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1、第45讲微生物的利用 第46讲酶的应用 第47讲生物技术在食品加工中的应用 第48讲 浅尝现代生物技术,从近几年新课标地区高考题看,选修1生物技术实践作为选考内容,命题主要的呈现形式是填空题。鉴于“一标多本”的高考命题思路和课标内容要求,应重点通过教材实例,提炼出有关生物技术的原理、实验设计的思想方法与思路、动手操作等,同时要结合必修部分有关内容的应用进行整合复习。命题特点如下: 1“拼盘式”考查:结合实验,把相关的知识点进行有机的整合,特点是跨度较大,考查的知识面较广。如考查果酒、果醋、泡菜制作的原理、过程及注意事项;主要的,发酵微生物类群等。 2重视实验操作:如无菌技术的操作(2009年辽
2、宁、宁夏卷),微生物的分离和培养技术,培养基对微生物的选择作用,植物组织培养的过程(2009年上海高考生物卷),果胶酶在果汁生产中的应用等。 3以生物技术“流程图”的形式考查:如利用细胞培养技术生产人参皂苷(2009年山东高考理综生物卷),制备相关酶的流程图(2009年广东高考生物卷)。 由于本单元内容多、时间紧,临近一轮复习结束,基础知识和基本能力的考查仍是不变的主旋律,所以复习时要注意老师分析本单元中知识的重点、难点、考点和疑点。,复习的要点如下: 1强化记忆:立足课本,全面复习基础考点,在理解知识的基础上牢固记忆。比如将类似的、易混淆的知识点或联系紧密的知识点做好笔记,并对其进行分类、比
3、较和归纳。 2理解实验操作每一步的目的:明确实验目的,真正理解实验的原理、方法;认真做好本单元课时作业,及时排查作业中暴露出的问题,及时纠正,认真反思;通过复习,把所学课本中的原理、方法迁移到解决具体实例中。,3抓住核心概念或过程进行联想。针对每一专题核心知识进行分层次,条目化,形成完整的知识结构。如果酒、果醋、泡菜制作可以就发酵原理,实验操作,实验关键点进行分类联想;微生物的实验室培养要牢记无菌操作的方法、培养基配制、大肠杆菌的纯化操作;加酶洗衣粉洗涤效果的测定一定要联系当地实际情况进行比较等。,1由于本书是实验技能专题,尽量把考纲中所列实验集中,观看实验录像,不失为高三复习的一种辅助教学方
4、法。 本书要指导学生抓住最主干、最核心的内容来复习,切忌求偏求难。正确处理课标、考纲与教材三者之间的关系。基本原则是:从课标中找方向,从考纲中定范围,以教材为基本素材,形成同心圆,寻找结合点。本单元内容可以使用下列复习方法: (1)“关键词辐射法”理解有关生物技术的原理与方法,本单元设计了众多生物实践内容。有果酒、果醋、泡菜和腐乳的制作,有加酶洗衣粉洗涤效果的测定、微生物的实验室培养、果汁的生产,还有DNA、胡萝卜素、植物芳香油的提取,加酶洗衣粉洗涤效果的测定、微生物的实验室培养、果汁的生产等等。在复习时可以将这些生物技术实践有关的关键词作为课堂引子展示给学生,配以精美的果酒、果醋、泡菜、腐乳
5、、果汁等图片,引导学生说出每一关键词和图片在本单元中涉及的内容及相关操作步骤与使用的操作工具。 (2)“综合分析法”理解培养基的成分 教师在介绍液体和固体培养基时,宜结合教材提供的,图片进行讲解,以增进学生的感性认识。教材以表格的形式提供了一个培养基配方的实例。教师可以采用资料分析的形式,让学生通过主动的分析,认识培养基的基本组成成分,并结合必修模块“分子与细胞”中的知识,让学生从生物构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。 (3)“列表比较法”突破重点内容 “微生物培养基的类型及应用”和“直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化”的比较。 酵母菌、醋酸菌、毛霉和乳酸菌是生
6、物技术实践考点中常见的几种微生物,是本单元的难点之一。复习时可,引导学生从生物类型、代谢类型、繁殖方式、生产应用、发酵条件等几个方面进行归纳总结,可以帮助考生正确分辨这几种发酵菌。 物质的提取分离方法有水蒸气蒸馏法、压榨法、有机溶剂萃取法,这几种方法的对比比较是本考点的重点内容,在复习时可以引导学生从实验原理、方法步骤和适用范围三个方面列表比较,加深对本知识点的理解。 直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的比较是本单元的另外一个重点。复习时引导学生从制作方法、是否需要能量、优点、缺点等方面进行比较,从区别上理解和把握直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的区别。,“图解分析法”理解有关操作程序
7、本单元有许多操作性很强的生物技术实践操作,如果酒、果醋的制作、PCR技术扩增DNA、凝胶色谱法对血红蛋白进行纯化等等,在复习时引导学生将这些操作程序整理成图解的形式,可以帮助考生准确掌握。 2课时安排: 本单元分为4讲,建议共6课时完成,每讲1课时,单元测试和讲评各1课时。,固体培养基,液体培养基,碳源,氮源,特殊营养物质,防止外来杂菌的入侵,温和,强烈的理化,煮沸消毒法,灼烧灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌,平板划线法,稀释涂布平板法,探究点一微生物的实验室培养,一、微生物的代谢类型 1.根据能否将CO2合成有机物可分为自养型生物与异养型生物。 自养型生物:能利用CO2等简单的无机物合成贮存能量
8、的有机物的生物。 异养型生物:不能利用CO2等简单无机物合成有机物,只能以其他生物制造的有机物为食的生物。 2.根据同化过程中能量来源不同,可分为光能自养型、化能自养型、化能异养型。它们的比较如下表:,二、培养基微生物生长繁殖的营养物质 培养基的种类,【说明】 培养基的配制原则 (1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等),如培养基可由简单的无机物组成;生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质,而分类鉴定培养基内必须加入已知化学成分的物质; (2)营养要协调,注意各种营养物质的浓度和比例;pH要适宜,各种微生物适宜生长的pH范围不同,细菌6.57.5,放线菌7.58.5、真菌5.06.
9、0。 (3)常见微生物的选择培养基: 加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌,加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞 2.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 3.微生物的营养物质及功能,【说明】 1.生物的营养 营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动,保证发育、生殖所需的外源物质。
10、 在人及动物,营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类;在植物,营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类;在微生物,则有水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。 2.代谢类型不同的微生物,对培养基营养成分的要求不同,如自养型微生物可以利用无机碳源,而异养型微生物则必须利用有机碳源。不论代谢类型如何,微生物对营,养物质的需求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。 3.微生物需要补充生长因子是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。 三、微生物培养中几种实验操作的注意事项 1.倒平板 (1)培养基灭菌后,需冷却至50 左右时才能倒平板。 (2)左手拿培养皿,右手拿锥形瓶
11、,左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开。 (3)整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。 (4)平板冷凝后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落,入培养基,造成污染。 (5)若倒平板时,培养基溅在皿盖和皿底之间的部位,这个平板应丢弃。 2.平板划线操作 (1)第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧目的如下表:,(2)灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)画线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。 3.稀释涂布平板 (1)稀释操作时:每支试管及其中9 mL水、移
12、液管均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰12 cm处。 (2)涂布平板时: 涂布器用70%酒精消毒,取出时,多余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。,不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。 酒精灯与培养皿距离要合适,移液管头不要接触 任何物体。 【说明】 (1)平板划线时不能划破培养基的原因 一是一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 (2)在做第二次以及其后的划线操作时,要从上一次划线的末端开始划线;,划线后,线条末端细菌的数目比线条起
13、始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 四、无菌技术 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。,五、大肠杆菌的纯化和保存 1.过程: 【说明】 (1)接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,并在培养基表面形成单个细胞繁殖而成的子细胞群体菌落。,(2)接种过程仍为无菌操作。 2.菌种的保存 (1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。 临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养。当菌
14、落长成后,将试管放入4 的冰箱中保藏。以后每36个月,都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。 缺点:这种方法保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异。,(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。 在3 mL的甘油瓶中,装入1 mL甘油后灭菌。将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在20 的冷冻箱中保存。,【答案】 (1)琼脂(2)先调pH,后灭菌 (3)通用选择硝酸铵 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯碳源(氯苯)最早耗尽,【解析】 (1)固体培养基必须含有适量的琼脂; (2)配置培养基时应先调pH后灭菌; (3)号培养基是为了获得更多的菌株,属于通
15、用培养基,号培养基是为选择出SP1菌株属于选择培养基,号培养基成分中含N物质为硝酸铵,则应由它为SP1菌株提供氮源;,(4)在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体,以度过不良环境; (5)SP1菌株是以氯苯为碳源,当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而不能继续生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停止生长。,【点评】 本例题主要考查培养基的配制和微生物培养的相关知识。培养基配制时,先调pH,后灭菌,防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基;微生物对营养物质的需求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等五类。选择培养基与鉴别培养基的配制、用途不同。下面的变式题是从不同侧面考查微生物对营养物质的需求和培养基的用途
16、。,【答案】 D,【解析】本题考查的是微生物部分内容,硝化细菌是自养细菌,能利用氨氧化分解时所释放的能量为自身生命活动合成ATP,故氨可作能源物质,同时也可把氨转化成氨基酸或核酸、ATP等物质,故也可作氮源,A正确;某些细菌如光合细菌就能利用光能固定二氧化碳来合成有机物,B也正确;生长因子的概念就是微生物生长过程中自身不能合成,必须需要补充的一部分小分子有机物,C也正确;含伊红和美蓝的培养基是专门用来鉴定大肠杆菌的培养基,使用时,将带菌材料接种在灭菌的伊红美蓝培养基中,如果材料中含有大肠杆菌,就会在培养基上长出具有金属光泽的紫黑色菌落,所以本题应该选D。,细胞壁,胞间层,催化一定化学反应,反应物的减少量,产物的增加量,酶制剂,蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶,纤维素酶,小分子物质,微生物和藻类,催化剂,专一性和