴定的理想材料。用于蛋白质鉴定的材料是富含蛋白质的生物组织，常用的是大豆和鸡蛋清（蛋白）。,2.下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热( ) A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中 B.苏丹和苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D.碘液鉴定淀粉时 【解析】选A。可溶性还原糖鉴定需要水浴加热煮沸，其余三项都不需要。,3.以花生子叶为材料进行脂肪的鉴定时，制作临时装片的正确步骤是( ) 盖盖玻片 切子叶 苏丹染液染色 酒精洗去浮色 A. B. C. D. 【解析】选D。制作临时装片的步骤包括切片、制片，其中制片
8、过程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸馏水和盖盖玻片。,4.下列各组中的前项为需鉴定的物质，中项为使用的试剂,后项为产生的颜色，正确的是( ) A.葡萄糖、斐林试剂、砖红色 B.脂肪、苏丹染液、 红色 C.蛋白质、双缩脲试剂、蓝色 D.脂肪、苏丹染液、 橘黄色 【解析】选A。葡萄糖和斐林试剂反应产生砖红色沉淀；脂肪与苏丹染液反应呈现橘黄色，脂肪与苏丹染液反应呈现红色； 蛋白质与双缩脲试剂反应呈现紫色。,5.（2012梧州模拟）将小麦种子分别置于20 和30 培养箱中培养4天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液和提取液。取3支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按如图加入等量的提取液和蒸馏水，4
9、5 水浴保温5分钟，立即在3支试管中加入等量斐林试剂并水浴加热煮沸2分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是( ),A.甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色 B.甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 C.甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色 D.甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 【解析】选D。萌发的小麦种子可产生淀粉酶，能将淀粉分解成可溶性还原糖，而在不同的温度条件下，产生酶的量是不同的，30 时酶产生量远大于20 时，因此在提取液中产生酶的量远大于提取液，由此产生的还原糖的量：乙甲丙，因此用斐林试剂鉴定甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色Cu（OH）2的颜色。,6.组成生物体的化合物有可溶性还原糖(葡萄糖、果糖、乳糖)
10、、脂肪、蛋白质等物质。能与某些试剂发生反应，产生特定的颜色变化，从而鉴定生物组织或分泌物中这些化合物的存在。现欲鉴定牛奶中是否有乳糖、脂肪和蛋白质的存在。,（1）该实验所需的材料和试剂至少要有牛奶、_、_、_和仪器_等。 （2）对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述正确的是( ) A.都含有氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液 B.斐林试剂的配制是将45滴的0.05 g/mL的硫酸铜溶液滴入 2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中即成 C.双缩脲试剂是将34滴的0.01 g/mL的硫酸铜溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中混合而成的 D.双缩脲试剂含有两种试剂：0.1 g/mL的氢氧化钠溶液
11、和 0.05 g/mL的硫酸铜溶液,（3）在用双缩脲试剂鉴定牛奶中是否含有蛋白质时，正确的操作是( ) A.2 mL牛奶稀释液中先加0.1 g/mL的NaOH溶液2 mL，再加34滴0.01 g/mL的CuSO4溶液 B.2 mL牛奶稀释液中先加34滴0.01 g/mL的CuSO4溶液，再加0.1 g/mL的NaOH溶液2 mL C.2 mL牛奶稀释液中，同时加入0.1 g/mL的NaOH溶液和 0.01 g/mL的CuSO4混合液2 mL D.在NaOH和CuSO4混合液2 mL中加入2 mL牛奶稀释液,（4）实验需要用显微镜的是( ) A.还原糖的鉴定 B.蛋白质的鉴定 C.脂肪的鉴定 D
12、.全都要,（5）鉴定脱脂奶粉是否属于假冒伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是( ) A.双缩脲试剂 B.二苯胺试剂 C.斐林试剂 D.苏丹染液 （6）某些单子叶植物中，如大蒜、韭菜等叶子中含有大量的还原糖，但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料，原因是_。,【解析】（1）鉴定牛奶中是否有乳糖、脂肪和蛋白质三种成分，分别用斐林试剂、苏丹(或苏丹)染液、双缩脲试剂，同时还需要显微镜。 （2）斐林试剂：0.1 g/mL的NaOH溶液+0.05 g/mL的CuSO4溶液，等量混合，现配现用；双缩脲试剂：A液0.1 g/mL的NaOH溶液+B液0.01 g/mL的CuSO4溶液，先加A液，再加B液少量，且
13、次序不能颠倒。,（3）双缩脲试剂鉴定蛋白质的正确操作：向2 mL牛奶稀释液中滴加2 mL双缩脲试剂A液，摇匀，再滴加34滴双缩脲试剂B液，摇匀即可。 （4）脂肪鉴定中观察脂肪颗粒的存在，需要用显微镜。 （5）脱脂奶粉若是假冒伪劣产品，可表现为没有脱脂或蛋白质含量少或存在过多的淀粉代替蛋白质，因此可用A、C、D三种试剂鉴定，但一定不用B试剂鉴定。 （6）植物叶片色素含量多，颜色较深，对还原糖和斐林试剂的颜色反应起到了遮掩作用，不宜作为实验材料。,答案：（1）斐林试剂 苏丹(或苏丹)染液 双缩脲试剂 显微镜 （2）A （3）A （4）C （5）B （6）这些叶子的颜色较深，对还原糖和斐林试剂的颜色
14、反应起到了遮掩作用,7.某生物学习小组对动物在空腹状态和进食后，血液和尿液中是否含有葡萄糖进行了实验研究。他们从一健康的成年狗身上采集了以下四种实验材料： a.空腹时的血液 b.进食1小时后的血液 c.空腹时的尿液 d.进食1小时后的尿液 注：材料a、b都加入了柠檬酸钠（一种抗凝剂） 请回答下列问题：,（1）如果用斐林试剂进行实验，该试剂在使用时应_，实验材料与试剂混合后，必须进行_。 （2）材料a、b必须进行如何处理才能用于该实验？为什么要进行这项处理？_ _。 （3）请你预测这四组实验可能出现的现象，并做出简要解释： _ _； b._ _； c. _ _； d. _ _。,【解析】斐林试剂
15、极不稳定，要现用现配，且反应时要水浴加热。血液呈红色，会掩盖氧化亚铜的颜色，故要先去除血细胞。 本实验原理是：如果血液和尿液中有葡萄糖，会与斐林试剂反应有砖红色沉淀产生，否则不会产生砖红色沉淀。通常情况下，因肾小管的重吸收作用，尿液中不含葡萄糖。暂时性血糖含量过高，会出现尿糖。,答案：（1）现用现配 水浴加热 （2）静置一段时间，使血细胞沉淀，取上清液进行实验。因为血液呈红色，若直接进行实验，难以判断是否出现显色反应 （3）a.出现砖红色沉淀，因为血液中含有葡萄糖 b.出现砖红色沉淀，因为血液中含葡萄糖 c.不会出现砖红色沉淀，因为空腹时尿液中不含葡萄糖 d.可能不出现砖红色沉淀，是由于尿液在形成过程中，葡萄糖被全部重吸收；也可能出现砖红色沉淀，因为一次性食糖过多，造成暂时性血糖含量过高，出现尿糖,
