血型复检规则课件

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1、血型复检规则及案例分析,武汉亚心 2014.5.8,正确的血型鉴定是 保证临床输血安全的首 要条件。,复检规则,仪器不能成功判读 正定型4+和(或)反定型2+ 正反定型不一致 RhD阴性,仪器不能成功判读,仪器不能成功判读,正定型EW原因:样本有凝块,反定型EW原因:频繁出现,加样注射泵漏气,加样不准,厂家维护处理。,仪器不能成功判读,FIB原因: 抗凝不充分,纤维蛋白析出。(外观可见) 高纤维蛋白血症或高球蛋白血症。(外观不可见),试管法复查,加盐水可消除干扰,HEM:标本溶血,MF:1、异型输血 2、骨髓移植 3、白血病 4、亚型,仪器不能成功判读,不轻易报亚型 在备注内注明抗原减弱,TM

2、C:红细胞过多,FC:红细胞过少,反定型2+,原因:1、小于6个月的小儿 2、老年患者 3、低丙种球蛋白血症,处理:小儿,正定型为主; 对于2和3,加强反应(加大血清量;放4度冰箱),患者信息:8F 692527 男 1岁,试管法复查结果:,ABO正反定型不一致,ABO正反定型不一致,不规则抗体阳性,抗体筛查:阳性 抗体鉴定:抗-E Rh表型:CCee,ABO正反定型不一致,抗体筛查:弱阳性 抗体鉴定:抗M 表型:NN型,不规则抗体阳性,ABO正反定型不一致,6F 693571 女 1岁,小儿未产生抗体,以正定型判定血型,DAT阳性,ABO亚型-案例1,病例介绍:CCU患者 693427 男,

3、52岁,因反复胸痛收治入院,入院诊断为冠心病、主动脉夹层、高血压,有痛风史,无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。,分析:正定型非常弱,0.5+ 判断是真阳性还是假阳性 1、红细胞洗涤后检测 2、试剂卡重复试验 3、患者DAT试验,ABO亚型-案例1,排除假阳性,可以确定为真阳性。,试管法复查,患者DAT:阴性,洗涤后重 做的结果,0.5+,ABO亚型-案例1,试管法复查结果,抗A、B血清厂家:南京欣迪,结果显示:A抗原阴性,与卡式结果不一致。 分析:考虑是否是亚型抗原由于某些抗原位点的缺失,与某些单克隆血清反应,与某些单克隆不反应。,换一个厂家的抗A、B血清,ABO亚型-案例1,换用

4、上海血生的抗血清检测,结果显示:A抗原也很弱,与卡式结果一致。 分析:正定型AB型,反定B型,正反定型不一致,A抗原很弱,可能为A亚B,如果是A亚B,红细胞上应该是A亚型抗原而不是正常A抗原,反定中的抗A应该是不规则抗A1,而不是抗A。,亚型试剂鉴定,ABO亚型-案例1,抗-A1 抗-AB 抗-H A2C,亚型试剂,鉴定红细胞是A1抗原还是A亚型抗原 红细胞被抗AB凝集的程度 红细胞的H反应性程度 血清内有无抗A1抗体,ABO亚型-案例1,用抗-A1血清验证红细胞上 A亚型抗原,确定为A亚型抗原,而不是A抗原,也有可能抗原太弱而出现假阴性结果(不能排除),ABO亚型-案例1,用A2C来鉴定血清

5、中的是抗A还是抗A1,结果如下 (由于A2C已过期,加做了阴性和阳性对照),阴阳对照相符,可判断该抗体为抗A1抗体,ABO亚型-案例1,用抗-H进一步验证亚型红细胞上的H抗原,H抗原强弱:OA亚/B亚 B AB亚型 A1 A1B,反应结果介于Bc和A1Bc之间 此鉴定目的主要与B(A)相区别:B(A) 与抗H呈强阳性反应3-4+,相当于O细胞反 应强度。,ABO亚型-案例1,综上所述:红细胞上有很弱的A抗原,正常B抗原,血清中有不规则抗A1。 可定为A亚B型 与临床沟通:该患者曾在A院住过院,患者自己不清楚既往的血型。 与A院联系:该患者2012年在A院的血型鉴定为B型。? 为进一步确定A抗原

6、的存在,进行吸收放散试验。,吸收放散试验的检测原理:由于A抗原很弱用常规血清学方法鉴定很弱或未能鉴定出来时,可通过抗A血清来吸收待检红细胞,如果存在A抗原,就会将血清中的抗A吸附在红细胞上,然后再将红细胞上的抗A放散下来,将放散液再与A型试剂红细胞反应,如果有凝集,证实A抗原的存在,如果阴性,不能证实A抗原的存在。同时用O细胞做阴性对照,ABO亚型-案例1,吸收放散,抗A血清的选择,1、单抗 效价高 ,需稀释,另需验证(能与亚型红细胞反应) 2、多抗(人源),可以用于亚型的鉴定和吸收,但效价低。,选择:上血 抗A,4倍稀释 献血者B型血浆作为人源抗A,吸收放散试验,PC OC(对照),4 1h

7、,离心吸出上清,4NS洗涤6次,56热放散10min,立即离心,吸出上清液(放散液),再次离心,单-A,与AC反应,离心看结果,证明有A抗原存在,吸收放散试验,PC OC(对照),4 1h,离心吸出上清,4NS洗涤6次,56热放散10min,立即离心,吸出上清液(放散液),再次离心,放散液中加入AC,4 过夜,人-A,离心看结果,未能成功吸收,ABO亚型-案例1,人-A吸收前后效价对比:无明显差异 吸收前效价:16 吸收后效价:8,考虑人源抗A效价太低,未能成功被弱A抗原吸收,但单抗A能被成功吸收,放散阳性。,结论:A亚B,血清中有不规则抗A1。 输血或备血建议:O型或B型洗涤红;AB型血浆,

8、ABO亚型-案例2,正反定型不一致,首先排除不规则抗体。,病例介绍:CCU患者 634582 男,58岁,入院诊断为冠心病、高血压,无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。,抗体筛查阴性,排除ABO系统以外的抗体。,ABO亚型-案例2,试管法复查,A抗原减弱,血清中有不规则抗A? AB的亚型?,AxB?或B(A)?,B(A),同cisAB的遗传方式相似,是一种罕见的ABO亚型, cisAB是在1964年发现,B(A)是在1985年发现; 分子机理:被认为是遗传学上的B型,在B基因基础上发生错义突变 ,由于单碱基突变,变异的B基因具有编码双功能活性酶的能力,血清学除了表现为B抗原特异性外,

9、还表现为少量A抗原特异性。 血清学特点:较弱的A抗原和接近正常的 B抗原特异性,血清中有较强的抗-A。,同,同,异,异,同,进一步排除AXB,AXB与A2细胞不反应,此点是鉴别B(A)与AXB最有价值的依据之一,AXB与抗-H呈弱凝集,而B(A)与抗-H呈强凝集,排除AXB,红细胞与抗A1不反应,符合B(A)特征。,ABO亚型-案例2,结论:根据以上血清学实验,初步定为B(A) 亚型,须经分子生物学实验进一步确认。 基因检测结果:B(A)02/O 700CG 家系调查:患者儿子、姐姐、小妹和大妹,ABO亚型-案例2,ABO亚型-案例2,姐姐,儿子,大妹妹,小妹妹,B(A),AB3,A型,AB3

10、,冷自身抗体,病例介绍:CCU患者 679896 男,56岁,入院诊断为心梗,无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。,弱阳性,抗筛阴性,冷自身抗体,试管法复查,确定为冷自身抗体,冷自身抗体,冷抗体效价测定:1:1024,结论:A型,冷自身抗体导致正反定型不一致。,DAT阳性很强,主要以抗C3为主,是冷自身抗体的一个特性,考虑效价也很高。,冷自身抗体,输血治疗:保温输注,血液加温、肢体保温 心外科手术:慎重选择,体外实验: 不同温度下的反应情况:RT、30、32 、35 、37 ,外科决定该患者是否可以进行手术: 如不能,进行原发病治疗,待抗体低度下降后再安排手术。 如可以,手术CPB温度的选择,CPB 深低温、中低温、浅低温、常温,根据手术类型及复杂程度决定,RH阴性,病例介绍:C28 患者 677312 女,55岁,结论:D变异型,测序结果:与RHD*00101参考序列相比较,第1、2、3、5、6、7、8、9、10外显子无突变,第4外显子491位点发生纯合子突变AT.,复检记录,所有复检,均需在血型复检记录表上进行登记,如有疑难血型,还需在输血相容性检测疑难标本实验记录表上进行试验记录。,1-4月份血型复检分析,血型鉴定总测试:6809,复检例数109例,复检率:1.6%,40,Thank you!,

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