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1、斐林试剂和双缩脲试剂区别斐林试剂和双缩脲试剂区别 1、试剂的浓度和配制方法不同、试剂的浓度和配制方法不同 斐林试剂:甲液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液;乙液:0.05g/mL 的溶液。 4 CuSO 使用前临时配制,在 2mL 的甲液中滴入 4 滴5 滴乙液,振荡使混合均匀后即可。 双缩脲试剂:A 液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液;B 液:0.01g/mL 的溶液。 4 CuSO 分别配制好 A 液和 B 液即可。 2、试剂的作用和鉴定原理不同、试剂的作用和鉴定原理不同 斐林试剂: 作用:可鉴定可溶性还原糖。 原理:甲液和乙液混合后产生沉淀,与含醛基(CHO)的可溶性 2 )OH(
2、Cu 2 )OH(Cu 还原糖,在加热条件下反应,将还原为砖红色的沉淀。 2 )OH(CuOCu2 双缩脲试剂: 作用:可鉴定蛋白质溶液。 原理:在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲()能与反应, 22 CONHNHNCOH 2 Cu 形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键(CONH) , 因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。 3、试剂的使用方法不同、试剂的使用方法不同 斐林试剂:使用时现配现用,要水浴加热。如果斐林试剂放置一段时间,因 2 )OH(Cu 沉淀在溶液底部而无法使用。 使用时, 甲液和乙液不可分别加入到待测液中, 否则, 待测液 (苹 果组
3、织样液)中的有机酸会中和 NaOH,使产生的不足而影响鉴定。 2 )OH(Cu 双缩脲试剂:使用时,双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液要分别先后加入到待测液中, 不需要加热。双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液不可以混合后再加入待测液。如先混合, 则会产生沉淀而无产生。加入的双缩脲试剂 B 液()也不能过量, 2 )OH(Cu 2 Cu 4 CuSO 否则蓝色的会遮盖产生的紫色。 2 )OH(Cu 4、反应中出现的颜色不同、反应中出现的颜色不同 斐林试剂鉴定可溶性还原糖,出现的颜色变化为:浅蓝色棕色砖红色。 待测液加入刚配制的斐林试剂,溶液是浅蓝色;水浴加热后,一部分被还原 2 )OH(Cu 为砖红色的,溶液呈现两种颜色的混合色棕色;随着反应的完成,全OCu2 2 )OH(Cu 部被还原为,溶液呈砖红色。OCu2 双缩脲试剂鉴定蛋白质,出现的颜色变化为:无色浅蓝色紫色。 加入双缩脲试剂 A 液,溶液无色;再加入双缩脲试剂 B 液,有形成,溶液呈浅蓝 2 Cu 色;振荡均匀后,反应完成,溶液呈紫色。