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1、第 1 部分,专 题 2,课题 1,理解教材新知,把握热点考向,应用创新演练,知识点一,知识点二,考向一,考向二,1.培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源和 生长因子等营养物质。 2实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干 热灭菌和高压蒸汽灭菌等。 3固体培养基的配制过程为：计算称量溶化灭 菌倒平板。 4平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法。 5消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微 生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和 芽孢。,自读教材夯基础 1培养基 (1)概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出的供其 的营养物质。,营养物质,生长繁殖,液体培养基,固体培养
2、基,菌落,(3)营养成分：水、无机盐、 、 ，此外还要满足微生物生长对 、特殊营养物质及 的要求。 2无菌技术 (1)目的：防止 污染。 (2)方法消毒和灭菌。,碳源,氮源,pH,氧气,外来杂菌,温和,表面,内部,芽孢和孢子,煮沸,巴氏,化学药剂,强烈,所有,芽孢,孢子,1下面是察氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题：,20 g 3 g 1 g 1 g 0.5 g 0.01 g 20 g,(1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基？为什么？ (2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是什么？ (3)蔗糖提供的是哪类营养物质？NaNO3提供的是哪
3、类营养物质？ (4)在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物所需要的哪些条件？ 提示：(1)固体培养基。因为该培养基加入了凝固剂琼脂。,(2)4种成分。分别是碳源、氮源、无机盐和水。 (3)蔗糖提供的是碳源。NaNO3提供的是氮源和无机盐。 (4)满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。 2探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。 提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。,跟随名师解疑难 1培养基的成分,2.培养基的种类 (1)按物理性质分：,(2)按培养基功能分： 选择培养基：允许特定种类
4、的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，如无氮培养基可选择培养固氮微生物。 鉴别培养基：微生物或其代谢产物与培养基某些物质发生特定的颜色反应，以鉴别不同微生物。,自读教材夯基础 1制备固体培养基 计算：依据牛肉膏蛋白胨培养基 比例，计算各成分 的用量 ：牛肉膏比较黏稠，可用称量纸称取，牛肉膏和蛋 白胨都易吸潮，称取的动作要迅速，称后及时盖 上瓶盖,配方,称量,：牛肉膏和称量纸水取出称量纸加蛋 白胨和氯化钠加琼脂(注意：不断用玻璃棒 搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)补加蒸 馏水至100 mL 灭菌 ：待培养基冷却至50 左右时，在 附近 倒平板,溶化,干热灭菌,倒平板,酒精灯火
5、焰,2纯化大肠杆菌 (1)方法： ：通过接种环在 固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种逐步 到培养基的表面。 ：将菌液进行一系列的 ，然后将不同 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (2)鉴定：将接种后的培养基和一个 的培养基都放入 恒温箱中，培养12 h和24 h后，分别记录观察。,平板划线法,琼脂,连续,划线,稀释分散,稀释涂布平板法,梯度稀释,稀释度,未接种,37 ,(3)菌种保存：,频繁,长期,4 ,20 ,污染,产生变异,甘油,1培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板，你用什么办法来估计培养基的温度？ 提示：可以用手触摸，感觉上以刚不烫手为准。 2在用平板
6、划线法接种大肠杆菌时，第一次划线前、每次划线前及划线操作结束后，都要灼烧接种环，请分析其目的分别是什么。,提示：,3在纯化大肠杆菌操作中，如何验证培养基灭菌是否彻底？ 提示：将接种后的培养基和一个未接种的培养基，都放在37 恒温箱中培养，观察并记录结果。,跟随名师解疑难 1微生物培养中有关实验操作的注意事项 (1)倒平板操作： 培养基灭菌后，需冷却至50 左右时才能倒平板，原因是琼脂在44 以下凝固。 培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开。 整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。 平板冷凝后要倒置的原因：防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染。,若倒平板时，培养基溅在皿盖和
7、皿底之间的部位，这个平板应丢弃。 (2)平板划线操作： 第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。 灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 划线时最后一区域不要与第一区域相连。 划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。,2稀释涂布平板操作 (1)稀释操作时：每支试管及其中9 mL水、移液管均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰12 cm处。 (2)涂布平板时：稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意： 酒精灯与培养皿的距离要合适。 吸管头不要接触任何其他物体。 吸管要在酒精灯火焰周围使用。,3平板划线法
8、和稀释涂布平板法的比较,例1 下列描述正确的是() A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B除水以外的无机物仅提供无机盐 C凡是碳源都能提供能量 D有些无机氮源也能提供能量,解析对异养型微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。如蛋白胨既是碳源又是氮源和能源，葡萄糖是碳源同时又是能源。除水以外的无机物种类繁多，如CO2和N2是无机物，但也是某些微生物的碳源和氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能源。 答案D,(1)在微生物所需要的化合物中需要量最大的
9、是碳源，新陈代谢同化作用类型的划分也是根据是否能合成含碳有机物为依据的，能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异养型。 (2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既可能是碳源又可能是氮源、能源。,例2 有关平板划线操作正确的是 () A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划35条平行线即可 D最后将平板倒置，放入培养箱中培养,解析在培养基上接种时，一定要做到无菌操作，以防止杂菌污染影响实验或研究的结果。微生物无处不在，包括空气中也充满了各种微生物，所以无菌操作显得很困难，但在酒精灯火焰附近约10 cm的四周为无菌区，因而菌种试管和待接种试管管口不能离开火焰附近，接种环、棉塞也不能离开火焰附近。接种完毕之后为了防止菌体污染，要在火焰上灼烧管口和接种环。为防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将平板倒置。 答案D,要建立有菌观念，接种用具、器皿、空气中都充满了微生物，都有被污染的可能，必须严格地消毒灭菌。同时，在实验室中，不可吃东西、喝水，离开时一定要洗手，以防被微生物感染。使用过的培养基要经过高压蒸汽灭菌后才能丢弃，以免污染环境。,
